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两种非蛋白氨基酸的新功能:与丙二醛相互反应的机制 总被引:1,自引:0,他引:1
丙二醛(MDA)是生物分子氧化的典型羰基中间体,是脂质过氧化的典型终末产物.这类活性羰基中间体引起组织蛋白的老化与恶化及DNA损伤.牛磺酸在人体内具有非常广泛的生理功能,而γ-氨基丁酸(GABA)是神经系统的一种重要抑制性神经递质,因此二者是两种很重要的非蛋白氨基酸.研究了在生理条件下牛磺酸或GABA是否直接诱捕MDA从而保护组织蛋白不受伤害.将牛磺酸或GABA与MDA在生理条件下温浴48 h,经高效液相、质谱等分析手段分析,发现牛磺酸或GABA与MDA直接反应,通过HPLC分离,都生成两种主产物,一种是没有荧光的紫外吸收峰为274~278 nm的产物,一种是有荧光的产物,这种类似脂褐素(Ex.392~395 nm/Em.456~364 nm)的荧光产物是1,4-二氢吡啶衍生物.牛磺酸或GABA与MDA的反应表明它们在生理条件下具有清除活性羰基的功能,而这种毒性羰基与很多羰基紧张相关的疾病及衰老有关. 相似文献
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用于生物检测的链霉亲和素修饰γ-Fe_2O_3@Au复合颗粒的制备与表征 总被引:1,自引:0,他引:1
制备了粒径为30nm左右的γ-Fe2O3磁性颗粒,利用巯基硅烷(MPTES)的偶联作用最终制备了粒径约为35.9nm的金磁复合颗粒.用X射线粉末衍射仪(XRD)、透射电子显微镜(TEM)、紫外可见吸收光谱(UV-Vis)、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)、振动样品磁强计(VSM)等方法对所得金磁颗粒的表面形貌、大小、结构、光学和磁学性质进行了表征.结果表明:金成功地包覆到了γ-Fe2O3颗粒的表面,所得金磁颗粒具有超顺磁性.利用静电吸附作用,链霉亲和素有效修饰到了γ-Fe2O3@Au复合磁性颗粒表面.通过扫描仪检测其捕捉Cy3标记寡核苷酸序列后的荧光信号,证明了链霉亲和素修饰的γ-Fe2O3@Au复合磁性颗粒有生物活性,且没有荧光背景,在生物检测领域表现出了很大的应用前景. 相似文献
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“软平板印刷”微结构制备技术为微米和亚微米器件的制备提供了一条新的途径 [1] ,已被电子学家和材料学家所应用 ,近年来进入了生物学领域[2 ] .本实验室将这一方法与生物分子电子学相结合 ,提出了用于 DNA芯片在片合成的分子印章法 [3,4 ] .分子印章法的实质是接触压印与组合化学相结合的固相界面反应 .聚二甲氧基硅氧烷 ( PDMS)是一种软印刷的优良材料 [5] ,但是由于其疏水性和较差的机械性能 ,必须对其进行改性才能用来制备 DNA分子印章 [6 ] . 聚氨酯作为一种功能材料 ,由于分子中交替的软、硬链段及其不同的热动力学性能而形成… 相似文献
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将单分子发夹寡核苷酸固相延伸形成双链寡核苷酸, 以纳米金颗粒标记NF-κB并银染放大, 采用阳极溶出电位法对NF-κB进行检测. 结果表明, 本法检测序列特异性蛋白质具有高度特异性、高灵敏度和快速等特点, 为转录因子调控机制、开放阅读框识别和功能基因检测等的研究提供了有利工具. 相似文献
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一种基于磁性纳米粒子PCR的高通量SNP分型方法 总被引:1,自引:0,他引:1
利用磁性纳米粒子PCR扩增(MNPs-PCR)和等位基因特异性双色荧光探针(Cy3, Cy5)杂交, 建立了一种单核苷酸多态性(SNP)分型的新方法. 应用该方法对9个样本MTHFR基因的C677T多态进行检测, 野生和突变型样本正错配信号比大于9.0, 杂合型正错配信号比接近1.0, 分型结果经测序验证. 此方法无须产物纯化、浓缩, 扫描分型结果快速、直观, 是一种操作简单、快速、高通量、高灵敏度的分型方法. 相似文献
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聚丙烯片基不同气氛下等离子体改性及DNA原位合成研究 总被引:2,自引:0,他引:2
分别采用氮气/氢气、氨气和氧气三种不同气氛的等离子体处理了聚丙烯片基,先使其表面接枝功能性基团,然后分别进行寡核苷酸原位合成.光电子能谱(XPS)证实了在其表面分别接枝了大量氨基和其它含氮基团.荧光扫描分析并比较了在三种方法处理的聚丙烯片基上合成的寡核苷酸与靶序列杂交后的荧光强度.结果表明:三种方法处理的聚丙烯片基都可用于DNA原位合成,但从处理工艺和荧光分析结果来看,以氮气/氢气等离子体处理的聚丙烯片基最佳。 相似文献
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采用高效化学发光试剂3-(2'-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3"-羟基)苯-1,2-二氧杂环丁烷磷酸(AMPPD)作为检测底物, 并将传统的ELISA两步双抗夹心法改为一步法, 得到了高灵敏测定人血清中心肌肌钙蛋白I(cTnI)的化学发光酶免疫分析优化条件. 采用单因素变化法和方阵滴定法得到的最佳实验条件为: 捕获抗体包被浓度为10.0 μg/mL, 以pH=7.0的PBS作为免疫反应缓冲底液, 以含质量分数为1.0%的BSA pH=9.6的碳酸盐溶液缓冲液, 于4 ℃封闭过夜, 生物素-检测抗体(Biotin-IgG2)以及碱性磷酸酶-亲和素(ALP-Avidin)结合物均采用1:2000稀释度, 免疫反应条件为37 ℃, 孵育时间60 min, 以去离子水作为洗涤剂, 以1:100稀释的AMPPD作为发光反应底物, 发光反应时间10 min(37 ℃). 检出限为0.02 ng/mL, 比现行ELISA法灵敏度提高一个数量级; 测定周期约75 min, 比两步法ELISA快得多; 线性范围(0.04~36.20 ng/mL)比ELISA法扩宽了两个数量级; 加标回收率97.5%~102.8%, 对标准样品的测定结果与用ELISA法的测定结果吻合; 重复性好, 3个样品批内变异系数均小于8.5%(n=12). 相似文献
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纯二氧化钛介孔分子筛的合成与表征 总被引:10,自引:0,他引:10
分别用不同链长的烷基磷酸酯和脂肪胺两类不同表面活性剂为模板剂合成了纯二氧化钛介孔分子筛(Ti-TMS1,Ti-TMS2),并用溶剂法代替高温焙烧法成功地脱除了模板剂。用 XRD、TEM等测试手段对这类材料的结构进行了表征,研究了反应条件对所制备样品的结构的影响。结果表明:得到的纯二氧化钛介孔分子筛为较规则的六角堆积排列,孔径为2.7~4.4 nm, 且其纳米孔径大小可以通过改变烷基磷酸酯模板剂的烷基链长而调节。此外还发现,采用的烷基磷酸酯模板剂的烷基链越长,制得的二氧化钛介孔分子筛结构及晶型的完整性越好。进一步的研究表明,模板剂脱除之后,Ti-TMS2结构的晶体完整性和稳定性明显不如Ti-TMS1的好,且Ti-TMS1的介孔结构优于Ti-TMS2的介孔结构。 相似文献
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基于磁性颗粒微阵列与双色荧光杂交,建立了单核苷酸多态性(Single nucleoitide polymorphism,SNP)分型方法。将利用不对称扩增得到的含有待检测位点生物素标记的单链PCR产物固定在链亲和素修饰的金磁纳米颗粒(Gold magnetic nanoparticles,GMNPs)表面;将ssDNA-GMNPs混合物点样在底部固定有磁铁的载玻片上构建磁性颗粒微阵列,然后在基因框中与双色荧光探针杂交;杂交完全后,充分洗涤,通过扫描获得分型结果。通过优化不对称PCR的扩增条件,直接扩增出产量较高的单链DNA作为靶序列用于分型。利用本方法对24个样本MTHFR基因的C677T位点多态性进行了检测。实验证明,本方法步骤简单,易实现自动化操作、非常适用于分子诊断与法医鉴定。 相似文献