全氟辛烷磺酸与蛋白质体系的共振光散射光谱及其分析应用

研究了牛血清白蛋白(BSA)与全氟辛烷磺酸(PFOS)相互作用的共振光散射(RLS)光谱,建立了PFOS的共振光散射分析方法。 在pH值为4.1的BR缓冲溶液中,全氟辛烷磺酸根阴离子与质子化的BSA通过静电引力和疏水作用形成离子缔合物,引起共振光散射强度(IRLS)显著增强,最大散射波长位于285.0 nm处,增强的散射信号强度与PFOS浓度在0.2～25.0 μmol/L范围内呈线性关系,据此建立了测定PFOS的光散射分析方法,检出限为20.0 nmol/L。 讨论了体系的最佳反应条件及外来物质的干扰,并探讨了反应机理。 建立的共振光散射法用于环境水样中PFOS的测定,RSD≤4.4%。     

共振散射光谱法研究人血清白蛋白与二甲酚橙的反应

对二甲酚橙作为光散射探针测定蛋白质进行了研究,基于人血清白蛋白对二甲酚橙的共振光散射强度的增强效应,建立了测定蛋白质的共振散射光谱法。在pH 4.00的NaOAc-HOAc缓冲溶液中,二甲酚橙只有微弱的光散射强度,但它与蛋白质的缔合物却有较强的共振光散射信号,在λ=517 nm处,光散射强度达到最大,并且与蛋白质浓度在为0.0~10.0 mg.L-1范围呈线性,检出限为0.044 mg.L-1。运用摩尔比法测定二甲酚橙和蛋白质的结合数为132,用于实际样品的分析,测定值与考马斯亮蓝法的结果一致,分析结果的RSD值(n=5)均小于5%。     

刚果红共振光散射法测定蛋白质

本文研究了生物染料刚果红(Congo red)与人血清白蛋白(HSA)作用的共振光散射光谱,pH为4．35的溶液中,刚果红与人血清白蛋白作用导致在575m处共振光散射明显增强,且共振光散射信号值与蛋白质的浓度具有线性关系。     

1-萘酚诱导人血清白蛋白和牛血清白蛋白构象的变化

采用稳态荧光光谱、同步荧光光谱、荧光共振能量转移技术结合分子对接法,探究了1-萘酚(1-OHNap)诱导人血清白蛋白(HSA)和牛血清白蛋白(BSA)构象变化的差异。结果表明,与1-OHNap的结合作用使HSA中荧光团周围微环境极性发生改变,BSA中Trp残基周围微环境的极性增加;同时,与1-OHNap的结合作用使HSA、BSA中的多肽链轻微展开,其中HSA中α-螺旋占比的降幅较大;1-OHNap与HSA、BSA的结合平衡常数（Kb）分别为1.49×104、8.76×103 L/mol;1-OHNap分别结合在HSA和BSA的ⅡA子域和ⅠB子域;1-OHNap与HSA和BSA中Trp残基的表观距离分别为1.53 nm和1.42 nm。实验证实1-OHNap诱导HSA和BSA构象的变化具有差异。     

蛋白质-四羧基铜酞菁体系的共振散射行为及其分析应用

在pH 3.0的Clark-Lub's 缓冲溶液中,蛋白质与四羧基铜酞菁(CuPc(COOH)4)作用,使体系的共振光散射增强,在λ=389 nm处光散射强度最大.增强作用的强弱与蛋白质的含量成正比,据此建立了共振光散射测定蛋白质的新方法.此方法对牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)、免疫球蛋白G(IgG)、鱼精蛋白(Protamine)、血清总蛋白(TP)的测定范围分别为0.05～1.60 mg/L、 0.025～1.60 mg/L、 0～1.45 mg/L、 0.1～1.50 mg/L、 0～1.60 mg/L,相应检出限分别为1.12×10-2 mg/L、 1.11×10-2 mg/L、 1.95×10-2 mg/L、 3.61×10-3 mg/L、 4.34×10-3 mg/L.方法应用于实际人血清样品中总蛋白的测定,结果与考马斯亮蓝法基本一致.     

血卟啉衍生物(HpD)的表面增强共振拉曼光谱

近年来,采用光敏剂(H_pD)与光的协同效应,诊治癌肿疾病有了较大的进展,所以,研究其光谱特性是有其现实意义的。 用共振拉曼光谱和表面增强拉曼光谱所获得的散射强度,都比通常的拉曼光谱有几个数量级的增强,并可得到稀溶液(10~(-6)～10~(-3)mol/L)的高质量光谱,本文报道了8×10~(-3)mol/L HpD水溶液的共振拉曼光谱和5×10~(-5)mol/L HpD水溶液的表面增强共振拉曼光谱,结果表明,表面增强共振拉曼光谱比共振拉曼光谱的散射强度滴出三个量级。     

蛋白质与聚乙二醇之间相互作用的光谱法研究

通过共振散射光谱(RLS)、二维共振散射光谱(2D-RLS)及荧光光谱研究了牛血清白蛋白(BSA)与聚乙二醇(PEG)在溶液中的相互作用。PEG和BSA之间存在着氢键作用及疏水作用,其中氢键作用是主要的。在相同条件下,基于RLS方法测得的PEG与BSA之间的结合常数为9.56×103L/mol,而基于荧光光谱方法测得的PEG与BSA之间的结合常数为6.21×103L/mol。两种方法此外所测得的实验数据比较接近,表明RLS方法可普遍用来分析蛋白质与水溶性聚合物之间相互作用。     

酸性铬兰K-OP-牛血清白蛋白体系的共振瑞利散射及共振非线性散射光谱研究及应用

在pH 3.2的邻苯二甲酸氢钾-HCl缓冲液中,酸性铬兰K(ACBK)-OP与牛血清白蛋白(BSA)形成三元离子缔合物,导致共振瑞利散射(RRS)、二级散射(SOS)和倍频散射(FDS)的显著增强,光谱最大散射波长分别位于420,678和340nm。体系的光散射强度与BSA浓度在一定范围内呈线性增强,RRS在0~3.5 mg/L,SOS在0~3 mg/L,FDS在0~3 mg/L范围内对BSA的检出限分别为0.3,0.7和0.8μg/L,据此建立了测定BSA的共振线性(RRS)和共振非线性光散射(RNLS)分析法。以RRS法考察了酸性铬兰K-OP与白蛋白形成三元缔合物的适宜条件、影响因素等。方法可用于合成样品及血清样品中蛋白含量的测定。     

免疫共振散射光谱法测定痕量人血清前白蛋白

在pH 7.6的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲溶液中,羊抗人前白蛋白与前白蛋白发生特异性结合生成免疫复合物,导致体系的共振散射增强。体系在最大散射波长470 nm处,前白蛋白的质量浓度在0.067~2.82 mg.L-1范围内与共振散射增强强度(ΔI)呈线性关系,检出限(3S/N)为0.028 mg.L-1。应用于测定人血清前白蛋白,测定值相对标准偏差(n=6)在1.15%~3.00%之间。     

荧光光谱结合表面增强拉曼光谱法研究紫檀芪与人血清白蛋白相互作用

在模拟人体生理条件下,应用荧光光谱和表面增强拉曼光谱法研究了紫檀芪(PTE)与人血清白蛋白(HSA)之间相互作用机制.结果表明,HSA的荧光能被PTE静态猝灭,并伴随有非辐射能量转移作用,两者形成了1:1复合物,结合距离r=1.495 nm,结合常数KA=1.12×104(298 K)、4.07×104(304 K)和2.45×105 L/mol(310 K).表面增强拉曼光谱研究揭示,PTE分子通过甲氧基与HSA进行结合;热力学数据表明,二者间的作用主要为疏水作用;标记竞争实验指出PTE优先结合HSA的位点Ⅲ.三维荧光光谱、同步荧光光谱和表面增强拉曼光谱结果显示,与PTE作用后,HSA构象发生变化,导致色氨酸残基周围环境疏水性降低,但对PTE分子构象影响不大.     

刚果红与血清白蛋白相互作用的极谱分析

在pH4．7HAc-NaAc缓冲溶液中，刚果红与蛋白质(BSA或HSA)作用形成络合物，使刚果红-0．35V(vs SCE)的还原峰电流下降，峰电流的降低值同所加的BSA或HSA质量浓度在一定范围内呈线性关系；BSA和HSA的线性范围分别为0．5～12mg／L和0．5～11mg／L，检出限分别为0．25和0．20mg／L；运用该法测定了人血清白蛋白样品，结果令人满意。     

血清蛋白-荧光素复合物单扫极谱波与应用

在0．08mol／L的HAc中，荧光素与牛血清白蛋白(BSA)或人血清白蛋白(HSA)相互作用形成复合物。复合物使荧光素在-0．58V(vs．SCE)处的还原峰电流增大，峰电流的增大值与加入的BSA或HSA的浓度在一定的范围内呈线性关系。BSA在2—24μg／mL范围内呈线性关系，检出限为1μg／mL；HSA在2—22μg／mL范围里呈线性关系，检出限为0．8μg／mL。应用该法测定了人血清蛋白样品，结果令人满意。     

三维同步偏振荧光光谱研究蛋白质溶液变性时氨基酸残基的发光行为

将偏振技术、同步技术与三维技术结合起来的三维同步偏振荧光光谱(TDSPS)能分辨蛋白质溶液中的色氨酸(Trp)和酪氨酸(Tyr)残基,具有同步光谱分辨率高、三维技术信息丰富的优点．本文用TDSPS表征牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)受各种因素影响(酸效应、碱效应、盐效应、猝灭剂等)时Trp,Tyr残基荧光光谱的变化,用于区分HSA和BSA．     

芦丁金属配合物的合成、表征及与血清白蛋白的相互作用

本文合成了芦丁的过渡金属配合物，通过红外及元素分析等方法对其进行了表征。采用荧光光谱和紫外光谱法研究了芦丁的过渡金属配合物与牛血清白蛋白(BSA)和人血清白蛋白(HSA)的相互作用。通过二者的荧光光谱的变化，求得芦丁过渡金属配合物与血清白蛋白的结合常数。探讨了它们之间作用力的类型。     

Studies on Interactions of Antibiotics with Serum Albumin by Surface Plasmon Resonance Biosensor

Introduction Humanserumalbumin(HSA)isawell known transportproteinforavarietyofmoleculesandions[1].Thebindingofadrugtoserumalbuminhasimportant pharmacokineticconsequencesbecauseitinfluences distribution,excretionandpharmacologicaleffectsof thedruginthebody…     

可可碱与牛血清白蛋白作用光谱特性的研究

本文应用荧光光谱法研究了可可碱（TB）与牛血清白蛋白（BSA）相互作用的光谱特性。测定了18℃、30℃、40℃温度下的结合常数KA分别为1．68×10^4、1．58×10^4、1．45×10^4L／mol,结合位点数咒分别为1．04、1．03、1．03。实验结果表明：TB对BSA内源荧光的猝灭机理主要为静态猝灭;热力学参数探讨其相互作用机理,TB主要以静电力与BSA相互作用;研究了TB对BSA构象的影响,BSA的荧光主要源于色氨酸残基。同时研究了Cu^2＋存在下TB与BSA的相互作用。     

Determination of serum albumin in the presence of poly(diallyldimethylammonium chloride) by resonance light scattering technique

By means of the resonance light scattering (RLS) technique, a new method was developed to determine the bovine serum albumin (BSA) and human serum albumin (HSA) by the interaction of serum albumin with poly(diallyldimethylammonium chloride) (PDDA). At Tris-NaOH buffer solution, the RLS intensity of serum albumin at the wavelength 320, 550 and 590 nm was obviously enhanced in the presence of PDDA. The influences of some experimental factors, including incubation time, addition sequence of reagents, pH value, concentration of PDDA and foreign substances, on the enhancement of the RLS intensity were examined. The optimum conditions of the experiment were selected. Under the selected experimental condition, the enhanced RLS intensities were directly proportional to the concentrations in the range of (0.0250-2.75)x10(-6) mol/L for BSA and (0.0235-1.17)x10(-6) mol/L for HSA. The detection limits (S/N=3) were 8.40x10(-9) mol/L for BSA and 7.39x10(-9) mol/L for HSA. The synthetic samples were analysed and the results obtained were satisfactory.     

毛细管电泳应用于测定牛血清白蛋白与脂质体的相互作用

建立了一种用毛细管电泳法检测牛血清白蛋白(BSA)与脂质体相互作用的分析方法。氧化指数的测定实验结果表明经过冷冻干燥的脂质体稳定性更好;毛细管电泳表征脂质体的电荷性质实验结果表明脂质体在pH 5.0～8.0的条件下呈电中性。在pH 7.0的条件下,以各种浓度的脂质体混悬液为电泳缓冲液,以0.8%二甲亚砜(DMSO)为内标,随着缓冲液中脂质体质量浓度从0增加到2.4 mg/mL,BSA的有效淌度从-2.232×10-4 cm2·V－1·s－1变化到-3.046×10-4 cm2·V－1·s－1;结合Scatchard分析,测得BSA与脂质体的结合常数为2.522×103(g/mL)－1。该方法简单、快速,为研究蛋白质与脂质体的相互作用提供了新的技术手段。     

A study of intramolecular H-complexes of novel bis(heptamethine cyanine) dyes

Near-infrared (NIR) bis(heptamethine cyanine) (BHmC) dyes containing a flexible polymethylene linker between the two cyanine subunits are a novel class of compounds with versatile spectroscopic properties. The first bis-cyanine of this type is BHmC-10 (with a decamethylene bridge) that has been reported by us recently [G. Patonay, J.S. Kim, R. Kodagahally, L. Strekowski, Appl. Spectrosc., in press]. As part of this work, additional bis-cyanines BHmC-4, BHmC-6, and BHmC-8 were synthesized and their spectral properties were evaluated for the dyes free in solution and in the presence of human serum albumin (HSA). These bis-cyanines undergo H-type aggregation, mainly H-type intramolecular complexation between the two cyanine subunits, when free in aqueous solution. This H-type interaction in phosphate buffer (pH 7.2) is characterized by hypsochromic (H) absorption at 700 nm, low extinction coefficient, and low fluorescence quantum yield. By contrast, an analogous monomeric cyanine exhibits strong fluorescence under similar conditions. Upon binding with HSA, the fluorescence of BHmC-6 changes negligibly, that for BHmC-8 shows a slight increase, and the fluorescence of BHmC-4 is greatly increased. It is suggested that BHmC-4 binds with HSA in the open form exclusively, while the H-type intramolecular interaction in BHmC-6 is mostly retained in the complex with HSA. Bis-cyanine BHmC-4 may be of significant bioanalytical utility due to its negligible fluorescence in aqueous solution and a strong increase in fluorescence upon binding with a protein.     

硫酸长春碱与牛血清白蛋白相互作用的研究

本文利用荧光光谱法和紫外吸收光谱法研究了硫酸长春碱（Vinblastine Sulfate,VS）与牛血清白蛋白（Bovine Serum Albumin,BSA）的相互作用,讨论了药物与蛋白相互作用时药物对蛋白微环境的影响。求得不同温度下（298K、308K和318K）药物与蛋白相互作用的结合常数及结合位点数。利用F6rster能量转移理论得药物与蛋白间的键合距离为3.34nm。热力学参数（△H=14.34kJ／mol,△S=36.92J／（mol·K））表明维持药物与蛋白质的相互作用力主要是疏水作用和静电作用。此外,基于硫酸长春碱的荧光猝灭效应,探讨了药物-蛋白质体系的几种物理化学参数包括电荷密度、离解常数及量子产率的变化效应;以及共存离子对药物-蛋白质体系结合常数的影响。