表面分子印迹聚合物纳米线用于蛋白质的特异性识别

手性配体交换色谱是拆分手性化合物,特别是氨基酸和羟基酸对映体的一种有效方法,通常以光活性氨基酸或其衍生物为手性选择子,可通过键合及涂渍制备手性固定相,也可作为流动相添加剂来实现手性配体交换色谱分离分析,配体交换键合固定相需要完成载体和手性选择子之间的偶联,键合量因受到载体和制备条件的影响而较难控制,且柱效较低。     

二维液相色谱切换技术及其应用

多维液相色谱已成为复杂样品研究的重要工具。本文在介绍多维液相色谱原理与方法的基础上,重点讨论了二维液相色谱接口切换技术的近期发展,并对其应用现状进行了总结分析。     

甲胎蛋白光寻址电位式传感器的研究

研究了基于光寻址电位传感器(LAPS)的无标记甲胎蛋白免疫检测。采用共价交联的方法在光寻址电位传感器的敏感膜表面固定甲胎蛋白抗体,根据蛋白质分子特异性结合会引起膜电位变化进行检测;对度为400μg/L甲胎蛋白抗原的响应约为11mV;不同浓度的甲胎蛋白抗原的响应同浓度呈线性关系,线性相关系数为0．9996;各个芯片对不同浓度AFP膜电位响应的相对标准偏差小于6％。验证了采用光寻址电位传感器技术检测甲胎蛋白的可行性,为多参数蛋白质芯片的研究提供了理论和实验数据。     

某些同多酸根与蛋白质相互作用的共振瑞利散射光谱研究

在酸性介质中,钼酸根、钨酸根和偏钒酸根等同多酸根与牛血清白蛋白（BSA）和人血清白蛋白（HSA）等蛋白质反应形成结合产物时,会导致溶液的共振瑞利散射（RRS）急剧增强,最大散射峰均位于470nm。反应的适宜酸度分别为pH0．9～1．3（钼酸根．BSA体系）,pH1．1—1．4（钨酸根-BSA体系）和pH0．6—0．9（偏钒酸根-BSA体系）。在一定的浓度范围内,不同的反应体系RRS强度与蛋白质浓度成正比,均可用于蛋白质的测定。反应具有很高的灵敏度,不同的同多酸对BSA的检出限（30σ／s）介于4．1—30．5μg/L之间,其中钼酸根体系的灵敏度最高。考察了共存物质的影响并研究了方法的分析应用。     

全二维液相色谱的初步构建及其在山羊血清分离中的应用

以GFC/RP模式构建全二维液相色谱系统,第一维凝胶过滤色谱柱使用ShodexProteinKW 802. 5(300mm×8mmi.d. ),以0. 2mol/LNaH2PO4 (pH7. 0)的流动相在0. 15mL/min的流速下等度洗脱,第二维反相色谱柱使用HypersilBDSC18 (35mm×4. 6mmi.d. ),在3mL/min的流速下梯度洗脱。采用平行柱交替分析的形式作切换接口, 2. 5min切换一次,两个反相柱交替富集、分析第一维洗脱产物。以5个标准蛋白混合物的分离评价该系统,在单独一维模式中不能分离的样品在全二维液相色谱中得到了较好的分离,二维系统的总峰容量为225。与一维色谱相比,系统的总峰容量、分辨率得到较大提高。并用于山羊血清的纯化分析,对一维分离中的重合谱峰进行验证,对制备纯化有一定的实际意义。     

亮绿SF(淡黄)与蛋白质相互作用的光度法研究及其分析应用

在pH 2.0的B-R缓冲介质中,蛋白质与亮绿SF(淡黄)(LGSF)在室温下结合生成复合物,其最大吸收波长为665 nm。本文采用光度法研究了结合反应的最佳条件、结合常数及最大结合位点数,并在此基础上建立了一个测定蛋白质的新方法。该方法测定牛血清蛋白(BSA)、人血清蛋白(HSA)及γ-球蛋白G(IgG)的线性范围至少可达80μg/mL,其表观摩尔吸光系数ε分别为:7.25×105、7.22×105与1.84×106L.mol-1.cm-1。除阴阳离子表面活性剂外,其余大部分物质不干扰蛋白质测定。可见方法具有选择性好、灵敏度高等优点。用于人血清样品中总蛋白的测定,所得结果与考马斯亮蓝G-250法基本一致。     

二维紧密蛋白质链折叠序列的特性研究

采用完全计数法,研究了二维紧密蛋白质链在不同HP序列时的构象性质,特别是具有唯一基态能量的折叠序列的性质.对于具有N个单体的紧密蛋白质链,发现有一定比例的序列为折叠序列.在这些折叠序列中,疏水基团(H)的数目比亲水基团(P)多20%,并同200种真实蛋白质分子的疏水基团和亲水基团的结果进行了比较.对于不同的折叠序列,根据序列中其疏水基团的数目,把具有相同疏水基团数目的序列归在同一类,发现这样的序列在总的序列中的相对含量满足高斯分布.同时还对序列中H(或者P)团族大小及其分别进行了研究,发现折叠序列与无规随机序列不同.还研究了不同折叠序列在不同链长时的比热情况,发现其相转变温度TC主要与链长有关,与折叠序列无关.     

蛋白质、多肽类药物控制释放体系的研究

近年来,蛋白质、多肽类药物广泛应用于各类疾病的治疗。本文对聚乙二醇修饰的蛋白质及蛋白质类药物控制释放这两大体系的研究进展做了较系统的总结和评述,并就更高级的靶向、易吸收的蛋白质药物体系的发展进行了展望。     

铜(Ⅱ)-茜素红S络合物与蛋白质作用的光谱性质及应用研究

在pH 3.80~4.20的Clark-Lubs缓冲介质中,蛋白质与Cu(Ⅱ)-ARS络合物作用,其吸收光谱发生大幅度变化,生成的深红色三元复合物,λmax为538 nm,比试剂本身红移118 nm,比络合物λmax红移30 nm。研究了有生物大分子参与的三元复合物反应体系的光谱性质及其影响因素,解释了初步机理,在确定的最佳实验条件下,建立了以Cu(Ⅱ)-ARS络合物为光谱探针光度法测定人血清蛋白质的新方法。蛋白质在0~300 mg/L的范围内符合比尔定律,表观摩尔吸光系数5ε38=2.37×105L.mol-1.cm-1(人血清白蛋白)。用于实际人血清样品的测定基本无干扰,灵敏度比茜素红S探针法高23.7倍。     

偶氮洋红G-SDS体系共振光散射法测定蛋白质

在十二烷基磺酸钠存在下及pH 1．98的Brittion-Robinson介质中,蛋白质与偶氮洋红G作用形成复合物,使最大波长421nm的共振光散射光谱得到加强,根据其共振光散射的增强程度,可定量测定蛋白质。十二烷基磺酸钠的加入,使灵敏度提高2．7倍。牛血清白蛋白、γ-球蛋白的线性范围分别为0.04～1．6、0．12～3．8mg／L,检出限分别为5．3、8．5μg/L。用于人血清、牛奶、豆浆、尿液中总蛋白质的测定,结果与经典的考马斯亮蓝法一致。