氦-氖激光诱变细菌细胞及原生质体选育果胶酶高产菌株

利用氦-氖激光(波长632.8nm,功率15mW)诱变果胶酶产生菌的菌体细胞,获得了突变株ZH-g,其酶活达到301 u·mL－1,是出发菌株的1.3倍.进一步用氦-氖激光照射ZH-g的原生质体,从而得到了高产突变株ZH-gA,其酶活达到357 u·mL－1,比ZH-g提高了18%,是出发菌株的1.6倍.该菌株在好氧和静置条件下均能良好产酶,经传代实验证明其产酶性能稳定.     

紫外、氦氖激光等复合诱变产果胶酶细菌ZH1的研究

ZH₁菌株是从自然界分离筛选而来的,该菌株产果胶酶的最适pH为7.0;最适温度33℃;培养36h达产酶高峰,酶活力为73.5μ/mL,将ZH₁作为出发菌株,经紫外线诱变、硫酸二乙酯诱变,亚硝基胍和紫外线复合诱变及氦氖激光等多次反复诱变,选育得到一株产果胶酶性稳定且酶活明显提高的突变株ZHg,其酶活为301m/mL,比出发菌株ZH₁产果胶酶能力提高3.1倍.     

果胶酶对苹果渣中多酚类物质的提取效果研究

具有多种生理活性的多酚类物质在苹果渣中主要以聚合体的形态存在。本研究利用果胶酶分解果胶质,把聚合态的多酚类物质转变为游离态,并提高多酚类物质的提取率。实验得出果胶酶释放总多酚类物质的最佳反应条件是温度为37℃,pH为3.6,酶/基质比例为12%,反应时间为11h。在此条件下,总多酚类物质(total phenolic compounds,TPC)和总黄酮类物质(total flavonoid compounds,TFC)含量分别达到9.08g/kg和1.38g/kg,比对照组的7.05g/kg和0.91g/kg分别提高1.3倍和1.5倍。果胶酶处理组比对照组多检出咖啡酸、香豆酸、阿魏酸、根皮素和未知物U3。以上结果表明,果胶酶具有较强的分解果胶质的功能,并能提高总多酚类物质的含量。     

离子色谱测定烟草中果胶方法的改进

为了提高YC/T 346–2010果胶含量测定方法的分析速度,将标准中醇化除糖、滤渣酸化两步前处理优化为一步,即酸醇溶液加热回流同时除糖和酸化,并将方法改进前后的测定结果进行比较分析。一步前处理方法线性相关系数为0.999 9,回收率为93.57%~102.29%,测定结果的相对标准偏差为4.92%(n=5)。该方法简化和缩短了样品前处理步骤和时间,测定结果与YC/T 346–2010一致,可用于烟草中果胶含量的批量测定。     

激光诱变选育果胶酶高产菌株

采用Ar⁺、He-Ne、LD、YAP等激光辐照果胶酶产生菌,不同波长激光辐照均获高酶活菌株,其中从LD激光与He-Ne激光辐照组中选育出酶活达6×10⁴单位/g的高产菌株(比对照组提高122%),并稳定地应用于生产.文中从黑曲霉抱子与DNA的吸收光谱以及电镜观察黑曲霉抱子的结果出发,对激光诱变机制进行了初步探讨.     

激光诱变选育果胶酶高产菌株

采用Ar＋、He－Ne、LD、YAP等激光辐照果胶酶产生菌，不同波长激光辐照均获高酶活菌株，其中从LD激光与He－Ne激光辐照组中选育出酶活达6×104单位／g的高产菌株（比对照组提高122％），并稳定地应用于生产．文中从黑曲霉抱子与DNA的吸收光谱以及电镜观察黑曲霉抱子的结果出发，对激光诱变机制进行了初步探讨．     

以HPD-750大孔树脂为载体材料固定化果胶酶

HPD-750树脂是中极性大孔吸附树脂,生物相容性好,机械性能稳定,具有较大的比表面积,可用于固定化酶载体材料。本文以HPD-750大孔树脂为载体固定化果胶酶,研究各因素对固定化酶的影响,并采用正交试验对固定化条件进行优化。结果表明,当pH为4.0、固定化温度为45℃、固定化时间为4h、加酶量为0.16g/mL时,固定化酶活力可达5146U/mg。以HPD-750大孔树脂为载体材料制备的固定化酶相较于游离酶具有更好的酸碱稳定性和热稳定性。在循环使用10次后,酶活力依然保留80%以上;4℃储藏25d之后,其酶活力仍保留60%以上。与D311大孔树脂、聚丙烯酰胺和海藻酸钠微球制备的固定化酶相比,HPD-750大孔树脂固定化酶的活性、操作稳定性、机械稳定性和储存稳定性都较好。该结果说明,HPD-750大孔树脂可作为固定化酶较好的载体材料。     

酶法提取番茄红素

在提取番茄中番茄红素时,添加果胶酶和纤维素酶,筛选出最佳工艺为:果胶酶和纤维素酶的比例为4∶1、添加酶量为0.5%、酶的作用温度为40℃、pH4、浸提时间为4h,按此条件可大大提高番茄红素的提取率。