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用腺病毒重组体(AdCMV p53/GFP)转染经0.5, 1.0和2.0 Gy γ射线辐射处理的前列腺癌细胞[PC 3( nullp53)], 用克隆形成法检测细胞增殖能力, 用流式细胞分析法测定腺病毒重组体转染率和外源性p53蛋白表达。 结果提示, 辐射诱导使腺病毒重组体转染PC 3细胞提高7%—39%。 辐射联合 AdCMV p53 转染组p53表达水平提高18.5%—35.4%。 与单纯 AdCMV p53 转染组和单纯辐射组相比, 辐射联合 AdCMV-p53 转染组细胞存活率分别降低25%—64%和22%—65%。 To determine whether low dose pre irradiation could enhance adenovirus mediated p53 transfer and expression in human prostate adenocarcinoma, the PC 3 cells were pre exposed to γ rays, and then infected with replication deficient adenovirus recombinant vectors, containing human wild type p53 (AdCMV p53) or green fluorescent protein gene (AdCMV GFP) respectively (γ ray irradiation + AdCMV p53 /GFP infection). The exogenous gene transfer and expression were detected by flow cytometric analysis. The GFP transfer frequencies in γ irradiation + AdCMV GFP infection groups were 7%—39% more than those in AdCMV GFP infection groups. The p53 levels in the γ irradiation + AdCMV p53 infection groups were 18.5%—35.4% more than those in AdCMV p53 infection groups (p<0.05),suggesting that low dose (less than or equal to 1.0 Gy) irradiation could significantly promote exogenous p53 transfer and expression in the PC 3 cells. The survival fractions for the γ irradiation + AdCMV p53 infection groups were 25%—64%, 22%—65% less than those for AdCMV p53 infection, or γ irradiation groups, respectively (p<0.05). 相似文献
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提出了高效液相色谱法测定抗前列腺癌药阿比特龙乙酸酯的含量。色谱分离用Amethyst C18-H色谱柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-磷酸盐缓冲溶液,流量为1.0mL·min-1,检测波长为236nm,进样量为20μL。阿比特龙乙酸酯的质量浓度在0.1~1.2g·L-1范围内与峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)为0.05mg·L-1。以空白样品为基体进行加标回收试验,所得平均加标回收率为99.6%,测定值的相对标准偏差(n=6)为0.17%。 相似文献
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化学发光免疫分析法检测血清中前列腺特异抗原复合物 总被引:1,自引:0,他引:1
采用杂交瘤技术构建抗前列腺特异抗原-α1-抗胰凝乳蛋白酶( Prostate specific antigen-α1-antichymot-rypsin complex,PSA-ACT)单克隆抗体(单抗)细胞株,共获得8株稳定分泌PSA-ACT单抗的细胞株,纯化后进行免疫特性鉴定并做单抗配对。选择其中一对单抗,采用辣根过氧化物酶( HRP)催化鲁米诺( lumino)-H2 O2化学发光体系,建立了测定人血清中PSA-ACT浓度的化学发光酶免疫分析方法( CLEIA)。对包被缓冲液、包被抗体浓度、酶标抗体稀释度、温育时间、发光反应时间和免疫反应步骤等实验参数进行了优化。在最佳实验条件下, PSA-ACT浓度在5~40 ng/mL范围内线性关系良好(R2=0.9943),检出限为0.53 ng/mL,批内相对标准偏差(RSD)为4.6%~6.6%,批间RSD为5.7%~8.0%,回收率为95.4%~104.2%,与游离前列腺特异性抗原F-PSA的交叉反应率为0.6%。本方法简单、稳定、灵敏、快速,为开发检测PSA-ACT的CLEIA试剂盒奠定了基础。 相似文献
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现在,癌症患者与日俱增,为什么每200个家庭就会出现一例?虽然放射性是癌的克星,但其副作用令人忧心忡忡。科学发展到今天,对癌症的放射性治疗有没有新的进展?是否能将副作用降至最低?下面我们就以前列腺癌为例,做一个简单介绍。我们知道,癌症早期不易觉察,比如前列腺癌早期会出现与前列腺增生类似的症状——前列腺特异抗原PSA值持续增高且有短时的尿频。在没有确诊为癌时,医生一般不采取手术等治疗措施,患者及亲友也常抱有侥幸心里,认为没有查出癌就万事大吉了。随着时间的推移,当一张中晚期的癌症确诊单摆在面前时,患者及亲友在愕然之余… 相似文献
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含有磺胺的多金属氧酸盐的合成及抑制前列腺癌细胞PC-3M作用的研究 总被引:6,自引:0,他引:6
合成了(C6H9N2O2S)5HP2Mo18O62•15H2O (SPOM-1)和(C6H9N2O2S)H8P2Mo15V3O62•8H2O (SPOM-2)两种新的含有磺胺的多金属氧酸盐, 通过元素分析、IR光谱对其结构进行了表征. 在人雄激素非依赖性前列腺癌细胞系PC-3M内, 对合成的多金属氧酸盐进行了抗肿瘤活性的研究. 研究发现, SPOM-1, SPOM-2在体外能明显抑制前列腺癌PC-3M细胞, 并呈一定的量效关系, EC50分别为38, 11 g•mL-1; 治疗指数(TI)分别为12.07, 26.82; SPOM-2的抗前列腺癌PC-3M细胞活性大于SPOM-1. 相似文献
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散斑型BTB/POZ蛋白(SPOP)是前列腺癌中突变率最高的蛋白质之一。该研究通过整合细胞蛋白质组学和代谢组学的方法,揭示SPOP突变引起的代谢紊乱及其调控的代谢通路。首先,系统地研究了LNCaP SPOP野生型及突变型高表达细胞中的代谢变化。代谢组学结果显示,SPOP野生型和突变型(SPOP_Y87N和SPOP_F133L)导入的LNCaP细胞在偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)得分图上得到了很好的区分。进一步通过单因素方差分析发现,SPOP突变引起富马酸、苹果酸、柠檬酸、天冬氨酸和天冬酰胺等代谢物含量的增加。蛋白质组学共发现909种蛋白质在两种LNCaP SPOP突变体细胞中发生变化。分别对差异代谢物和差异蛋白质进行通路富集分析,发现三羧酸循环、氨酰基-转运核糖核酸生物合成在代谢组学和蛋白质组学分析中都发生了明显改变。最后,在SPOP敲除的Du145细胞中验证了上述研究结果。该研究证明SPOP突变可促进三羧酸循环。 相似文献
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建立了一种定量分析人血清中游离前列腺特异性抗原(f-PSA)的高灵敏度微孔板化学发光酶免疫分析方法,以碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)为标记酶,4-甲氧基-4-(3″-磷酰氧基苯)-螺旋-(1,2-二氧杂环丁烷-3,2′-金刚烷)(4-methoxy-4-(3″-phosphate-phenyl)-spiro-(1,2-dioxetane-3,2′-adamantane),AMPPD)-ALP高灵敏的化学发光反应为检测体系,通过检测发光强度对人血清中f-PSA进行定量。对几种物理化学参数如温育时间、免疫反应步骤以及检测时间等进行了优化,采用了一步双抗体夹心法,37℃恒温静置温育2h,洗涤后加入50μL AMPPD,30~80min内检测。该方法线性范围为0.15~20μg/L,相关系数大于0.998;检出限可达0.01μg/L,批内和批间相对标准偏差(C.V.)均小于7%;回收率在88%~108%之间。对人体血清中共存的6种常见肿瘤标志物CA50、CA125、CA15-3、CA242、CEA和AFP的偶联反应进行考察,特异性良好。为了验证该方法用于商业试剂盒的可行性,在4℃和37℃条件下分别进行了3d,5d,7d的稳定性考察,其线性相关系数仍均大于0.998,相对标准偏差小于6%。对98例实际血样进行测定,并与进口试剂盒(Monobind.USA)作临床比对,相关性良好。这些结果均表明,该分析体系稳定,可靠,可以用于商业化试剂盒的开发,在临床分析人血清中f-PSA的辅助诊断前列腺癌方面具有很高的应用价值。 相似文献