基于单胺类神经递质代谢谱研究姜黄和郁金的寒热药性差异

为了研究姜黄、郁金寒热药性差异,采用HPLC-MS建立了大鼠脑中7种儿茶酚胺类物质的分析方法,对寒、热证候模型,及姜黄、郁金干预后相应模型中大鼠脑中儿茶酚胺类代谢物进行了分析。试验数据采用主成分分析（PCA）进行处理,采用t检验判别主要差异代谢产物。结果表明：大鼠脑中儿茶酚胺类成分与寒、热因素存在相关性,主成分得分图（PCA Scatter Plot）可以清楚的把寒、热模型和正常对照组进行区分,主要差异代谢物为E,3-MT,5-HT;姜黄对寒证模型的作用较为明显,模式识别可以区分二者,主要差异代谢物为E、3-MT,说明了姜黄具有温性药性的性质;郁金、姜黄对热证模型均有一定作用,但郁金的作用强于姜黄,主要差异代谢物为E、3-MT、5-HT、DOPAC。     

姜科姜黄属植物有效成分的研究

研究不同产地姜科姜黄属植物挥发油的化学成分,了解不同产地姜科姜黄属植物挥发性成分的差别,为控制其药材质量提供理论依据。采用水蒸气蒸馏法提取不同产地姜科姜黄属植物的挥发油,用气相色谱—质谱联用仪对其进行分离测定,结合计算机检索对分离的化合物进行结构鉴定,应用色谱峰面积归一化法测定各成分的相对百分含量。结果发现,不同产地姜科姜黄属植物的水蒸气蒸馏提取物得率在0．20％～2．13％之间,分别鉴定出24～40个化学成分。不同品种、不同产地姜科姜黄属植物的挥发油含量和其所含成分有较大差别,文献报道的某些有效成分如莪术酮、莪术二酮、莪术醇和表莪术酮在某些供试品中未检测到。实验中10个供试品药材中挥发性成分主要为单萜类及倍半萜类化合物及其衍生物,倍半萜类化合物的百分含量(44．57％～88．65％)明显高于单萜类化合物的百分含量(1．63％～26．69％)。     

基于超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱的非靶向代谢组学用于不同来源单花蜜的差异分析

不同的蜜源植物具有结构多样的次生代谢产物。该研究以8种不同蜜源单花蜜(洋槐蜜、枣花蜜、荆条蜜、椴树蜜、荞麦蜜、麦卢卡蜜、枸杞蜜、益母草蜜)为研究对象,建立了基于超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱技术(UPLC-Q-TOF-MS^E)的非靶向代谢组学方法,考察了不同蜜源中次生代谢产物的差异。该研究采用固相萃取前处理方法和UPLC-Q-TOF-MS^E方法,获得不同蜜源单花蜜的植物代谢组信息,并构建了多变量统计分析模型,对不同来源的单花蜜进行模式识别和差异分析,发现洋槐蜜、枣花蜜、荆条蜜、椴树蜜、荞麦蜜、麦卢卡蜜相互间存在不同程度的显著差异。结合模型的变量重要性投影、方差分析与最大差异倍数值,根据精确前体离子和碎片离子质量信息检索Chemspider、HMDB数据库,该研究筛选并鉴定出32个代谢差异化合物,其中黄酮类化合物18个、酚酸类化合物7个、苯苷与萜苷类化合物6个、甾体类化合物1个;研究发现麦卢卡蜜和荞麦蜜以黄酮类化合物为主要差异代谢物,荆条蜜中酚酸类化合物为特征性表达,苯苷与萜苷类化合物主要为椴树蜜的特征代谢物。该研究从植物代谢组学角度初步揭示了不同单花蜜的代谢产物差异性以及特征化合物,为基于化学分析技术的蜂蜜溯源识别与质量评价提供了有效的研究策略。     

高效液相色谱法结合化学计量学分析不同产地姜黄的指纹图谱

本文采用高效液相色谱法(HPLC)对来自于四川、广东和广西的68个姜黄样品进行质量控制方面的研究。通过高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)联用技术对姜黄样品中的部分姜黄素类化合物和倍半萜烯类化合物进行了鉴定。进而对所采集到的姜黄样品的HPLC指纹图谱进行主成分分析(PCA)。结果表明,姜黄样品按产地被很好的分成了三类,其所含化合物的含量与产地有关。通过建立偏最小二乘判别分析(PLSDA)、反传人工神经网络(BP-ANN)及最小二乘支持向量机(LS-SVM)这三种有监督模式识别模型对未知样品进行产地预报,结果表明,非线性模型BP-ANN和LS-SVM的预报结果优于线性模型PLS-DA的结果。本文提出的方法可用于姜黄或其他一些中药或食品的质量控制,且一般不需要对它们的组分做定量分析。     

代谢组学法分析骨髓抑制模型小鼠血清小分子代谢产物

骨髓抑制是恶性肿瘤患者化疗后常见的症状,研究骨髓抑制造成体内代谢产物的变化可以为诊断骨髓抑制病症发展状况及采用药物治疗提供思路。采用雄性BalB/C小鼠腹腔注射环磷酰胺建立骨髓抑制模型,通过气相色谱-质谱(GC-MS)对正常与造模小鼠血液代谢产物进行指纹图谱分析,然后采用主成分分析(PCA)和正交偏最小方差判别分析(OPLS-DA)对代谢组学数据进行多维统计分析。与对照组相比,骨髓抑制模型小鼠血浆中潜在的差异表达代谢标志物有15个,其中葡萄糖-1-磷酸、对硝基苯酚、乙酰苯胺、可的松、烟酰胺、马钱苷、咖啡酸、亚油酸和油酸这9种物质的表达差异有统计学意义(P0.05)。结果表明,代谢产物可作为骨髓抑制研究中的重要标记物,有助于揭示化疗所致骨髓抑制的发病机制,判断疾病发展阶段以及后续治疗手段的有效性。     

超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱分析不同加工何首乌中差异化学成分

建立了超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF-MS)结合多元统计分析技术对不同加工何首乌中化学成分差异的分析方法。何首乌样品采用甲醇在室温下超声提取后,采用UPLC-QTOF-MS进行分析,对采集的图谱通过峰匹配、峰对齐、滤噪处理等进行特征峰提取,然后用主成分分析(PCA)和偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)对数据进行分析。结果显示,不同加工何首乌样品间的化学组成存在显著性差异;根据一级质谱精确质荷比和二级质谱碎片信息,结合软件数据库搜索及相关文献进行成分鉴定,初步筛选并鉴定出33种不同加工何首乌间差异显著的化学成分,其中15种为共有差异化学成分,并呈现出不同的变化规律。研究结果可为揭示不同加工方法对何首乌代谢产物差异性的影响规律提供依据。     

微生物代谢组学的样品前处理

微生物代谢组学是指全面分析(定性和定量)细胞生长或生产周期某一时刻细胞内和细胞周围的所有低分子量代谢物.微生物代谢组学研究需要可靠和重现地分析细胞内较宽动力学浓度范围(nmol～mmol)、化学功能各异的代谢产物,因此,需要对从生物量培养、灭活和代谢产物的提取到代谢物的定量分析这整个实验过程提出耐用、可重现和可靠的实验方案.本文介绍了灭活过程中细胞内代谢产物泄漏的处理方法,较为详细地论述了通过灭活草案捕获代谢反应活性方法和代谢物提取方法的优化,并对微生物代谢组学样品前处理的目前发展趋势提出初步见解.     

嗜酸性氧化亚铁硫杆菌代谢产物的常压化学电离质谱分析

本研究以721矿和745矿嗜酸性氧化亚铁硫杆菌为研究对象,采用常压化学电离质谱直接分析其代谢产物,分别考察了顶空采样( Headspace sampling)、界面采样( Interface sampling)和中性解吸采样( Neutral desorption sampling)3种进样方式对电离效果的影响。在优化条件下,常压化学电离质谱对微生物纯菌种和混合菌种的代谢产物均具有良好的分析能力,可根据获得的代谢产物指纹谱图结合主成分分析( PCA)方法和聚类分析( CA)方法区分2个放射性强弱不同区域共4类嗜酸性微生物样品,并对主要胺类、酯类等代谢成分进行串联质谱鉴定,为耐辐射微生物的相关研究提供了一种可借鉴的分析方法。     

高效液相色谱-电化学阵列检测器检测烟草中的绿原酸等六种次生代谢产物

建立了一种利用反相高效液相色谱-电化学阵列检测器同时检测烟草中主要次生代谢产物的方法。在Hypersil BDS C-18(4.6 mm×200 mm)色谱柱上,以30 mmol/L磷酸二氢钠（pH 3.5）-5%~70%(体积分数)乙腈(含0.25 mmol/L十二烷基磺酸钠)进行梯度洗脱,流速为1 mL/min,柱温为30 ℃。电化学阵列检测器的检测电势依次为:-20,140,210,310,400,450,490,730,800,900 mV时,可以较好地分离和检测烟草中常见的次生代谢产物绿原酸、咖啡酸、对羟基肉桂酸、莨菪葶、芦丁和烟碱。该方法的相对标准偏差为0.71%～15.31%,回收率为52.0%～85.2%,各种次生代谢产物的检测限为0.2~2 ng;进样量在20～500 ng范围内呈现良好的线性关系,线性相关系数为0.9910～0.9998;具有较高的准确度和精确度。方法简便,可应用于烟草中次生代谢产物的检测。     

基于非靶向代谢组学的茄梨和红茄梨成熟期果皮代谢产物的差异分析

为了探究西洋梨品种茄梨及其红色芽变红茄梨成熟期果皮代谢产物差异,采用超高效液相色谱-质谱联用技术,对茄梨和红茄梨成熟期果皮进行非靶向代谢组学研究。通过主成分分析和正交偏最小二乘判别分析,构建了多变量统计分析模型,结合模型和变量重要性投影与最大差异倍数值,基于精确质量数、二级碎片以及同位素分布,使用PMDB(Plant Metabolome Database)数据库进行定性,筛选并鉴定出茄梨和红茄梨果皮中显著性变化(P<0.05, VIP(variable importance in project)≥1)的差异代谢物有83种,主要包括酚酸类、黄酮类和氨基酸类物质,涉及类黄酮代谢、氨基酸代谢、苯丙烷类代谢等代谢途径,其中53种物质含量上调,30种物质表达下调。通过KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)数据库进一步对差异代谢物质进行通路富集分析,差异代谢物主要分布在20条代谢途径中,P<0.05的代谢途径有6条,分别是类黄酮生物合成、黄酮和黄酮醇生物合成、苯丙烷生物合成、丁酸酯代谢、苯丙氨酸代谢、酪氨酸代谢。这些差异代谢物的变化可能是导致茄梨和红茄梨果皮色泽不同的原因。该研究从植物代谢组学角度初步揭示了茄梨和红茄梨成熟期果皮的代谢产物差异性。     

反相高效液相色谱法同时测定姜黄药材中3个组分的含量

建立了一种反相高效液相色谱方法,同时测定中药材姜黄块根中3组分的含量。采用KromasilTMC18柱(5μm,200mm×4.6mm),以磷酸水溶液(pH=2.5)和乙腈溶剂为流动相,梯度洗脱,流速0.9mL/min,柱温40℃,检测波长为425nm,10min内即可将3种组分分离测定。该方法快速、简便、准确,可为评价不同产地的姜黄质量提供依据。     

Spectroscopic studies on the molecular interactions of curcumin and piperine

Monatshefte für Chemie - Chemical Monthly - The diarylheptanoid curcumin is the yellow coloring agent accumulated in the rhizome of the common spice turmeric (Curcuma longa L.). It has...     

郁金药材中姜黄素类成分含量测定方法研究

开展了郁金药材中姜黄素类成分的含量测定的研究,确立了姜黄素的优化提取条件,建立了姜黄素的高效液相色谱含量测定方法。通过筛选,发现以60％乙醇回流,15倍药材溶剂量,提取时间1h,提取次数1次对姜黄素的提取较完全。姜黄素在0．0265～0．2648μg范围内线性关系良好。精密度、稳定性和重复性的RSD均小于2％,平均加标回收率为99。73％,RSD为1．41％。     

In vitro enzyme inhibition activities of crude ethanolic extracts derived from medicinal plants of Pakistan

Twenty two crude ethanolic extracts from 14 indigenous medicinal plants were subjected to enzyme inhibition screening against acetylcholinesterase (AChE), butyrylcholinesterase (BChE) and lipoxygenase enzymes (LO). Three extracts showed activity against AChE, nine extracts were found to be active against BChE and four extracts inhibited the enzyme LO. The most significant inhibition activities (> or =50%) were found in extracts derived from Aloe vera (leaves), Alpinia galanga (rhizome), Curcuma longa (rhizome), Cymbopogon citratus (leaves), Ocimum americanum (leaves), Ocimum americanum (stem) and Withania somnifera (roots).     

郁金药材中姜黄素类成分含量测定方法研究

为开展郁金药材中姜黄素类成分的研究,确立了姜黄素的优化提取条件,建立了姜黄素的高效液相色谱含量测定方法。结果表明,以60%乙醇回流,15倍药材溶剂量,提取时间1 h,提取次数1次对姜黄素的提取较完全;姜黄素在0.02648~0.26480μg范围内线性关系良好;精密度、稳定性和重复性的RSD均小于2%,平均加样回收率为99.73%,RSD为1.41%。     

高效液相色谱-串联质谱法分析姜黄中微量的姜黄素类化合物

建立了同时检测中药姜黄中3种微量的姜黄素类化合物的高效液相色谱-电喷雾串联质谱分析方法。姜黄根茎经乙醇超声提取后,无需其他处理可直接进样分析。以Microsorb C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)分离,乙腈和0.1%甲酸水梯度洗脱,在多反应监测模式(MRM)下对目标成分进行定性分析。利用质谱碎裂规律,分别对每个目标成分同时监测8个母离子/特征子离子对的反应过程,首次从姜黄中发现了3个微量的姜黄素类化合物成分。一次性完成了目标成分的同时定性,方法的检出限为0.2 μg/L。结果表明,该方法具有简便、快速、准确、灵敏度高的优点,适用于中药复杂体系中姜黄素类化合物的分析检测。     

The core structure of ukonan A, a phagocytosis-activating polysaccharide from the rhizome of Curcuma longa, and immunological activities of degradation products.

The controlled Smith degradation of ukonan A, a phagocytosis-activating polysaccharide isolated from the rhizome of Curcuma longa L., was performed. The reticuloendothelial system-potentiating, anti-complementary and alkaline phosphatase-inducing activities of ukonan A and its degradation products were investigated. Methylation analyses of both the primary and the secondary Smith degradation products indicated that the core structural features of ukonan A include a backbone chain mainly composed of beta-1,3-linked D-galactose, beta-1,4-linked D-xylose and alpha-1,2-linked L-rhamnose residues. All of the galactose units in the backbone carry side chains composed of alpha-L-arabino-beta-D-galactosyl or beta-D-galactosyl residues at position 6. Ukonan A has a remarkable effect on each of the three kinds of immunological activities. Periodate oxidation caused pronounced decrease or disappearance of the activities, but the controlled Smith degradation product having the core structure of polysaccharide showed considerable restoration of these activities.     

Fast determination of curcumol, curdione and germacrone in three species of Curcuma rhizomes by microwave-assisted extraction followed by headspace solid-phase microextraction and gas chromatography-mass spectrometry

Curcumol, germacrone and curdione are the main active ingredients in a common traditional Chinese medicine (TCM) of Rhizoma Curcuma, and commonly used as the TCM quality control markers. In the present work, microwave-assisted extraction (MAE) followed by headspace solid-phase microextraction (HS-SPME) and gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) was developed for the quantitative analysis of curcumol, curdione and germacrone in Rhizoma Curcuma. The MAE and HS-SPME parameters were studied, and the method was validated. The optimal MAE conditions obtained were: microwave power of 700 W and irradiation time of 4 min, and HS-SPME optimal conditions were: fiber coating of 100 microm PDMS, extraction temperature of 80 degrees C, extraction time of 20 min, stirring rate of 1,100 rpm, and salt concentration of 30% NaCl. The proposed method provided good precision (RSD less than 12%) and recoveries between 86% and 93%. The proposed method was applied to the determination of the three marker compounds in three species of Curcuma rhizomes (Curcuma wenyujin, Curcuma phaeocaulis, and Curcuma kwangsiensis). To demonstrate the proposed method reliability, a conventional technique of steam distillation was also used for the analysis of curcumol, germacrone and curdione in the TCMs. The results show that MAE-HS-SPME is a simple, rapid, solvent-free and reliable method for the determination of curdione, curcumol and germacrone in TCM, and also a potential and powerful tool for quality assessment of Rhizoma Curcuma.     

中空纤维支载离子液体液液微萃取法检测环境水体中的三氯生

三氯生(5 Chloro-2-(2,4-dichlorophenoxy) phenol,TCS)是一种新型环境水体污染物,具有潜在的生态与健康风险,因此发展合适的分析方法来检测水环境中这类化合物极其必要.本研究以1-辛基-3-甲基咪唑六氟磷酸离子液体( [C8 MIM][PF6])为萃取剂,基于中空纤维的离子液体液液微萃取方法,结合HPLC/UV用于环境水样中TCS的分析测定;通过对各参数(萃取剂、供体相的体积、供体相pH值、离子强度、萃取时间等)的优化在最优条件下(样品相体积为50 mL,pH值2,盐浓度为0.2 mol/L,200 r/min振荡萃取8 h),获得了较高的富集倍数(907倍)、较低的检出限(0.05 μg/L,RSD=7.4％,n=6)和较好的线性范围(0.1～100 μg/L);以4种环境水样加标实验对方法的准确性进行评估,其回收率可达94.2％～108.5％(RSD=5.5％～8.0％,n=6);本方法可广泛应用于环境水体中痕量TCS的分析检测.     

Free radical scavenging activity and characterization of sesquiterpenoids in four species of Curcuma using a TLC bioautography assay and GC-MS analysis

The sesquiterpenoids are one of major groups of antioxidants in Curcuma besides curcuminoids. However, the real substances contributing to the antioxidant activity are still unknown. In this paper, the antioxidant activity of sesquiterpenoids in four species and two essential oils from Curcuma genus was determined and compared based on TLC separation and DPPH bioautography assay. Their antioxidant capacities were quantitatively evaluated using densitometry with detection at 530 nm (λ(reference )= 800 nm) using vitamin C as reference. The results showed that Curcuma longa rhizomes had the highest antioxidant capacity while C. phaeocaulis presented the lowest one among the four species of Curcuma. Moreover, essential oil of C. wenyujin showed higher antioxidant potential than that of C. longa. The main TLC bands with antioxidant activity of the four species of Curcuma were collected and characterized using GC-MS, and thus curzerene, furanodiene, α-turmerone, β-turmerone and β-sesquiphellandrene were determined as major sesquiterpenoids with antioxidant activity in Curcuma.