对乙酰基偶氮羧-铈(Ⅲ)-人血清白蛋白体系的吸收光谱性质及其分析应用

在pH 2.0~3.0的B-R缓冲介质中,对乙酰基偶氮羧(p-ACA)与铈(Ⅲ)生成蓝色配合物,其吸收峰在727nm处,而显色剂本身吸收峰在577nm处,对比度达150mm。在此显色体系中加入人血清白蛋白(HSA)时,发生消光反应,呈现在波长727nm处吸光度的减弱。试验表明:HSA的质量浓度在10~120mg·L-1范围内与相应的吸光度减弱程度(ΔA)之间呈线性关系。显色体系对HSA的表观摩尔吸光率为5.14×105L·mol-1·cm-1。加入TX-100使该体系的灵敏度提高45%。应用上述方法测定了3份人血清样品中HSA的含量,测定值与考马斯亮蓝法的测定结果一致。     

铜(Ⅱ)-茜素红S络合物与蛋白质作用的光谱性质及应用研究

在pH 3.80~4.20的Clark-Lubs缓冲介质中,蛋白质与Cu(Ⅱ)-ARS络合物作用,其吸收光谱发生大幅度变化,生成的深红色三元复合物,λmax为538 nm,比试剂本身红移118 nm,比络合物λmax红移30 nm。研究了有生物大分子参与的三元复合物反应体系的光谱性质及其影响因素,解释了初步机理,在确定的最佳实验条件下,建立了以Cu(Ⅱ)-ARS络合物为光谱探针光度法测定人血清蛋白质的新方法。蛋白质在0~300 mg/L的范围内符合比尔定律,表观摩尔吸光系数5ε38=2.37×105L.mol-1.cm-1(人血清白蛋白)。用于实际人血清样品的测定基本无干扰,灵敏度比茜素红S探针法高23.7倍。     

磺氯酚N-Cu(Ⅱ)-HSA-OP体系对尿蛋白的测定

室温下,在pH 3.0的Britton-Robinson缓冲介质中,磺氯酚N与Cu2+生成淡蓝色配合物,配合物与蛋白质发生反应形成多元深蓝色复合物,λmax为724 nm,相比于磺氯酚N红移了174 nm.初步探讨了反应机理,研究了反应体系的光谱性质及其影响因素,确定了最佳实验条件,建立了以多元反应为基础测定蛋白质的新...     

人血清白蛋白-硝基磺酚C-TX-100体系的吸收光谱及临床分析应用

在Triton X-100存在下,红色染料硝基磺酚C与无色血清白蛋白在pH 2.5～3.5的酸性介质中生成可溶性蓝色缔合物,其最大吸收波长为683 nm,比试剂本身红移128 nm,摩尔吸光系数为2.7×105 L·mol-1·cm-1,线性范围为0～140 mg/L.探讨了反应的最佳条件及初步反应机理.方法可用于临床中尿液总蛋白和脑脊液白蛋白的定量测定.     

偶氮胂羧-Ce(Ⅲ)-HSA-OP的结合反应及其光度分析应用

偶氮胂羧在pH 3.85的HAc-NaAc缓冲介质中与Ce3+反应生成稳定的蓝紫色配合物,该配合物与生物大分子蛋白质反应形成蓝色复合物,λmax=702nm,比试剂本身的λmax=543 nm红移159 nm,ε=3.74×105L·mol-1·cm-1(HSA),蛋白质在0～90μg/mL范围内遵循比尔定律,加入表面...     

一种无氰化物测定血红蛋白的分光光度法

在pH 2.3～5.2的酸度条件下,红色的氯磺酚S能与血红蛋白作用,生成蓝色离子缔合物,其最大吸收波长为637 nm,摩尔吸收系数(为2.8×105L·mol-1·cm-1;最小吸收波长为560 nm,摩尔吸收系数(为3.5×105 L·mol-1·cm-1,线性范围均为0～100 mg/L.优化了反应条件,测定了主要分析参数并探讨了初步反应机理.该法克服了使用KCN剧毒和高白细胞、高球蛋白血症干扰的弱点.用于临床人血液中血红蛋白含量的测定,结果满意.     

血清蛋白质与氯磺酚K反应及其分析应用的研究

发现有机小分子氯磺酚K与生物活性物质蛋白质能发生染色反应 ,在pH4.30的缓冲溶液中 ,红色的氯磺酚K与无色的牛血清白蛋白形成蓝紫色复合物 ,其最大吸收波长为624nm ,较试剂本身红移约74nm ,表观摩尔吸光系数达2.49×105L·mol -1·cm -1,线性范围为0～240μg/mL。实验制定的几种蛋白质的工作曲线 ,其灵敏度和线性范围与牛血清白蛋白基本一致 ,用于临床中人血清蛋白质的测定 ,结果令人满意。