以氯甲基聚苯乙烯为基质的新型排阻色谱固定相的合成及在生物大分子分离中的应用

以单分散交联聚氯甲基苯乙烯为基质,先后与乙二胺和δ－葡萄糖酸内酯反应,得到了亲水性能良好的排阻色谱固定相,其表面羟基含量高达５．４ｍｍｏｌ／ｇ。本文评价了改性后树脂的亲水性、溶剂匹配性、耐压性能及化学稳定性,用三羟甲基氨基甲烷（Ｔｒｉｓ）缓冲溶液（ｐＨ＝７．０）为流动相,蛋白质,混合样的分离遵循排阻色谱分离机理。聚苯乙烯和蛋白质标准样的排阻色谱分离机理。聚苯乙烯和蛋白质标准样的排阻色谱校正曲线 范     

基因工程菌发酵实验中培养基优化的数学模型

本文对重组人γ-干扰素的发酵培养基组分进行了数值研究．采用逐步回归技术并应用统计软件SAS对实验数据进行回归分析。建立了重组人γ-干扰素的产量同培养基组分之间的数学模型。并得出了最佳培养基的配方组成．为基因工程菌的发酵实验提供了可靠的理论依据．     

不用环炉的环比色法测定大气中氟化氢

吸附栅栏环技术特别适用于测定某些对热不稳定的有机化合物。这种方法的特点是先用通常的环炉冲洗技术制备吸附栅栏环(以下简称吸附环)但在其后的成分检测时不用环炉,特别适用于现场监测,本文报告了一种不用环炉制作吸附环的新方法,结合使用疏水栅栏环技术测定了大气中的氟化氢,因本法自始至终不用环炉,故称其为不用环炉的环比色法。本法与锆-二甲酚橙比色法作了比较,得到了一致的结果。     

采用不同疏水相互作用色谱柱从包涵体中快速制备重组人干细胞因子

为了提高重组人干细胞因子(rhSCF)的复性效率,改进了高效疏水相互作用色谱(HPHIC)纯化和复性rhSCF的方法。首先将目标蛋白溶解于8.0 mol/L脲中,然后将rhSCF包涵体的提取液直接进样到不同规格的HPHIC柱进行纯化和复性。优化了固定相配基结构和流动相组成等实验条件,结果表明,本方法可以快速地获得高质量回收率和高生物活性的rhSCF,rhSCF在40 min内即可完成复性与纯化,目标蛋白的纯度在95.5%以上,质量回收率高于49.6%。通过体积排阻色谱和基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)的分析,确认rhSCF以单体存在。结果进一步证明HPHIC法是同时复性和纯化重组蛋白的有效工具。     

蛋白质在疏水色谱中保留的热力学参数的测定

研究了0～50℃内五种蛋白质在疏水色谱(HIC)中的保留行为。蛋白分子在HIC中的保留行为遵循Van'tHoff方程,并求得蛋白质分子在HIC中保留的热力学参数(△H°,△S°,△C°p和△G°)。发现蛋白质的保留由熵控制,焓、熵和热容量三个热力学参数都与绝对温度倒数间存在线性关系,并求得热容量为零的收敛温度。     

流体动力色谱法和障碍色谱法及其应用

介绍了流体动力色谱(HDC)和障碍色谱(SC)及其在生物、化工分离中的研究进展,着重于它们的分离原理、理论发展及二者之间的联系与转化,引用52篇文献.     

HPHIC固定相对脲变α-糜蛋白酶复性的影响

依据计量置换保留理论所得到的参数lgI, 来测定不同构象态α-糜蛋白酶(α-Chy)在两种不同高效疏水相互作用色谱(HPHIC)固定相表面的折叠自由能, 发现脲变α-Chy在HPHIC固定相表面获取的折叠自由能比溶液中的高很多, 不同HPHIC固定相表面为脲变α-Chy提供不同的折叠自由能, 且都随变性剂脲浓度的增大而增大;通过对不同HPHIC色谱柱后复性α-Chy的比活测定, 还发现脲变α-Chy的复性效率与其从固定相表面的折叠自由能有关, 同一构象的α-Chy从固定相表面得到的折叠自由能越高越有利于其折叠成天然蛋白质.     

在反相色谱和疏水作用色谱中温度对蛋白质保留值的影响

人们在反相色谱(RPC)和疏水作用色谱(HiC)上研究温度对蛋白质保留值影响时,常把蛋白质保留时间随温度增加而增长作为属于HIC的一个标准,将保留时间随温度增加而减小作为RPC的一个特点。实际上常常出现与之相反的保留行为。过去对于这些反常的行为解释并不令人满意。我们研     

高效液相色谱荧光法快速检测人血浆及肌肉中的谷氨酰胺

谷氨酰胺（ＧＬＮ）是肝脏糖异生的主要物质,同时又是肠粘膜细胞优先利用的氧化原料,在许多代谢性疾病中ＧＬＮ的需要量大大超出机体合成能力,导致血浆、肌细胞内ＧＬＮ浓度下降。ＧＬＮ浓度的下降与蛋白质合成的减少、肠粘膜萎缩及免疫功能损伤有高度的相关性,细胞内ＧＬＮ浓度的下降与病人的死亡率成正比。目前ＧＬＮ的测定多为酶法及全氨基酸谱分析法,这些方法在临床及研究中应用时既复杂费时,且成本较高。对此本文建立了一个快速简便而灵敏的反相高效液相色谱法。     

借环爐技术分离和检出钍与锆

用间硝基苯甲酸作沉淀剂,借助于环炉技术,可以用0.02N HNO_3溶液先将二价及三价金属离子洗至环圈与四价金属离子相分离。然后利用孔穴直径为16毫米的辅环并以0.2N HNO_3溶液冲洗将钍浓集于辅环环圈上,锆则留于原斑点。最后以钍试剂及锆试剂分别检出钍与锆。结果说明:(1)从混合物中可自001—500微克锆中定量分离0.2—5微克的锆。(2)在700微克锆存在下,痕量钍仍可被检出。(3)锆在斑点上的最低检出量为0.1微克,钍在环上的最低检出量为0.2微克。(4)若将滤纸宽度缩小,钍的最低检出量可以达到0.05微克。(5)操作时间为10—15分钟;各种常见离子并不干扰。本文并提出了进行空白试验的简单操作技术。