辅酶NADH与色氨酸共振能量转移的荧光动力学研究

采用时间相关单光子计数技术, 结合紫外-可见吸收光谱和稳态荧光光谱, 对不同环境下的色氨酸和辅酶还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)之间的共振能量转移荧光动力学进行了研究. 单体色氨酸、 牛血清白蛋白以及乳酸脱氢酶蛋白与NADH之间相互作用的光谱数据表明, 只有存在NADH结合位点的乳酸脱氢酶和NADH之间发生了荧光共振能量转移. 进一步通过加入丙酮酸来阻断乳酸脱氢酶和NADH之间的荧光共振能量转移通道, 时间分辨荧光光谱和衰减相关光谱(DAS)证实, 蛋白结合位点的存在是NADH和色氨酸之间发生荧光共振能量转移的前提条件. DAS揭示了乳酸脱氢酶平均荧光寿命的减小主要是源于色氨酸中7.35 ns的荧光寿命成分与NADH之间的荧光共振能量转移, 同时给出了NADH和色氨酸之间的能量转移效率, 为研究NADH和蛋白之间的相互作用提供了新思路.     

固相萃取-HPLC快速测定血清中烟酸及其代谢产物

建立血清中烟酸(NA)、烟酰胺(NM)及其代谢产物N'-甲基尼克酰胺(NMN)、2-吡啶酮(2Py)的测定方法.采用高效液相色谱法(HPLC),以氨基固相柱萃取样品,0.04mol/L KH2PO4提取洗脱,同时测定血清中NMN、NA、2Py、NM的含量.校准曲线线性范围为0.5-30μg/mL,r≥0.9986.检出...     

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸类CD38抑制剂的合成及生物活性评价

分别以1,3,5-三苯甲酰基-α-D-核糖、3,5-二苯甲酰基-2-脱氧-2,2-二氟戊呋喃糖-1-酮和D-木糖为原料, 经由烟酰胺核苷及烟酰胺核苷酸中间体, 合成了系列糖环经氟原子取代的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)类CD38抑制剂. 基于对CD38的水解抑制能力的考察, 评价了所合成氟代NAD类似物的活性. 结果表明, 糖环上氟原子取代的数目和位置对抑制剂活性的影响十分明显, 烟酰胺核苷的端基构型对活性的影响较大. 2个化合物均显示出非常好的CD38抑制活性, 其中化合物2a的抑制活性高出阳性对照物阿糖型氟代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸2个数量级.     

电聚合烟酰胺制备电化学传感器：同时测定多巴胺、尿酸和抗坏血酸

用循环伏安法（CV）选择不同电位区间来电聚合烟酰胺（NA）得到了两种聚合物膜修饰电极：poly-niacinamide/GCE (poly-NA/GCE)和poly- nicotinic acid /GCE (poly-NC/GCE)。这两电极都具有显著电化学催化作用,能明显地降低多巴胺（DA）、尿酸（UA）和抗坏血酸(AA)的氧化过电位,并在混合溶液中使这些物质的氧化峰电位距离足够大,可进行三物质的同时测定。poly-NC/GCE的电催化性能更好一些,用差分脉冲伏安法（DPV）测定抗坏血酸,线性范围为75–3000 µmol L-1,电流灵敏度为5.6 mA•L•mol-1;测定多巴胺,线性范围为0.37 – 16 µmol L-1,电流灵敏度为1140 mA•L•mol-1; 测定尿酸,线性范围为0.74 – 230 µmol L-1,电流灵敏度为102 mA•L•mol-1。该电极具有很高的灵敏度、选择性和抗污染能力。     

烟酰胺与DNA相互作用的电化学研究

利用示差脉冲伏安法研究了烟酰胺(NA)与小牛胸腺DNA在pH 8.0条件下相互作用的电化学行为.双链DNA(dsDNA)或单链DNA(ssDNA)的存在导致NA的峰电流明显降低且峰电位负移,表明NA与DNA发生相互作用,生成了复合物,且其作用模式主要是静电模式,但NA与dsDNA的相互作用强于与ssDNA的相互作用,可用于识别dsDNA和ssDNA.通过dsDNA加入前后峰电流的变化,计算得出NA与dsDNA结合常数β=4.946×10(11),结合位点数m=3.此外,NA的峰电流Ip与DNA质量浓度在1～14mg/L的范围内呈线性关系,线性回归方程为Ip(10-5A)=-0.03451cDNA(mg/L)+1.7408,相关系数R为0.9998.该法具有良好的回收率和选择性,可用于样品中DNA的测定.     

二氧化锰催化水解3-氰基吡啶生成烟酰胺

以高锰酸钾原料经氧化还原反应制备的二氧化锰为催化剂,催化3-氰基吡啶水解生成烟酰胺的反应。该类催化剂具有很高的催化活性和选择性,催化反应最高收率达到了99.57%,且几乎没有烟酸副产物。X-衍射图谱和IR图谱显示了该类催化剂的催化活性与它们的晶体结构及其表面的结合水有关     

高效液相色谱法测定化妆品中α-、β-熊果苷及烟酰胺

建立了美白类化妆品中熊果苷的两种光学异构体α-熊果苷和β-熊果苷及烟酰胺的高效液相色谱检测方法。样品用氯化钠水溶液-氯仿(2:1, v/v)进行萃取。固定相为依利特ODS-BP柱(200 mm×4.6 mm, 5 μm),流动相为甲醇-水(10:90, v/v),柱温为25 ℃,检测波长为220 nm,流速为0.5 mL/min,进样量为20 μL。在上述条件下α-熊果苷、β-熊果苷和烟酰胺的质量浓度依次在0.07~50, 0.06~50, 0.05~50 mg/L时与色谱峰面积之间的线性关系良好,相对标准偏差(n=7)分别为1.65%、1.73%和1.33%。将该方法用于化妆品的检测,回收率为91.7%～109.6%。该法简便、快速、准确,可用于化妆品美白成分的测定。     

反相高效液相色谱法分离测定复合维生素片剂中VB1,VB2,VB6和烟酰胺

采用NovaPak C18色谱柱(30 cm×3.9 mm,粒径10 μm),以(V(水)V(甲醇)V(冰乙酸)m(庚烷磺酸钠)=730 mL270 mL5 mL400 mg)为流动相,检测波长为280 nm,分离测定了复合维生素片剂中的VB1,VB2,VB6和烟酰胺,实验回收率分别为100.5%,96.8%,98.1%,102.0%,相对标准偏差RSD分别为0.8%,0.4%,0.5%,1.2%(n=5),检出限分别为39,4.2,4.7,10 ng.本法已用于复合维生素片剂中VB1,VB2,VB6和烟酰胺的分离和测定.     

烟酰胺极谱行为的研究

用单扫示波极谱法，烟酰胺在ＫＨ２ＰＯ４－Ｎａ３２Ｂ４Ｏｒ－ＮａＯＨ，底液中呈出现良好的二阶导数峰，Ｅｐ＝－１．８０±０．０１Ｖ，在５×１０＾－７－２×１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ范围内，峰高与浓度成线性关系，检测限为２．２×１０＾－７ｍｏｌ／Ｌ。此法用于ＮＡ片剂含量的测定，其结果良好。     

生化教材中存在44年的瑕疵——吡啶环上氮原子的化合价

Understanding redox reactions in reaction of nicotinamide adenine dinucleotide (NAD⁺) and nicotinamide adenine dinucleotide phosphate (NADP⁺) requires a clear grasp of the textbook content. The reactions in nicotinamide coenzymes with reduced and oxidized forms have been compared in various biochemistry textbooks. Incorrect interpretations usually emphasize the valence changes that at nitrogen in the pyridine ring of a nicotinamide from +5 to +3. Actually, the valence of nitrogen in pyridine ring is -3. We have gathered shreds of evidences and provide here possible suggestions and caution for readers and instructors.