示差脉冲伏安法测定乳酸脱氢酶活性及纳米微粒生物毒性检测新方法研究

采用示差脉冲伏安法，在乳酸脱氢酶(LDH)酶促体系“丙酮酸盐 + NADH +H⁺ (?) 乳酸盐 + NAD⁺”中，通过检测NAD⁺还原峰电流的变化，测定了不同条件下(不同酶用量、缓冲液pH值以及温度)LDH的活性、酶促体系的米氏常数K_m^NADH以及最大反应速率v_max。并且在最佳实验条件下，通过检测LDH活性的改变，实验考察了3种纳米物质(ZnS，TiO₂(R)和TiO₂(A))对乳酸脱氢酶酶促体系的影响。     

血液中苯丙氨酸的测定方法研究进展

高效、简便、快速测定血液中苯丙氨酸含量在医学上尤其是对新生儿的苯丙酮尿症的筛查有着重要的意义；本文就血液中苯丙氨酸的测定方法研究进展进行了综述，内容包括：细菌抑制法、荧光法、高效液相色谱法、气相色谱—质谱联用、质谱—质谱联用、毛细管电泳、酶／比色法以及酶电极法等。     

土壤微生物ATP、脱氢酶和尿素酶活性的ED50值评价外源镧的生物毒性

０IntroductionRareearthsarenowappliedwidelyinChina，whichcanimprovecropsyieldsandthetheirqualit－ies犤１犦．Thebeneficialeffectsmaybeduetothestimu－latoryeffectsoftheseelementsonthenutrientuptakebyplantsorontheincreasingofchlorophyllsynthesisintheplants犤２犦．Whilealotofresearcheshavebeendoneontheimprovednutritionofcropsafterapplica－tionofrareearths，muchlessattentionhasbeenpaidtothedeteriorationofsoilqualityduetotheapplicationofrareearthsforyears犤３犦．Scientistshavediscoveredthataccumula…     

基于甲基化核酸内切酶的甲基转移酶活性的电化学检测研究

由DNA甲基转移酶(DNMT1)催化的DNA甲基化在许多生物过程中起重要作用,包括基因转录,基因组印记和细胞分化~([1])。本文利用特异性酶切法成功开发了一种有效的测定DNMT1的电化学方法。首先,将硫醇修饰的双链DNA(dsDNA)自组装固定在金电极上,随后DNMT1识别dsDNA半甲基化序列并实现完全甲基化,最后通过甲基化特异性限制酶(BSSHⅡ)剪切,未发生完全甲基化的碱基序列将被剪切并移除电极表面。利用差分脉冲伏安法(DPV)分别测定剪切前后的亚甲基蓝(MB)还原电流。在最佳优化条件下,该方法线性范围为0.5 nM～50 nM,检测限为0.5 nM。这种方法可以简单有效地检测DNA甲基化和DNMT1活性,在DNA甲基化快速检测和基因毒理分析方面具有一定的实际意义。     

微胶囊固定化过氧化氢酶

以乙基纤维素为膜材，用液中干燥法将过氧化氢酶微胶囊化，研究了温度和ｐＨ值对酶活性的影响及过氧化氢和尿素对固定化酶的抑制作用，由于乙基纤维素膜的保护，明胶对ｐＨ值的缓冲作用及明胶与尿素的反应，明显地扩大了酶对温度和ｐＨ值的适应性，降低了酶活性抑制剂的影响。     

镧对Rhizoctonia solani的毒力及其致病酶活性的影响

采用琼脂平板生长速率法及液体培养基培养测定了La对立枯丝核病菌(Rhizoctoniasolani)的抑制作用和毒力,并测定了其对病菌胞外的果胶酶、蛋白酶和纤维素酶等几种致病酶的活性的影响。结果表明,随着La浓度升高,对病菌菌丝生长的抑制作用增强,固体培养上所测定的对病菌的EC50和EC95分别为171.9和667.7mg·L-1;在液体培养基中所测定的EC50和EC95分别为111 4和500 7mg·L-1。在一定浓度范围内,La提高了单位量菌丝所产生3种致病酶的活性,但由于对菌丝生长量的强烈抑制,使病菌胞外3种致病酶的总量或总活性受到抑制,减低了病菌的致病力。     

DSO的稳定触发及FFT应用

对数字存储示波器的触发设置及FFT运算中的关键问题,即触发信源、触发模式、触发方式的选择进行了详细的阐述,给出了信号不能稳定触发时的具体处理方法;对决定着能否对一些复杂信号和微弱信号稳定同步触发的两个重要功能,即触发灵敏度及触发释抑时间的设置,进行了分析与实际测试;对DSO具有的FFT功能的设置及应用进行了阐述。这些功能的正确使用,是充分发挥数字存储示波器对信号强大捕获及分析处理功能的关键因素。     

端粒酶活性检测研究进展

端粒酶活性检测方法经过近30年的不断改革与发展,取得了巨大突破。该文重点综述了近3年的端粒酶活性检测方法,其中包括化学反应发光法、电化学法、荧光分析法、比色法等,旨在更加全面地了解目前端粒酶活性检测的研究进展,为设计新的端粒酶活性检测方法和克服端粒酶活性检测方法在临床试验中的挑战提供思路。     

Sensitive detection of DNA methyltransferase activity based on rolling circle amplification technology

This work develops a fluorescence approach for sensitive detection of DNA methyltransferase activity based on endonuclease and rolling circle amplification （RCA） technique. In the presence of DNA adenine methylation （Dam） MTase, the methylation-responsive sequence of hairpin probe is methylated and cleaved by the methylation-sensitive restriction endonuclease Dpn 1. The products cleaved by restriction endonuclease Dpn I then function as a signal primer to initiate RCA reaction by hybridizing with the circular DNA template. Each RCA product containing thousands of repeated sequences might hybridize with a large number of molecular beacons （detection probes）, resulting in an enhanced fluorescence signal. In the absence of Dam MTase, neither methylation/cleavage nor RCA reaction can be initiated and no fluorescence signal is observed. The proposed method exhibits a dynamic range from 0.5 U/mL to 30 U/mL and a detection limit of 0.18 U/mL. This method can be used for the screening of antimicrobial drugs and has a great potential to be further applied in early clinical diagnosis.     

MALDI质谱技术在酶活性分析中的应用

酶作为生物催化剂参与很多重要的生理过程,同时也是一类重要的生物分子。酶的活性分析对于疾病诊断和治疗具有重要意义。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)具有操作简单、分析速度快、灵敏度高和易于实现高通量分析的特点,已被广泛用于各种组学研究和生物分子的检测,在酶的检测和活性分析中亦发挥了重要作用。该文综述了国内外利用MALDI-TOF MS分析酶活性和进行药物筛选的策略,总结了各种方法的优缺点,提出了MALDI质谱技术在酶活性分析领域存在的问题和挑战,并对其发展前景进行了展望。