水中硝基苯胺类化合物酶免疫化学分析技术研究

采用戊二醛法, 将4-硝基苯乙胺与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)共价偶联, 分别合成了免疫原4-硝基苯乙胺-BSA和包被原4-硝基苯乙胺-OVA, 经紫外分光光度计及飞行时间质谱扫描鉴定. 用合成的免疫抗原免疫新西兰大白兔, 并用合成的包被原进行间接竞争酶联免疫(ELISA)试验, 获得的抗血清效价达1∶32000. 方阵实验确定了包被抗原最佳浓度(0.5 mg/L)及抗血清最佳稀释度(1∶6000), 并建立了间接竞争ELISA方法. 工作曲线表明在1～1000 μg/L浓度范围内呈良好的线性关系, 该法IC₅₀值为(52.73±2.67) μg/L, 检测限为5.12 μg/L. 其它类似结构不干扰硝基苯胺的测定. 成功地建立了硝基苯胺类化合物的间接竞争酶免疫化学分析方法．     

新型含磷抗原的合成

肽键的水解在生命化学中起着重要的作用, 利用人工合成的抗原诱导具备天然肽酶活性的抗体酶具有深远意义, 因而众多的工作集中于催化酰胺键和肽键水解的抗体酶的研究. 这些工作通常是以Paulling的过渡态理论为指导, 以磷为中心原子设计合成类似肽键或酰胺键水解过渡态结构的过渡态类似物. 然而按照这种方法得到的抗体酶很少具有肽酶活性. 金声等[1]曾以CPA的肽底物马脲酰苯丙氨酸为模型, 以四面体过渡态类似物为基础, 用硫代替磷, 设计合成了新型半抗原[2]. 制备了相应的具有活性的抗体酶, 然而这样的结果尚不能说明以硫原子代替磷原子的方法的优越性, 因此有必要以磷原子为中心原子合成出一个类似抗原, 将其诱导出的抗体相互比较, 才能得到有意义的结论. 本文报道了含磷抗原的合成, 合成路线如下:     

柔红霉素与DNA作用的序列特异性研究

采用紫外-可见光谱法和紫外-可见光谱电化学法研究了柔红霉素(DNR)与不同寡聚核苷酸之间的相互作用.结果表明,DNR优先作用于寡聚核苷酸的CpG位点,然后是ApG和ApC.因为DNR可与鸟嘌呤之间形成3个氢键.与双链寡聚核苷酸作用时,DNR最先插入的位点是(CpG)₂碱基对之间,其次是(TpG)(CpA)和(GpC)(ApC)碱基对之间.当DNR与存在未配对G碱基的DNA链作用时,因游离的DNR量增加使其电化学活性增加,导致DNA构象和构型的变化,使DNA生理功能受到损伤,DNA碱基增色效应显著上升.此法可用于G碱基未配对DNA链的检测.     

Antiplane problem of circular ARC interfacial rigid line inclusions

The antiplane problem of circular arc rigid line inclusions under antiplane concentrated force and longitudinal shear loading was dealt with. By using RiemannSchwaz‘s symmetry principle integrated with the singularity analysis of complex functions, the general solution of the problem and the closed form solutions for some important practical problems were presented. The stress distribution in the immediate vicinity of circular arc rigid line end was examined in detail. The results show that the singular stress fields near the rigid inclusion tip possess a square-root singularity similar to that for the corresponding crack problem under antiplane shear loading, but no oscillatory character. Furthermore, the stresses are found to depend on geometrical dimension, loading conditions and materials parameters. Some practical results concluded are in agreement with the previous solutions.     

纳米孔技术对PD-1抗原抗体结合检测的实验研究

肿瘤的免疫疗法是利用人体自身的免疫系统去治疗肿瘤的一种方法，程序性死亡受体1（PD-1）是肿瘤免疫疗法中的一种免疫检查点，利用PD-1或PD-L1的单克隆抗体，可以阻断PD-1/PD-L1信号通路，恢复T细胞的免疫杀伤功能，实现肿瘤的免疫治疗.为了研究PD-1抗体药物与人体PD-1抗原的结合有效性，以PD-1蛋白质分子为实验对象，用纳米孔传感器件开展了PD-1、PD-1抗体及其结合物的辨识.分别对纯PD-1蛋白质分子和其抗体分子进行了纳米孔过孔实验研究，发现PD-1及其抗体的相对堵塞电流幅值比分别为0.00404和0.01297，实现了抗原抗体分子的区分.并对Si₃N₄纳米孔内壁进行了PD-1抗体修饰，再将PD-1蛋白质分子通过经抗体修饰后的纳米孔，以期实现结合物的检测，实验结果显示部分抗原抗体实现了特异性结合，剩下部分呈游离状，所以纳米孔技术可实现抗原抗体结合物的区分.未来，纳米孔有望成为无标志检测药物有效性的一种新手段.     

基于酶剪切量子点荧光放大技术的双元miRNA定量检测

将量子点荧光特性与双链特异性核酸酶的DNA剪切特性相结合,提出一种高灵敏度、高特异性的双元miRNA定量检测方案.首先,将量子点和四氧化三铁磁性纳米粒子分别与捕获DNA链接形成捕获探针,再与待测miRNA互补配对形成异源双链杂合结构,随后双链特异性核酸酶对杂合结构中的捕获DNA进行特异性剪切,实现量子点和待测miRNA从捕获探针分离,且分离的待测miRNA与捕获探针上未配对的DNA开始新一轮杂交和再剪切.经过上述循环过程,量子点从捕获探针大量释放,荧光信号不断增强,实现肿瘤标志物miRNA的高灵敏检测.实验结果表明,基于酶剪切量子点荧光放大技术,在1fmol/L至100pmol/L的浓度范围内,同时实现了肿瘤标志物miRNA-141及循环miRNA内参miRNA-1228的特异性定量检测,其检出限分别达到0.69fmol/L和0.21fmol/L.与实时荧光定量多聚核苷酸链式反应方法相比,该方案获得了相同的检测结果,且具有更高灵敏度.     

椭圆偏振光谱法应用于临床医学检测的研究

本文用椭圆偏振光谱法对固－液界面上的正常兔ＩｇＧ抗原与羊－抗兔抗体反应及其抗原抗体复合物离解过程进行了研究。结果表明：抗原抗体反应和抗原抗体复合物离解均在极短时间内出现光学参量变化率最大峰，且抗原抗体复合物离解的光学参量变化率最大峰比抗原抗体反应的光学参量变化率最大峰高、所需时间短；该方法用于临床医学检测中，可用Ｖ＿（ｏｐ）～ｔ图谱快速判断抗体或抗原是否存在。     

花鲈同工酶的组织特异性研究

采用聚丙烯酰胺垂直平板电泳对花鲈的心、肝、眼球、视网膜、肌肉、肾、鳃、胸鳍等8个组织的10种同工酶(LDH、MDH、ME、α-GPDH、ADH、SDH、SOD、G—6—PDH、EST、GDH)进行了分析，结果认为：10种同工酶在各个组织中的表达频率，以肝脏最高，其次为心脏、肌肉、视网膜，较低的为眼球、锶、肾、鳍组织．其中LDH、MDH、及SOD三种同工酶都能在8个组织中得到表达，但表达的强度有所差异．基因座位表达程度，以肝脏、肌肉两组织为最全面．     

CaO,MgO等氧化物的表面特异性

加入硫酸根离子的ＴｉＯ２，Ｆｅ２Ｏ３和ＺｒＯ２等金属氧化物可以制成一种新型催化剂－固体超强酸，而ＣａＯ，ＭｇＯ，ＺｎＯ和Ｌａ２Ｏ３等氧化物用同样的方法却不能被制成超强酸，硫酸铵附载的不能生成超强酸的氧化物没有硫酸铵在其表面上的分散，因此也没有发生ＳＯ＾２－４与这些氧化物表面的相互作用，这些氧化物与能生成超强酸的氧经物具有完全不同的表面性质，正是由于这种特异性使得它们不能被制成超强酸。     

AIDS病毒与CD4靶细胞检测方法的研究

本文对AIDS 病毒抗原及其靶细胞(CD⁺₄ ) 检测方法的研究进展作了较系统的评述。深入分析了gp 120、CD₄ 受体分子与小肽的相互作用。并给出了抗A IDS 病毒药物分析方法的最新研究动向。