SBA-15固定化黑曲霉脂肪酶对柚皮苷的区域选择性酰化

柚皮苷(Naringin)是一种天然存在的生物类黄酮,分布于较多种类的水果和蔬菜中,具有抗癌症、抗氧化和保护心血管等多种生物活性。但因其较差的生物利用率致使其深度开发和临床治疗应用面临着严重阻碍。为了提高柚皮苷的生物利用价值,采用SBA-15固定化黑曲霉脂肪酶(Aspergillus niger lipase, ANL)对柚皮苷进行了酶法转化研究。系统考察了在非水相有机介质中固定化ANL催化柚皮苷酰基化反应的酶活及区域选择性的影响因素。结果表明：酰基供体、反应溶剂、水活度及反应温度对柚皮苷的酰化反应具有不同程度的影响。在最佳催化条件下,酶活最高(153±5μmol·h^-1·g^-1),酶转化率可达92.00%±2.43%,且固定化ANL对柚皮苷的C-6′位置具有区域选择性(>99%)。     

固态发酵-水煮耦合炮制牛蒡子提高牛蒡子苷元含量

研究了黑曲霉Aspergillus niger ZJUT712菌株固态发酵和水煮工艺相耦合炮制牛蒡子. 结果表明,该工艺提高了牛蒡子中有效成分牛蒡子苷元的含量,从而有利于促进牛蒡子摄入体内迅速起效. 最佳固态发酵炮制条件为: 0.5 g牛蒡子粉、 3 g麸皮、 2 g甘蔗渣、 0.3 g蛋白胨和10 ml Mandels营养液,固液比1∶3.6 g/ml, 初始pH 5.6, 30 ℃发酵 7 d. 牛蒡子苷元产率随底物初始浓度的增加而降低. A.niger ZJUT712转化0.174 mmol/L牛蒡子苷的产率可达93.0%. 7 d时间内A.niger ZJUT712水解牛蒡子苷的过程符合Monod方程,反应动力学常数为Vm=0.083 7 mmol/(L·d), Km=0.16 mmol/L.     

黑曲霉发酵橡子生产柠檬酸

将橡子仁粉碎后，经酸水解、中和及滤洗制成发酵用糖液，接入黑曲霉新菌株ＨＡ６０８，并加入２．０％～４．０％的产酸促进剂Ｂ，发酵生产柠檬酸．糖液浓度为１０％～１２％时，发酵周期１２０～１３０ｈ，转化率１１０％以上     

He-Ne激光在异种间原生质体融合中的应用

用632.8nm 12mW的氦氖激光及聚乙二醇（PEG）复合诱导融合枯草芽孢杆菌与黑曲霉原生质体.为了提高枯草芽孢杆菌的糖化酶产酶能力,对两亲本在融合中采用不同的激光照射时间,选育出的融合子与枯草芽孢杆菌亲本相比,糖化酶酶活提高了2倍,并通过酯酶同工酶谱分析对融合子进行了鉴定,结果表明:融合子遗传性状与亲本相比发生了显著变化,通过传代培养,融合子具有良好的遗传稳定性.     

He-Ne激光诱变黑曲霉Sx的原生质体

对生淀粉糖化菌黑曲霉Sx用混和酶制取原生质体进行了探索.在GM培养基中加入一定量的Cu²⁺、Mn²⁺,原生质体产量较高;采用pH4～5的蜗牛酶、纤维素酶、溶菌酶的混合酶,最佳浓度比为:1.5:3.5:1.5(mg/mL).取在GM培养基中培养17～18h的菌丝,在32℃酶解3h,原生质体产量最高,达到2.4×10⁵个/mL;在加入β-巯基乙醇及二硫苏糖醇处理菌丝时,原生质体产量提高近3倍.在再生培养基中,加入终浓度为30mmol/LMgSO₄时,原生质体再生率由16.7%提高到25.6%.用He-Ne激光照射原生质体时,功率9mW照射30min时致死率为50%,随着时间的延长,原生质体存活率降低.采用波长632.5nm、功率9mW、光斑直径5mm的He-Ne激光多次照射诱变,筛选出一株酶活力最高菌株黑曲霉Sy,活力提高51%,经连续传代5次,酶活力稳定.     

黑曲霉葡萄糖淀粉酶基因在酿酒酵母中的表达和分泌

将黑曲霉葡萄糖淀粉酶GAI的cDNA插入到质粒pMA91的酵母PGK基因的启动子和终止序列之间,构成含葡萄糖淀粉酶基因的表达载体pMAG69。用原生质体转化法引入酿酒酵母GRF18,实现黑曲霉葡萄糖淀粉酶基因在酿酒酵母中的表达,利用基因本身的信号序列使99％以上的酶蛋白分泌至胞外,构建的酵母菌株在含10％淀粉的培养基中2天内能水解87％的淀粉,对酵母转化子的稳定性检测显示,重组质粒pMAG69可在酿酒酵母中较稳定地存在。     

黑曲霉菌体制备壳聚糖

壳聚糖是利用微生物真菌本身细胞壁的成分中含有壳聚糖，进行自身催化从而脱去乙酰基，如从丝状真菌中提取壳聚糖，但产品产量低。     

紫外激光等选育生淀粉糖化酶高产菌株及其应用

以紫外线、LiCl、5氟尿嘧啶、HNO₂为诱变剂,黑曲霉Sx为出发菌株,选育出生淀粉糖化酶酶活力提高12%的突变株黑曲霉S’x制取黑曲霉S’x的原生质体,用HeNe激光照射,经反复筛选得到突变株黑曲霉Sy,其酶活力较出发菌株提高51%,而酸性蛋白酶活力降低45%并对其在农作物秸杆的应用进行了研究.     

A Taxatetraene from Microbial Transformation of Sinenxan A

Sinenxan A [2α, 5α, 10β, 14β-tetraacetoxytaxa-4(20), ll-diene, 1] was biotransformed by a filamentous fungus, Aspergillus niger JCM 5546, and an unusual taxatetraene [2α,5α-acetoxytaxa-4(20), 10(11), 12(18), 13(14)-tetraene, 2], together with two known products,10β-deacetyl sinenxan A (3) and 10β, 14β-dideacetyl sinenxan A (4) were produced.     

黑曲霉催化烯烃的不对称双羟基化反应的机理和应用

以酶和活细胞为催化剂的生物催化/生物转化技术已受到广泛关注[1～3].实际上,生物催化作为对环境友好的绿色合成方法,无疑将成为未来医药中间体和精细化学品的核心制造技术.据估计,自然界大约有106～7微生物物种[4],其中只有大约1%～10%得到分离、培育和某种程度的研究开发及利