| 基于甲基化核酸内切酶的甲基转移酶活性的电化学检测研究 |
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| 引用本文： | 白雪娇,鲁理平,康天放.基于甲基化核酸内切酶的甲基转移酶活性的电化学检测研究[J].化学研究与应用,2019,31(6):1079-1085. |
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| 作者姓名： | 白雪娇 鲁理平 康天放 |
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| 作者单位： | 北京工业大学环境与能源工程学院,北京,100124;北京工业大学环境与能源工程学院,北京,100124;北京工业大学环境与能源工程学院,北京,100124 |
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| 摘 要： | 由DNA甲基转移酶(DNMT1)催化的DNA甲基化在许多生物过程中起重要作用,包括基因转录,基因组印记和细胞分化1]。本文利用特异性酶切法成功开发了一种有效的测定DNMT1的电化学方法。首先,将硫醇修饰的双链DNA(dsDNA)自组装固定在金电极上,随后DNMT1识别dsDNA半甲基化序列并实现完全甲基化,最后通过甲基化特异性限制酶(BSSHⅡ)剪切,未发生完全甲基化的碱基序列将被剪切并移除电极表面。利用差分脉冲伏安法(DPV)分别测定剪切前后的亚甲基蓝(MB)还原电流。在最佳优化条件下,该方法线性范围为0.5 nM^50 nM,检测限为0.5 nM。这种方法可以简单有效地检测DNA甲基化和DNMT1活性,在DNA甲基化快速检测和基因毒理分析方面具有一定的实际意义。
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| 关 键 词： | DNA甲基化 甲基转移酶活性 特异性酶切法 亚甲基蓝 |
Electrochemical detection of methyltransferase activity based on methylation endonuclease |
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| BAI Xue-jiao,LU Li-ping,KANG Tian-fang.Electrochemical detection of methyltransferase activity based on methylation endonuclease[J].Chemical Research and Application,2019,31(6):1079-1085. |
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| Authors: | BAI Xue-jiao LU Li-ping KANG Tian-fang |
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| Institution: | (College of Environmental and Energy Engineering,Beijing University of Technology,Beijing 100124,China) |
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| Abstract: | BAI Xue-jiao;LU Li-ping;KANG Tian-fang(College of Environmental and Energy Engineering,Beijing University of Technology,Beijing 100124,China) |
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| Keywords: | DNA methylation methyltransferase activity restriction endonuclease method methylene blue |
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