常见鼠药中毒及检测技术研究进展

鼠药是控制有害啮齿类动物最经济有效的方式,而大多数鼠药对人畜均具有较强的毒性。鼠药的不合理使用严重威胁人类和其他非靶标动物的生命安全。由误食、二次中毒、自杀及恶意投毒等原因导致的中毒事件时有发生。发展快速准确的鼠药中毒检测技术对于及时确定中毒靶标从而进行有效干预、对症治疗是降低鼠药危害的重要手段。常规的鼠药检测大多基于液相色谱-串联质谱等仪器分析方法。近年来,免疫分析技术由于具有操作简单、快速的优点,开始用于鼠药的快速检测。该文重点针对典型的氟乙酰胺、毒鼠强和抗凝血类鼠药的中毒概况和检测技术进行了总结,以期为相关领域研究人员提供技术指导。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定牛奶中头孢喹肟残留量

建立了牛奶中硫酸头孢喹肟的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法。用80％乙腈提取试样中的药物,加水稀释后采用HLB固相萃取柱净化,UPLC-MS/MS法测定,仪器检测程序总色谱时间仅为1 min。结果表明,方法平均回收率为80.3％～85.7％;批内变异系数在2.8％～6.3％之间;批间变异系数在3...     

荧光偏振免疫分析测定磺胺甲基嘧啶研究

磺胺甲基嘧啶(sulfamerazine,SMR)的芳伯胺基与荧光素异硫氰酸钠异构体Ⅰ(fluorescein isothiocyanate, FITC)的异硫氰基在常温下可以发生偶联反应,经薄层色谱分离之后,可以得到SMR的FITC荧光标记物(Tracer)SMR-FITC。应用荧光偏振免疫分析(fluorescence polarization immunoassay, FPIA),以SMR单克隆抗体为竞争免疫试剂,优化了检测条件,建立了SMR的FPIA检测方法。在选定的条件下,SMR的半数抑制量(IC₅₀)为23.4 ng·mL-1,最低检测限量为2.3 ng·mL-1,检测范围为5.4到218.8 ng·mL-1,可以达到食品中SMR的最高残留限量要求。同时对16种磺胺类药物的交叉反应做了初步研究,结果显示对SMR、磺胺二甲基嘧啶(sulfamethazine, SMZ)、磺胺嘧啶(sulfadiazine, SDZ)交叉反应率分别为100%,25%和8.6%,对其他磺胺类药物的交叉反应率均低于5%。     

高效液相色谱法快速检测猪组织中泰妙菌素残留

应用高效液相色谱法测定猪组织中泰妙菌素残留.试样经磷酸盐缓冲液(pH 8.0)-乙酸乙酯混合提取,离心后加0.1%酒石酸,40 ℃旋转蒸发,除尽有机相,加正已烷除脂,HLB柱净化后,氮气吹干,0.0125%甲酸溶解后HPLC检测.流动相为乙腈-0.0125%甲酸(42∶ 58,V/V).紫外检测波长为210 nm.对猪肉(猪肝)进行15(25)～500 μg/kg的药物添加回收实验,结果表明,泰妙菌素的平均回收率为80.1%～92.7%; 日内相对标准偏差为2.0%～10.2%;日间相对标准偏差为5.9%～13.9%.按信噪比S/N=3计算,猪肉和猪肝中泰妙菌素的检出限(LOD)分别为4.5和7.5 μg/kg.     

荧光偏振免疫分析在农药和兽药残留检测中的研究进展

荧光偏振免疫分析技术是以免疫竞争原理和荧光偏振原理为基础的一种以快速筛选为目的的分析技术,主要用于测定小分子量物质(抗原),就是检测荧光标记抗原在结合特异性的抗体前后,荧光偏振值的变化,是均相的竞争免疫分析方法,反应系统完全在溶液中,不需要分离结合的和未结合的抗体,不受溶液颜色、仪器灵敏度变化的影响,该技术最显著的特点是操作简单和检测时间短,适用于大量样本的快速筛选检测。目前该技术在农药和兽药残留分析中已经得到了应用,但是国内的相关研究尚未见报道。文章综述了荧光偏振免疫分析的历史背景,发展历程和主要原理,概括了荧光偏振免疫分析方法在农药和兽药残留分析中的研究进展。     

液相色谱-质谱法测定饲料中阿维菌素类药物

建立了饲料中阿维菌素类药物(阿维菌素、多拉菌素、埃普菌素和伊维菌素)液相色谱-质谱(LC-MS)检测法. 用乙腈提取样品中的药物, 加水稀释, 加三乙胺调节pH, 经C18固相萃取柱净化, LC-MS法测定. 结果表明, 方法平均回收率为91.3%～99.8%, RSD为2.9%～15% (n=4), 配合饲料、浓缩饲料和预混合饲料中的检出限均为10 μg/kg; 定量限均为20 μg/kg. 方法可用于饲料样品中阿维菌素类药物残留量的确证检测.     

荧光偏振免疫分析方法分析磺胺二甲基嘧啶

建立了检测磺胺二甲基嘧啶的荧光偏振免疫分析方法。合成了3种结构不同的荧光标记物,并用薄层色谱法提纯。研究了不同结构的荧光标记物对FPIA方法灵敏度的影响。该FPIA方法在缓冲液中的检出限为1.6μg/L,半数抑制量(IC50)为41μg/L,检测范围为5~458μg/L,可以达到食品中SMZ最低残留限量的要求。研究了FPIA的动力学过程及对其它16种磺胺类药物的交叉反应,结果显示,SMZ、磺胺甲基嘧啶和磺胺二甲基恶唑的交叉反应率分别为100%、8.7%和2.4%,其它磺胺类药物的交叉反应率均低于1%。     

荧光偏振免疫分析法研究17种磺胺类药物与抗体亲和力的构效关系

应用4株磺胺二甲基嘧啶(SMZ)多克隆抗体和5种不同结构的荧光标记物(Tracer)建立了荧光偏振免疫分析(FPIA)检测SMZ的方法. 讨论了4株多抗对SMZ的检测灵敏度和对17种磺胺类药物(SAs)的相对亲和力趋势, 从药物分子二维结构上探讨了多抗对小分子抗原的识别能力. 结果表明, 3号多抗对SMZ的灵敏度最高, 但是4株多抗对17种SAs的相对亲和力趋势相似, 说明抗体对抗原的结合力大小与抗原的化学结构有关.     

分子模拟技术研究17种磺胺类药物与抗体亲和力构效关系

应用量子力学AM1方法对17种磺胺类药物(Sulfonamides, SAs)进行分子构型优化, 得到了SAs的最低能量结构, 并计算了SAs分子的重要构型参数(键长、键角和两面角)、电性参数(R基团和重要原子的电量)和物化参数(水合能、Log P值等). 通过比较SAs各个分子理化性质的差异, 讨论了SAs与4株磺胺二甲基嘧啶(Sulfamethazine, SM2)多克隆抗体之间的构效关系, 结果显示水合能和Log P在SM2抗体-抗原(SAs)构效关系中发挥重要作用, 分子的空间结构和电子特性的作用有限.     

高效液相色谱-荧光-紫外法测定动物肌肉组织中多类药物残留

建立了同时检测动物肌肉组织中9种喹诺酮类药物、7种磺胺类药物和甲氧苄啶的高效液相色谱检测方法.动物肌肉组织样品用磷酸盐缓冲液提取,HLB固相萃取柱净化,洗脱液用氮气吹至近干,磷酸盐缓冲液复溶,以甲酸水溶液-乙腈体系为流动相,梯度洗脱,荧光-紫外检测器串联测定.本方法的线性良好,相关系数r>0.9987;平均回收率为70.6%～103.4%,相对标准偏差为1.2%～11.4%; 荧光检测器测定喹诺酮类药物的检出限为0.04～0.4 μg/kg;紫外检测器测定磺胺类药物和甲氧苄啶的检出限为3.5 μg/kg.本方法具有简便、通用性强的特点,适用于动物肌肉组织中上述药物的常规残留检测.