在线固相萃取-二维液相色谱串联质谱法测定人脑脊液中替考拉宁浓度

建立测定人脑脊液中替考拉宁浓度的在线固相萃取-二维液相色谱-串联质谱( SPE-2DLC-MS/MS)法。脑脊液样品经在线固相萃取处理后,通过阀切换二维色谱技术,转载至Shiseido CAPCALL-PAK C18分析柱上进行分离,以25mmol/L乙酸铵(pH 6.0)-乙腈为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL/min。采用电喷雾离子源( ESI),以选择反应监测( SRM)方式进行正离子检测,采用氢溴酸东莨菪碱为内标,对脑脊液样本中替考拉宁浓度进行定量检测。本方法中替考拉宁浓度在25~5000μg/L的范围内线性关系良好(R2=0.9993,n=6);日间和日内精密度RSD均小于6％,低中高3个浓度的回收率在100.8％~109.9％之间。结果表明,本方法的选择性好,线性、精密度、准确度和灵敏度高,可用于临床监测替考拉宁浓度。     

高效离子抑制色谱法和高效离子交换色谱法检测琥珀酸去甲文拉法辛中琥珀酸的含量

建立了用于琥珀酸去甲文拉法辛中琥珀酸含量测定的高效离子抑制色谱和高效离子交换色谱方法。离子抑制色谱法采用Rezex ROA-organic Acid H+(8%)色谱柱,以2.50×10^-3mol/L硫酸溶液为流动相等度洗脱,流速为0.5 mL/min,进样10 μ L,检测波长为210 nm,琥珀酸的含量按峰面积外标法计算;离子交换色谱法采用IonPac^® AS11-HC色谱柱,以氢氧化钾为淋洗液等度洗脱,流速为1.0 mL/min,进样10 μ L,带DIONEX AERS^® 500 4-mm抑制器的电导检测器检测,琥珀酸含量按峰面积外标法计算。两种方法对3批琥珀酸去甲文拉法辛中琥珀酸质量分数的测定结果分别为:28.8%、28.9%、28.9%和28.2%、28.6%、28.6%。离子抑制色谱法和离子交换色谱法在琥珀酸去甲文拉法辛中琥珀酸的含量测定结果上没有明显不同,可根据实际情况选择。     

离子色谱法测定三磷酸腺苷二钠制剂中主成分及有关物质的含量

建立了用于三磷酸腺苷二钠制剂中主成分及有关物质含量测定的离子色谱方法。采用IonPac AS11-HC色谱柱,以KOH溶液为淋洗液,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,进样10 μL,以Dionex AERS 500 4-mm抑制器的电导检测器检测,三磷酸腺苷二钠(ATP-Na₂)的含量按峰面积以外标法计算,二磷酸腺苷二钠(ADP-Na₂)及单磷酸腺苷二钠(AMP-Na₂)按加校正因子的主成分自身对照法计算,未知杂质按主成分自身对照法计算。ATP-Na₂、ADP-Na₂及AMP-Na₂的线性范围分别为0.000146~1.83 g/L、0.000484~1.51 g/L及0.000426~0.804 g/L,相关系数分别为0.9997、0.9996及0.9999;对照品溶液在24 h内的稳定性良好(峰面积RSD分别为1.3%、1.4%、2.5%);ATP-Na₂、ADP-Na₂、AMP-Na₂的方法定量限(S/N=10)分别为1.5 ng、4.8 ng、4.3 ng,检出限(S/N=3)分别为0.58 ng、1.21 ng、1.28 ng;ATP-Na₂在3个水平的加样回收率分别为96.50%、96.57%和96.77%。本方法适用于三磷酸腺苷二钠制剂的质量控制。     

二维液相色谱阀切换接口技术的发展及应用

在复杂样本分析中,一种分离模式往往不能提供足够的分离度,组合不同的分离模式构建二维液相色谱系统是解决这一问题的有效途径。阀切换接口是二维液相色谱柱切换技术的核心,接口技术影响系统的分离度和灵敏度。传统的接口技术在生物、药学、食品、环境等领域得到了广泛应用,近20年发展了众多新型的接口技术来解决二维液相色谱中正交组合溶剂不兼容问题。本文综述了柱切换接口技术的原理和应用,并总结了近5年利用柱切换二维液相分析技术的进展,期望为二维液相色谱技术的发展和应用提供借鉴。     

二维液相色谱法在线检测哈茨木霉发酵液中2460A含量

建立了在线检测哈茨木霉发酵液中微量2460A的二维液相色谱方法。利用Ultimate 3000双三元液相色谱仪,采用阀切换二维色谱技术,组合3根色谱柱实现2460A的在线净化、富集和含量检测。净化柱采用资生堂MF C8柱(10 mm×4.6 mm,5.0μm),富集柱采用资生堂MGC18柱(20 mm×4.6 mm,5.0μm),以水-甲醇为流动相,梯度洗脱,流速2.0 m L/min;二维分析柱采用Thermo Hypersil GOLD C18柱(250 mm×4.6 mm,5.0μm),以水-甲醇为流动相,梯度洗脱,流速1.0 m L/min;进样量1.0 m L;柱温40℃;检测波长424 nm。方法验证结果显示,2460A的线性范围为0.0025~10.0 mg/L(r=0.9981,n=8),检出限为1.2μg/L;定量限为2.5μg/L;方法回收率为88.0%~104.4%。