牛天然纤溶酶原Kringles结构域片段的获得及其抑制内皮细胞增殖作用研究

利用猪胰弹性蛋白酶和尿激酶限制性酶切牛纤溶酶原,获得了纤溶酶原Kringles结构域片段Kringles1-3(K1-3)和Kingles1-4(K1-4),研究发现,在没有自由巯基供体存在的条件下,尿激酶酶发牛纤溶酶原也能够产生K1－4,从而认为存在由尿激酶酶切牛纤溶酶原直接产生K1－4的途径,所获得的K1－3和K1－4对恒河猴脉络膜－视网膜RF／6A血管内皮细胞的增殖有抑制活性。     

TNFa在血管内皮细胞ECV304中的靶向表达研究

在缺失了3'LTR U3区内病毒的启动子／增强子序列的逆转录病毒载体pLXSNd中,用血管内皮生长因子受体KDR的特异性启动子调控了TNFa在血管内细胞ECV304中的靶向表达。将构建的载体pLXSN-TNFa,pLXSNd-KDRp-TNFa和空载体pLXSN用PA317细胞包装后获得重组病毒,并用重组病毒分别感染NIH3T3细胞和ECV304细胞,培养物上清的ELISA结果证明,KDR启动子指导的TNFa在KDR阳性细胞ECV304中的表达量为在KDR阴性细胞NIH3T3中的表达量的8倍;而TR指导的TNFa在这两种细胞中的表达无明显差异,实现了TNFa在血管内皮细胞中的靶向表达,这可能为肿瘤基因治疗提供新途径。     

镍邻菲绕啉对DNA固定作用的原子力显微镜表征

原子力显微镜 ( AFM)自 1 986年发明以来得到了广泛的应用和发展 [1,2 ] ,成为众多研究领域中的强有力工具 ,并为其它的研究技术提供了良好的互补手段 .DNA是 AFM首次研究的生物样品之一 ,它使人类首次观察到 DNA分子的原始形貌 ,并实现了接近生理条件下的操作 ,使得随时监测生物大分子的生化反应过程成为现实 [3,4 ] .在 DNA的 AFM研究中 ,样品的制备是其关键 .以阳离子 (如 Mg2 + ,Ba2 + ,Mn2 +和 Ca2 +等 [5] )固定法较为常见 ,其操作简单 ,固定效果好 ,基底效应小 ,但也有一定的局限性 ,如存在限制性内切酶时 ,这些简单离子会…     

多头绒泡菌(Physarum polycephalum)中期染色体结构的AFM成像研究

采用原子力显微镜术(AtomicForceMicroscopy,AFM)首次观察到了近自然状态下多头绒泡菌(Physarumpolycephalum)中期染色体的整体结构和表面细微结构.染色体整体结构成像显示其边缘轮廓清晰圆滑,具有明显的着丝点;染色体表面高分辨率成像发现,中期染色体是由约230nm的染色质纤维经螺旋且在底部回转180°形成,同时表面有3个层次有序折叠的染色质纤维同时存在,它们分别是:30～40nm,60～70nm,90～100nm.由高度图和侧向力成像图都可推测它们是螺旋结构.这些结果进一步证实了中期染色体包装的高度有序性,多层次结构是由螺旋方式形成,同时表明AFM是在近自然状态下研究生物大分子结构的强有力工具.     

β-K4H3[SiW9O37(CpTi)3]·11H2O环戊二烯钛多酸衍生物与DNA作用研究

某些过渡金属配合物具有特异性催化DNA和RNA断裂的功能, 因而研究过渡金属配合物对DNA和RNA的断链反应对新型抗肿瘤、抗艾滋病化学药物的定向设计及其基因治疗和分子生物学中DNA和RNA的高度专一性定点断裂、 DNA定位诱变和构象识别具有重要意义和应用前景[1,2]. 我们对二茂钛多酸有机金属衍生物合成及抗肿瘤活性研究表明, 环戊二烯钛多氧金属酸盐衍生物具有很高的抗肿瘤活性和较好的水溶性及稳定性, 有潜在的抗肿瘤药用价值[3].     

牛天然纤溶酶原环状结构域K1—3的获得

采用Ｌｙｓ－Ｓｅｐｈｅｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析,从新生牛血清中分离提纯的牛纤溶酶原（ｐａｌｓｍｉｎｏｇｅｎ,ｐｇｎ）。利用ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,对其纯度和相对分子质量进行了鉴定。利用猪胰弹性蛋白酶酶切纤溶酶原获得了环状结构域Ｋ１－３,采用Ｌｙｓ－Ｓｅｐｈｅｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析对该片段进行了分离提取。