定量分析小鼠肝和肌肉组织磷酸腺苷含量及其影响因素

在定量分析动物组织ATP、ADP和AMP方法中，HPLC法已成为一种快速、灵敏、准确、廉价的检测手段。然而，有关其影响因素方面的研究报道较少，且主要集中在色谱柱、流动相和流速等方面。本实验着重探讨动物组织样品的保存条件和前处理过程对检测结果的影响，以便在动物组织样品ATP、ADP和AMP含量的检测中更合理地使用HPLC法，准确反映各成分的真实含量。     

高脂饮食对小鼠脂肪代谢和矿物元素代谢的影响

为探讨高脂饮食对小鼠脂肪代谢和矿物元素代谢的影响,用昆明(KM)小鼠24只,出生28 d后随机分成2组,各12只,分别给予高脂饲料与普通饲料,饲养至第9周眼球取血处死,取皮下、腹腔、肠系膜脂肪,毛,肝,血,计算体质量脂肪质量比,测定毛、肝、血中Zn、Ca、Cu、Mn、Mg、Fe含量。结果表明,高脂饮食小鼠体质量增加(P<0.05),单位腹腔脂肪及血Ch显著性增加(P<0.01)。肝Zn、Cu、Mg、Fe、Mn显著降低(P<0.01),血凝块Zn升高(P<0.05),Cu降低(P<0.05),毛Mg降低(P<0.05)。提示高脂饮食引起体质量与血脂增加,脂肪堆积,矿物元素代谢紊乱;不同器官矿物元素的代谢紊乱有差异,以肝脏最显著。     

高效液相色谱-串联质谱法测定小鼠组织中的新型抗心力衰竭化合物AF-HF001

建立了基于高效液相色谱-质谱联用技术的新型抗心力衰竭化合物AF-HF001在小鼠组织中的测定方法,并考察了其在小鼠体内的组织分布。采用液-液萃取对样品进行预处理,以Thermo Hypersil Gold C18色谱柱进行分离,流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,采用选择性反应监测(SRM)正离子模式检测分析物。小鼠组织中AF-HF001含量在0.5~10μg/mL范围内线性关系良好(r>0.996),在加标量为1.5,4,10μg/mL的组织样品中,提取回收率大于58%,基质效应在100.38%~109.99%之间,日内和日间精密度RSD均小于15%。该方法为AF-HF001的体内分布研究及进一步药物研发提供了依据。初步结果表明,该化合物能够迅速到达心脏并迅速代谢,主要分布在肝脏组织中,其他组织中分布较少。     

明胶改性聚醚醚酮微载体的制备、表征及性能

微载体因其具有较高的表面积/体积比等优点可以大大提高哺乳动物细胞培养效率,被广泛应用于生物制药和组织工程等领域。 但微载体多为一次性使用,不耐高温,且主要依赖进口,价格昂贵,因而限制了其国内的应用和推广。 聚醚醚酮(PEEK)材料具有良好的生物相容性、化学稳定性及耐高温等特性,是一种优异的微载体材料,但存在熔点高,加工方法单一和生物惰性等缺陷。 本文以浓硫酸为溶剂,乙醇溶液为萃取剂,采用气流辅助滴注/相分离法,将PEEK制备成448 μm左右,尺寸均匀的微球;经氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)处理,获得表面氨基化修饰的PEEK微球(PEEK-N);进一步,以N,N'-羰基二咪唑(CDI)为活性中间体,将明胶分子接枝到PEEK-N微球表面,获得表面明胶修饰的PEEK微载体(PEEK-G)。 对材料的物理化学性质、表面接枝量进行表征;并通过体外细胞实验评估其细胞毒性、细胞粘附效率和细胞增殖能力。 结果显示,通过该方法制备成功了3种不同明胶接枝含量的PEEK细胞微载体(PEEK-G1,PEEK-G2,PEEK-G3),其中明胶含量较高的PEEK-G3毒性最低,细胞粘附和增殖效果最理想。     

高效液相色谱法测定小鼠肝脏中的两种苯并三唑类紫外线吸收剂

建立了小鼠肝脏中UV-327和UV-328两种苯并三唑类紫外线吸收剂的高效液相色谱测定方法。样品经正己烷-丙酮(体积比1:1)提取,Waters Symmetry~?C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,以甲醇为流动相,检测波长为340 nm。紫外线吸收剂UV-327和UV-328均在0.05～20.0μg/mL范围内线性关系良好(r≥0.9998),检出限和定量限分别为0.01μg/mL和0.03μg/mL。UV-327和UV-328低、中、高3种浓度(0.20、2.00、16.0μg/mL)加标样品的回收率为94.9%～98.5%与97.0%～102.2%;日内精密度为3.7%～5.6%与3.8%～5.3%;日间精密度为2.8%～8.2%与2.8%～9.5%;提取回收率为94.2%～98.9%与94.3%～97.8%;基质效应为92.5%～110.8%与92.3%～112.3%。该方法准确、简便,适用于小鼠肝中紫外线吸收剂UV-327和UV-328的测定。     

重离子辐射提高腺病毒介导小鼠黑色素瘤细胞转染率的研究

探讨12C6+ 离子束辐射对用带有绿色荧光蛋白基因的缺陷性腺病毒（AdCMV GFP）转染小鼠黑色素瘤细胞(B16细胞系)的影响。 采用不同剂量的12C6+ 重离子束辐射经AdCMV GFP 转染的B16细胞， 利用流式细胞仪检测腺病毒的转染率。 结果表明， 12C6＋重离子束辐射能提高腺病毒对B16细胞的转染率， 且具有量效关系。 此外， 先转染后辐射法比起先辐射后转染法能更显著地提高转染率。The effect of 12C6+ beam irradiation on AdCMV GFP (a replication deficient recombinant adenoviral vector containing CMV promoter and green fluorescent protein) gene transfection efficiency for murine melanoma cell B16 has been investigated. B16 cells infected with AdCMV GFP were irradiated by different doses of 12C6+ beam. The transfection efficiency was assessed by flow cytometry (FCM). Results show that 12C6+ beam irradiation can improve tansfection efficiency of AdCMV GFP on murine melanoma cell B16 in a dose dependent manner. In addition， the tansfection efficiency in pre tranfection plus irradiation group is higher than that in pre irradiation plus tranfection group at the same dose irradiation dose.     

超高效液相色谱-串联质谱法测定小鼠纹状体中多巴胺及其代谢物的含量

提出了超高效液相色谱-串联质谱法同时测定小鼠纹状体中多巴胺(DA)及其代谢物高原儿茶酸(DOPAC)与高香草酸(HVA)含量的方法。取小鼠纹状体约10 mg,用200μL 2%(体积分数)甲酸溶液提取、离心。取上清液80μL,加入40μg·L^-1异丙肾上腺素(内标)溶液10μL和含0.1%(体积分数，下同)乙酸的甲醇溶液10μL,涡旋混匀，再加入100μL甲醇，涡旋、离心。上清液中DA及其代谢物在Gemini NX-C₁₈色谱柱上分离，以不同体积比的0.1%乙酸溶液和含0.1%乙酸的甲醇溶液混合液为流动相进行梯度洗脱，质谱分析采用电喷雾离子源正、负离子模式，选择反应监测(SRM)模式扫描。结果表明，3种目标物在7.00 min内能完成测定。DA、DOPAC和HVA标准曲线的线性范围分别为0.05～100,0.5～1 000,0.25～500μg·L^-1,检出限分别为0.015,0.150,0.075μg·L^-1。按照标准加入法进行回收试验，回收率为84.4%～117%,日内精密度和日间精密度试验所得...     

模拟微重力条件下C离子辐射对小鼠生殖器官的影响

探究模拟微重力条件下不同剂量C离子辐射对雄性动物生殖器官的急性影响, 以期了解空间环境辐射所致机体生殖系统的损伤。采用小鼠尾部悬吊模型地面模拟微重力状态1周后, 利用重离子加速器提供的C离子辐照处理, 检测了生殖器官脏器系数及精子密度、组织形态变化、DNA损伤以及细胞凋亡各项指标。结果表明, 微重力和C离子辐射均能引起睾丸损伤, 且1 Gy单纯辐照组中损伤最为严重。此外发现, 模拟微重力能够在一定程度上降低辐射诱导的损伤, 其内在机制有待于进一步的研究。In this paper it was investigated that the effect of modeled microgravity on the acute injury induced by low doses of carbon ions in the male reproductive organs of mice, assessing the risk associated with the space environments. In our study, outbred Kunming mice were stimulated in microgravity by tail suspension, and then were irradiated with the low doses of carbon ions diliuered by HIRFL, and measured the testis and epididymis coefficient, sperm number of epididymis, histological alterations, DNA strand breaks and cell apoptosis. The results demonstrated that carbon ions and stimulated microgravity could induce the damage in the present study. Moreover, most serious injury all occurred in the irradiation group. In addition, it was also found that the damage of the carbon ion irradiation combined microgravity group were lower than those of the irradiation group, while the related mechanism needs the further investigation.