酵母丙氨酸转移核糖核酸3′-半分子(36—76)的合成

本文报告用T_4RNA连接酶将相应于酵母丙氨酸转移核糖核酸(tRNA_y~(Ala))3′-半分子(36—76)的三个寡核昔酸大片段——10(36—45)(Ⅰ),12(46—57)(Ⅱ)和19p(58—76)(Ⅲ)——从3′-端向5′-端延伸逐个连接合成了这个tRNA的3′-半分子(36—76)。首先在供受体配比为1:1.5的情况下,采取三步连续反应,即19p(Ⅲ)的5′-磷酸化,然后与12(Ⅱ)的连接和连接反应产物的5′-磷酸化等反应,一次制备分离的方法,以70％的总得率合成了5′-磷酸化的三十一核苷酸(46—76)(Ⅳ)。然后,以(Ⅳ)作为下一步反应的供体和三倍量的10(Ⅰ)连接,以67％的产率合成了具有四十一核苷酸的tRNA_y~(Ala)的3′-半分子(36—76)(Ⅴ)。将这个合成的3′-半分子,5′-磷酸化以后,与天然的5′-半分子连接,人工半合成了tRNA_y~(Ala)整分子,经生物活力测定,这个人工半合成的tRNA_y~(Ala)具有接受[~3H]-丙氨酸、并能将接受的丙氨酸转移到蛋白质分子中去的生物活力。     

生物素衍生化环孢素A的合成及其与人亲环素A的相互作用 研究

通过∈-氨基已酸二聚体的乙酯与生物素缩合将其羧端延伸14个原子,然后与氨基衍生化的环孢素A缩合合成了生物素衍生化的环孢素A。经过药物免疫印迹和表面等离子体共振(SurfacePlasmonResonance)测定表明生物素衍生化的环孢素A还保留了与人亲环素A结合的活力。     

1993年诺贝尔化学奖简介─—兼评化学研究在生物学科发展中的贡献和展望

１９９３年诺贝尔化学奖简介─—兼评化学研究在生物学科发展中的贡献和展望陈海宝（中国科学院上海有机化学研究所，生命有机国家重点实验室）１９９３年诺贝尔化学奖授与两位运用化学的基本概念和方法创造新的生物学研究方法的学者─—卡里·穆利斯（ＫａｒｙＭｕｌｌｉ...     

烟草、小麦和水稻三个设计的rbcs结构基因的全合成和在大肠肝菌中的表达

用计算机辅助再设计了烟草、小麦和水稻的核糖酮-1,5-双磷酸羧化酶/氧化酶的成熟亚基(rbcS)的三个基因,结合化学方法和酶促配位进行了全合成,并在大肠杆菌中以高得产表达.     

遗传工程和质粒

I、引言这里首先要解释一下遗传工程(或基因工程)的含义,然后介绍如何进行基因操作。最后讨论此新领域的某些有关事项以及概述可能的发展。从词义上广义地讲遗传工程不是新的,作为变异和选种的结果,多年来遗传学家已能改变病毒、细菌,甚至在某些场合还有高等生物的基因组。最近用高等生物的细胞融合和细胞核转移的办法也已创造出遗传学上不同的细胞谱系。事实上,本文所谈的遗传工程含义是:在体外将基因,一组基因或部分基因,越过种属差异的障碍从一种生物转入另一种生物的新     

酵母丙氨酸转移核糖核酸5′-半分子(1—35)的合成

本文报道了应用T_4RNA连接酶将酵母丙氨酸转移核糖核酸(tRNA_y~(Ala))5′-半分子中的三个寡核苷酸片段[—13(Ⅰ);14—22(Ⅱ);23—35(Ⅲ)]连接成5′-半分子的工作。由于寡核苦酸片段的纯度高,多核苷酸激酶和T_4RNA连接酶的质量好,采用连续反应的方法,简化了分离步骤,使产物的得率大大提高,二十二核苷酸的连接率是75％,三十五核苦酸的连接率是90％,以第一步反应原料为基数计算,最终产物的总得率是21％。经连接点和末端核苷酸分析,证明它的结构是正确的。将合成的5′-半分子与天然的3′-半分子在T_4RNA连接酶的催化下连接成人工半合成的完整tRNA_y~(Ala),具有接受[~3H]-丙氨酸和将[~3H]-丙氨酸转移到蛋白质中的生物活力。     

酵母丙氨酸转移核糖核酸的人工全合成

本文报道采用有机合成与酶促合成相结合的方法,按照R.Holley等测定又经他人修正的一级结构,人工全合成了酵母丙氨酸转移核糖核酸(tRNA_y~(Ala))的工作。我们合成的tRNA_y~(Ala)与天然的tRNA_y~(Ala)具有相同的化学组成(含有全部修饰核苷酸)和结构,并有完整的生物活力,即在大鼠肝氨酰基tRNA合成酶的催化下,能接受丙氨酸,而且在兔网织红细胞裂解液体系中能将所携带的丙氨酸参入到蛋白质中去。在进行全合成以前,曾分别进行了两种人工半合成,即将天然的5′半分子与人工的3′半分子和人工的5′半分子与天然的3′半分子进行连接,都取得有生物活力的整分子tRNA_y~(Ala)。据我们了解,这是世界上第一次用人工方法合成的具有生物功能的核糖核酸。     

SYNTHESIS OF THE 5'-HALF MOLECULE OF YEAST ALANINE tRNA

In this paper, we report the synthesis of the 5'-half molecule of yeast alanine tRNA (tRNA_y~(Ala)) by ligating three oligonucleotide fragments corresponding to the nucleotide sequences 1-13, 14-22 and 23-35 respectively under the catalysis of T_4 RNA ligase (Fig. 1). Because of the high purity of the oligonuclcotide fragments and the excellent quality of T_4RNA ligase and polynucleotide kinase we prepared, the isolation steps were simplified and the overall yields were much higher. The ligating yield of the docosamer (Ⅳ) was 75%, that of the pentatriacontamer (Ⅴ), 90%, and the isolated yield of the final product was 21% calculated on the basis of the tridecamer (Ⅲ) used in the. first reaction. Under the action of T_4 RNA ligase the synthetic 5'-half molecule was joined with the natural 3'-half molecule forming a semi-synthetic tRNA_y~(Ala), which possessed the biological activities of both accepting (~3H)-alanine and incorpprating it into proteins. The correctness of the structure of the synthetic 5