白花蛇舌草免疫多糖结构的研究

白花蛇舌草(Hedgotis diffusa willd)系茜草科(Rubiaceae)耳草植物,民间常用此草内服治疗小儿疳疾、毒蛇咬伤、癌肿及肠道疾病,外用治疗各种疮疥及跌打刀伤等症.本文首次报道从白花蛇舌草水溶性成份中分离得到一个具有免疫活性的多糖,并对它的结构进行了初步的探讨.     

滇产白花蛇舌草无机元素分析研究

通过测定云南不同产区白花蛇舌草中无机元素,绘制无机元素指纹图谱,对不同产区白花蛇舌草无机元素进行系统分析,为滇产白花蛇舌草的质量控制奠定基础。采用微波消解ICP-MS法测定白花蛇舌草中12种无机元素,建立无机元素对照指纹图谱,通过夹角余弦值法、系统聚类分析、主成分分析和因子载荷矩阵分析。结果显示白花蛇舌草中Sr,Ti、B、Ni,这4种元素占所测定12种元素的93.96%。不同产地白花蛇舌草中各元素呈相似的分布态势。V、Sn、Sb、Ti、Al、Co、B元素是不同产区白花蛇舌草中的特征元素。通过建立滇产白花蛇舌草无机元素指纹图谱,分析不同产地间白花蛇舌草无机元素含量,为白花蛇舌草无机元素方面的质量特征研究及质量控制研究奠定基础。     

白花蛇舌草中黄酮、多酚、多糖提取工艺及抗氧化研究

本研究利用水浴-回流法提取,分光光度法分析了云南不同产地白花蛇舌草样品中黄酮、多酚、多糖含量;同时,分别研究了不同乙醇体积分数、液料比、提取温度、时间对样品中这3类物质提取效率的影响;此外,利用清除DPPH·自由基的方法,分析了提取液的抗氧化活性,以期为白花蛇舌草资源的利用提供理论和实践指导。结果表明,白花蛇舌草中这3类物质最佳提取条件为乙醇体积分数60%、液料比1:35、温度80℃、时间2. 5 h;不同产地23个样品提取液抗氧化活性IC_(50)(DPPH半数清除率浓度)在0. 18～0. 58 mg·mL~(-1)之间,平均值为0. 35 mg·mL~(-1);相关性分析表明,这些样品中黄酮、多酚含量和IC_(50)值之间呈极显著负相关,相关系数分别为-0. 852和-0. 886(p0. 01),多糖含量与IC_(50)无显著相关性。以上结果表明,水浴-回流法可同时提取白花蛇舌草中黄酮、多酚、多糖三类物质;不同产地样品中这3类物质含量存在差异,这可能与生态因素不同有关;白花蛇舌草中最主要的抗氧化活性物质为黄酮和多酚。     

微波消解样品-火焰原子吸收光谱法测定白花蛇舌草中微量元素

提出了火焰原子吸收光谱法测定白花蛇舌草中微量铁、铜、锌、镁、钙、锰的含量.采用浓硝酸、高氯酸和过氧化氢(体积比8:1:2)混合液对样品进行消解.测定钙、镁时,加入二氯化锶,以消除共存物的干扰.用6种元素的标准溶液制作了各自的标准曲线,所得线性回归方程的相关系数在0.986 9～0.999 6之间.在白花蛇舌草样品的基础上,加入一定量6种元素的标准溶液作回收率试验,得回收率在98%～101%之间.     

串联固相萃取法选择性富集白花蛇舌草中的环烯醚萜苷类成分

研究了从白花蛇舌草水提取物中选择性富集环烯醚萜苷类成分的方法。该方法采用硅胶基质的寡聚乙二醇(OEG,实验室自合成)和ODS两种填料依次作为固定相,对白花蛇舌草水提醇沉样品进行固相萃取,并以超高效液相色谱(UPLC)系统对在富集的各个阶段得到的产物进行了色谱表征。实验结果表明,采用该方法得到的终产物的产率为8.21%。从UPLC谱图中可以看出固相萃取环烯醚萜苷类成分选择性富集的过程。终产物中14种典型的环烯醚萜苷类化合物含量明显升高,可达白花蛇舌草水提物的6.1倍,回收率为50.1%,富集效果明显。因此,将白花蛇舌草水提物醇沉后依次经过OEG柱与ODS柱的串联固相萃取可选择性地富集环烯醚萜苷类成分。该方法操作步骤较少,操作简便,选择性好,提取效率较高,富集效果明显。     

反相高效液相色谱法测定不同产地白花蛇舌草中的对香豆酸

用反相高效液相色谱法对不同产地的白花蛇舌草中对香豆酸的含量进行了测定。色谱柱采用DiamonsilTM ODS柱(4.6 mm i.d.×250 mm, 5 μm),流动相为乙腈-20 mmol/L NH4Ac(pH 4.0)(体积比为15∶85),流速1.0 mL/min,柱温为室温,检测波长为308 nm。在上述条件下测得对香豆酸的质量浓度为4.04～202 mg/L时与色谱峰面积之间线性关系良好(r＝0.9996),高中低浓度条件下的平均回收率为97.4％~102.2%。该方法快速简便,精密度高,重现性和准确度良好,可以作为白花蛇舌草质量控制的一个有效方法。     

ICP-MS法分析白花蛇舌草中16种无机元素初级形态

应用电感耦合等离子体质谱技术(ICP-MS),分析了白花蛇舌中16种无机元素的初级形态;并研究了微波辅助萃取、超声辅助萃取、恒温水浴萃取三种萃取方式对其溶出特性的影响。结果显示:白花蛇舌草中含有丰富的无机元素,这可能促进其有效成分作用的发挥。除Cu、Se外,其它元素的微波萃取的萃取效率最高;Mg、K、Ca、Mn、Ni、Se、Ba的溶解态含量较高,其他元素主要以悬浮态的形式存在于溶液中。     

特征图谱结合模式识别方法在半边莲质量控制中的应用

采用高效液相色谱法对全国各产地的半边莲药材样品和半边莲饮片样品进行分析,建立半边莲的特征图谱,确定半边莲有5个共有特征峰,1号峰和3号峰分别为香叶木苷和蒙花苷,可将蒙花苷峰作为参照物峰。成功地采用正交偏最小二乘法-判别分析对特征图谱进行了拟合建模,香叶木苷和蒙花苷对半边莲药材和半边莲饮片的分类贡献较大。香叶木苷和蒙花苷的质量在一定范围内与其对应的色谱峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)依次为0.030 4,0.031 8mg·L~(-1)。香叶木苷和蒙花苷的加标回收率依次为97.7%,100%,测定值的相对标准偏差(n=6)依次为1.3%,2.5%。方法用于半边莲药材样品和半边莲饮片样品的分析,半边莲药材中香叶木苷和蒙花苷的含量均高于半边莲饮片中香叶木苷和蒙花苷的含量。     

HPLC法同时测定白花蛇舌草中对香豆酸和熊果酸的含量

建立高效液相色谱法同时测定白花蛇舌草药材中对香豆酸和熊果酸含量的方法。采用Eclipse SB–C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇–0.05%甲酸梯度洗脱,流量1 m L/min,对香豆酸和熊果酸的检测波长分别为310 nm和210 nm,柱温30℃。对香豆酸和熊果酸含量分别在0.001 79~0.028 64 mg/m L和0.021 3~0.340 8 mg/m L范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系,线性相关系数r分别为0.999 8,0.999 6。对香豆酸和熊果酸的平均加标回收率分别为98.59%,98.23%,测定结果的相对标准偏差分别为0.81%,0.94%(n=6)。样品溶液在24 h内稳定。该方法适用于白花蛇舌草药材中对香豆酸和熊果酸的含量测定。     

反相高效液相色谱法测定七种中药中齐墩果酸

首次用反相高效液相色谱法分离并测定了地肤子、连翘、牛膝、泽兰、白花蛇舌草、夏枯草、柿蒂七种中药中的齐墩果酸。建立了中药中齐墩果酸分离、测定的色谱方法。色谱条件：ＯＤＳ柱，甲醇＋水（９０＋１０）为流动相，紫外检测器检测波长２０７ｎｍ。本研究为扩大中药及植物中齐墩果酸药物资源的开发提供了简便、灵敏、准确的分离测定方法。