TNFa在血管内皮细胞ECV304中的靶向表达研究

在缺失了3'LTR U3区内病毒的启动子／增强子序列的逆转录病毒载体pLXSNd中,用血管内皮生长因子受体KDR的特异性启动子调控了TNFa在血管内细胞ECV304中的靶向表达。将构建的载体pLXSN-TNFa,pLXSNd-KDRp-TNFa和空载体pLXSN用PA317细胞包装后获得重组病毒,并用重组病毒分别感染NIH3T3细胞和ECV304细胞,培养物上清的ELISA结果证明,KDR启动子指导的TNFa在KDR阳性细胞ECV304中的表达量为在KDR阴性细胞NIH3T3中的表达量的8倍;而TR指导的TNFa在这两种细胞中的表达无明显差异,实现了TNFa在血管内皮细胞中的靶向表达,这可能为肿瘤基因治疗提供新途径。     

视黄酸合成酶基因Raldh2敲除鼠肢体发育起始的挽救

视黄酸合成酶基因Raldh2敲除鼠胚胎心脏膨大,没有肢体发育的起始.肌细胞增强子基因Mef2C敲除鼠胚胎心脏较小,但肢体的发育起始正常.Raldh2/Mef2C双基因敲除鼠与Raldh2敲除鼠形态相似.Tbx5在Raldh2/Mef2C基因敲除鼠第9天的胚胎表达表明,双基因敲除鼠胚胎没有肢体的发育.这一结果表明Mef2C敲除鼠没有挽救Raldh2敲除鼠肢体发育的起始.     

小鼠早期胚胎肢体发育中的视黄酸诱导的视黄酸代谢

给怀孕10 d的小鼠胃灌流视黄酸(100 mgRA/kg体重)6和24 h后,对视黄酸合成酶基因Raldh2和代谢酶基因Cyp26a1,Cyp26b1在胚胎肢体的表达进行了分析.Cyp26a1和Cyp26b1在灌流6 h,表达增加;灌流24 h,表达恢复到正常水平.Raldh2在此时间段表达降低.这些结果提示:在小鼠早期胚胎肢体发育中,存在视黄酸诱导的视黄酸代谢.