氯化血红素模拟过氧化物酶高效液相色谱柱后衍生法测定过氧化氢和 …

研究了氯化血红素（Ｈｅｍｉｎ）模拟辣根过氧化物酶（ＨＲＰ），对羟基苯乙酸（ＰＨＰＡＡ）作底物，高效液相色谱（ＨＰＬＣ）柱后衍生物荧光法测定Ｈ２Ｏ２和水溶性有机过氧化物的方法，采用Ｈｅｎｍｉｎ作催化剂柱后衍生反应的最佳ｐＨ值约为１１，与荧光检测ｐＨ值一致，使得以往ＨＰＬＣ柱后衍生方法所需要的高压泵认３台减少到２台，而一些不能作为ＨＲＰ底物的羟烷基过氧化物在ｐＨ值≥１０的溶液中迅速水解为Ｈ２Ｏ２从而得     

过氧化物模拟酶催化的苯基荧光酮氧化反应及其分析应用

在ＮＨ４Ｃｌ－ＮＨ４ＯＨ缓冲介质中，氯化血红素（Ｈｅｍｉｎ）有显著的过氧化物模拟酶活性，催化过程化氢氧化苯基荧光酮褪色。本文探讨了反应机理，比较Ｈｅｍｉｎ与天然酶催化性能，考察反应条件和共存物质影响，从而提出测定Ｈｅｍｉｎ和过氧化氢的高灵敏分光光度法，线性范围分别为０￣３．０×１０＾－８ｍｏｌ／Ｌ和０￣１．２×１０＾５ｍｏｌ／Ｌ；检测限（３σ）分别为１．８×１０＾－１０ｍｏｌ／Ｌ和１．４×１０＾７     

过硫酸钾存在下人血清白蛋白的极谱平行催化氢波及其应用

报道 Ｋ２Ｓ２Ｏ８存在下人血清白蛋白（ＨＳＡ）的极谱平行催化氢波。在 ０．４ ｍｏｌ／Ｌ　ＮＨ３－ＮＨ４Ｃｌ（ｐＨ ８．５８）－０．０１ ｍｏｌ／Ｌ Ｋ２ｓ２Ｏ８支持电解质中，ＨＳＡ产生一个平行催化氢波，峰电位为－１．８５ Ｖ（ｖｓＡｇ／ＡｇＣｌ）。该平行催化氢波二阶导数峰电流与 ＨＳＡ浓度在 ２．６ × １０－９～９．６ × １０－９ｍｏｌ／Ｌ范围呈线性关系。用于人血清样和尿样中ＨＳＡ的测定，结果满意。     

增强辣根过氧化物酶催化鲁米诺化学发光反应的新型增强剂四苯硼钠

报道了新型增强剂四苯硼钠对过氧化物酶催化鲁米诺－过氧化氢发光反应的增强作用，建立了流动注射化学发光测定或辣过氧化物酶（ＨＲＰ）的新体系。用该体系测定ＨＲＰ线性范围为１．０×１０－１２×１．２×１０－１３ｍｏｌ／Ｌ；检测限为０．６×１０－１３ｍｏｌ／Ｌ。对０．６×１０－１３ｍｍｏｌ／Ｌ的 ＨＲＰ进行１１次平行测定，相对标准偏差为 １． ５％。     

催化库仑法测定天然水中硫化物

催化库仑法测定天然水中的硫化物表明，在０．０２ｇ／ｍＬＮａＮ＿３、０．１ｍｏｌ／ＬＫＩ、０．２ｍｏｌ／Ｌ（ＣＨ＿３ＣＯＯ）＿２Ｚｎ、０．０７５ｍｏｌ／ＬＣＨ＿３ＣＯＯＮａ及适量ＨＡｃ的库仑滴定体系中，利用碘－叠氮化钠诱导反应，可测定水中的痕量、超痕量硫化物。当滴定溶液ｐＨ＝６．０，温度控制在２０±０．２℃，在铂电极上以微小恒电流电解产生碘为库仑滴定剂，双铂电极安培法指示终点测定硫化物的灵敏度可达１０￣（－９）或更低的数量级。此法用于测定天然水中痕量硫化物，结果满意。     

四磺基铁酞菁做为过氧化物模拟酶在过氧化氢及葡萄糖测定中的应用

以四磺基铁酞菁（ＦｅＴＳＰｅ）作为过氧化物模拟酶催化Ｈ２Ｏ２与Ｌ－酪氨酸的荧光反应,建立了测定宽含量范围的Ｈ２Ｏ２及葡萄糖的方法。该法的线性范围为０．０－８．０×１０＾５ｍｏｌ／Ｌ,Ｈ２Ｏ２及０．０￣２．０×１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ葡萄糖,检测限分别为５．０×１０＾－８ｍｏｌ／Ｌ及６．０×１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ,将该经酶催化反应偶联,测定人血清中葡萄糖的含量,取得了满意的结果。     

应用示波极谱吸附波测定药物中锗

在ｐＨ２～６的硫酸介质中，锗（Ⅳ）、锑（Ⅲ）和钼（Ⅵ）形成三元杂多酸，此三元杂多酸在０．２４ｍｏｌ／Ｌ的Ｈ２ＳＯ４中能迅速在滴汞电极上还原而产生灵敏的极谱电流，其峰电位为－０．３５Ｖ（ｖｓ，ＳＣＥ），测定下限是２×１０＾－９ｍｏｌ／Ｌ。用药用进行加标准回收实验，误差在１０％之内，满足微量分析的要求。     

1-(2-噻唑偶氮)-2-萘酚螯合物反相高效液相色谱法分离测定铜(Ⅱ)、铁(Ⅱ)和镍(Ⅱ)

以１－（２－噻唑偶氮）－２－萘酚（ＴＡＮ）作柱前显色剂，于ＯＤＳ柱上，用内含０．１ｍｏｌ／ＬＬｉＣｌ，５×１０－６ｍｏｌ／Ｌ ＴＡＮ和ＨＡｃ－ＮＨ４Ａｃ缓冲溶液（ｐＨ ５．５）的甲醇－水溶液（８０：２０，Ｖ／Ｖ）作流动相，流速为０．６ｍＬ／ｍｉｎ，并以紫外－可见检测器于５９０ｎｍ处进行检测，发展了一种ＲＰ－ＨＰＬＣ法同时分离测定铜（Ⅱ）、铁（Ⅱ）、镍（Ⅱ）的方法，方法灵敏度高，对于铜、铁、镍的检测限分别为１μｇ／Ｌ， ２ μｇ／Ｌ和 ０．４ μｇ／Ｌ。用于实际样品测定，结果满意。     

高效液相色谱法同时测定血清中肌酸、尿酸和肌酐

报道了快速、简便同时测定血清中肌酸，尿酸和肌酐的ＨＰＬＣ法．以０．０２ｍｏｌ／ＬＫＨ２ＰＯ４（ｐＨ６．５）为流动相，三种物质可在２ｍｉｎ内分离，检出限分别为：肌酸０．６９μｇ／ｍＬ，尿酸０．２１μｇ／ｍＬ，肌酐０．１０μｇ／ｍＬ．     

溶出伏安法测定水中痕量钴

在０．０１ｍｏｌ／ＬＮＨ．Ｈ２Ｏ－ＮＨ４Ｃｌ和３．０×１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ安息香缩氨基硫脲体系中，钴产生一灵敏的还原波，其峰电位是－０．９４Ｖ（ｖｓ．ＳＣＥ），峰电流与钴的浓度在２．０×１０－８－１．０×１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ范围内成直线关系，检测限为５．０×１０＾－９ｍｏｌ／Ｌ，该法测定水中痕量钴结果令人满意。     

高效液相色谱-荧光检测法测定环境样品中的过氧化物

对高效液相色谱-荧光检测法测定过氧化氢和有机过氧化物的方法进行了改进,从而提高了方法的检测灵敏度。以氯化血红素(hemin)作催化剂进行柱后衍生反应,过氧化物将对羟基苯乙酸氧化生成能吸收荧光的二聚物,然后用荧光检测器检测。实验确定了最佳反应管温度和荧光检测波长。应用该法测定了大气和雨水样品中过氧化物的浓度。     

基于纳米金自组装膜固定辣根过氧化物酶的生物传感研究

将辣根过氧化物酶(HRP)通过纳米技术和自组装技术固定于电极表面,制得了酶修饰电极.纳米金与HRP形成了静电复合物并高效地保持了HRP的生物活性,以对苯二酚作为电子媒介体,差示脉冲伏安法(DPV)研究生物酶电极测定H2O2的线性范围为5.0×10-6～1.0×10-3 mol/L,检测限为2.5×10-6 mol/L,线性方程为△I=0.34765+4.05553CH2O2(mM).酶电极的表观米氏常数(K(app))为0.0675 mmol/L.实验同时证明该生物酶电极具有良好的稳定性和使用寿命.     

高灵敏检测葡萄糖的新型荧光纳米传感器

构建了一种用于高灵敏检测葡萄糖的新型荧光纳米传感器.在辣根过氧化物酶(HRP)的催化下,H2O2氧化3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB),生成具有强吸光性质的TMB多聚体,导致1-氧-1H-非那烯-2,3-二腈(1-Oxo-1H-phenalene-2,3-dicarbonitrile, OPD)分子的荧光发生淬灭,基于此实现H2O2的定量检测,线性范围分别为0.05~0.80 μmol/L和1~10 μmol/L,检出限(3σ)为0.02 μmol/L.由于葡萄糖氧化酶(Gox)可催化葡萄糖分解产生H2O2,基于此可以实现葡萄糖分子的定量检测,线性范围分别为0.1~3.0 μmol/L和4.0~30 μmol/L, 检出限(3σ)为0.02 μmol/L.将本方法用于实际血清样品中葡萄糖的定量检测,结果与临床检测结果相符.     

流动注射胶束电化学发光测定过氧化氢的研究

建立了一种简易、快速检测过氧化氢的流动注射电化学发光法。本法基于铂丝阳极在 1.3 V(vs.Ag Cl/Ag)时 ,在含有 Na2 CO3 -Na HCO3 缓冲溶液的 KCl支持电解质中现场产生试剂 ,当注入过氧化氢溶液后即产生电化学发光。加入 Triton X-10 0形成的胶束能增强这一体系的发光强度。该法测定过氧化氢的线性范围为 1.0×10 -7～ 1.0× 10 -5 mol/L,对 4.0× 10 -7mol/L的过氧化氢进行 11次测定的相对标准偏差为 2 .6%。用这一方法对雨水中的过氧化氢进行了测定 ,结果满意。     

基于SiO2纳米粒子固定辣根过氧化物酶的生物传感器

制备了尺寸均一的SiO2纳米粒子(60nm),并将其用于固定辣根过氧化物酶.以儿茶酚为电子媒介体制得的H2O2传感器的检测范围为1.7×10-7～1.9×10-5mol/L,检出限为8.3×10-8mol/L.达到95%稳态电流所用时间少于10s.该传感器的米氏常数为7.8μmol/L,表明所固定的酶具有较高的生物活性.     

基于石墨烯-壳聚糖-辣根过氧化物酶的H2O2生物传感器的研制

制备了石墨烯-壳聚糖(GR-CS)纳米复合材料,并将之与辣根过氧化物酶(HRP)混合,构建了基于石墨烯-壳聚糖-辣根过氧化物酶的生物传感器(GR-CS-HRP/GC)。探针及循环伏安研究表明,该界面具有优异的电子传导能力、较大的比表面积和良好的生物相容性,对H2O2的还原显示出较好的电催化活性,在工作电位为-0.2 V,0.05 mol/L的磷酸盐缓冲盐溶液(PBS,pH 6.8)中,该酶传感器对过氧化氢响应灵敏度高,检测范围宽,测定H2O2的线性范围为5.0×10-7～2×10-3mol/L(相关系数为0.998)。检出限为2.0×10-7mol/L(S/N=3)。并且表现出良好的稳定性和高选择性。该电极用于实际样品中H2O2的测定,结果令人满意。     

Study of carbon nanotubes-HRP modified electrode and its application for novel on-line biosensors

In this paper, multi-walled carbon nanotubes (MWCNTs) were successfully immobilized on the surface of a glassy carbon electrode by mixing with horse-radish peroxidase (HRP). The electrochemical behavior of H2O2 was also studied with the MWCNTs-HRP modified electrode as a working electrode. The MWCNTs-HRP modified electrode showed excellent response of reduction current for the determination of H2O2 at the potential of -300 mV (vs. Ag/AgCl). We assembled the MWCNTs-HRP modified electrode in a thin-layer flow cell and the H2O2 solution was continuously introduced into the cell with a syringe pump. We optimized the sensitivity of the H2O2 sensor by adjusting the working potential and the pH of the buffer solution. The peak current increased linearly with the concentration of H2O2 in the range 3.0 x 10(-7) to approximately 2.0 x 10(-4) mol L(-1). The detection limit is 1.0 x 10(-7) mol L(-1) (S/N = 3). The interferences from ascorbic acid, uric acid and other electroactive substances can be greatly excluded since the sensor can be operated at -300 mV. Stability and reproducibility of the MWCNTs-HRP chemically modified electrode were also studied in this paper. Fabricated with glucose and lactate oxidase, the MWCNTs-HRP electrode was also applied to prepare the on-line glucose and lactate biosensors because of the high sensitivity for the determination of H2O2.     

基于多壁碳纳米管增敏材料的辣根过氧化物酶分子印迹电化学传感器的制备及对H2O2的检测

以辣根过氧化物酶(HRP)为蛋白质模板分子, 邻苯二胺(o-PD)为聚合单体, 首先将预先羧基化的多壁碳纳米管(MWCNTs)通过阶跃电位法电沉积在玻碳电极上作为增敏材料, 然后在该电极上电聚合含HRP的邻苯二胺电沉积液形成一层聚合膜, 去除模板化合物后, 制得对HRP具有特异性识别能力的分子印迹聚合物(MIPs)膜; 利用聚邻苯二胺(POPD)的自探针效应构建了分子印迹电化学传感器. 该传感器的响应电流与HRP浓度在1.0×10 ^-10~1.0×10 ^-5 mg/mL范围内有良好的线性关系, 相关系数为0.991, 检出限为1.5×10 ^-11 mg/mL(S/N=3); 该传感器的响应电流与H₂O₂浓度在4.0×10 ^-7~1.4×10 ^-5 mol/L范围内有良好的线性响应, 相关系数为0.992, 检出限为2.6×10 ^-7 mol/L(S/N=3), 将该传感器用于实际样品H₂O₂的检测, 回收率在91.2%~97.1%之间. 建立了基于MIPs膜的HRP和H₂O₂双分析物传感器的制备方法, 该方法可应用于酶及其酶促底物双分析物传感器.     

流动注射-鲁米诺-高碘酸钾-过氧化氢体系的化学发光行为及其应用

详细研究了流动注射－鲁米诺－高碘酸钾－过氧化氢体系化学发光行为，给出了反应的最佳条件。拟定了一种化学发光测定过氧化氢的新方法。方法的检测限为３．０Ｘ１０－８ｍｏｌ／ＬＨ２Ｏ２；线性范围为２．０×１０－７～６．０×１０－４ｍｏｌ／Ｌ。评价了该体系的应用前景。     

Detection of ferritin in human serum with a MAP-H(2)O(2)-HRP voltammetric enzyme-linked immunoassay system

A voltammetric enzyme-linked immunoassay based on new system of m-aminophenol (MAP)-H(2)O(2)-horseradish peroxidase (HRP) has firstly been developed and used for the detection of HRP, labelled HRP and ferritin in human serum. HRP or labelled HRP catalyzes the oxidation reaction of MAP with H(2)O(2), the product of which produces a sensitive voltammetric peak at potential of -0.46 V (vs. SCE) in Britton-Robinson (BR) buffer solution. By using this voltammetric peak, HRP can be measured with a detection limit of 9.5x10(-1) mU/l and a linear range of 2.5-2.5x10(2) mU/l. The detection limit to ferritin is 0.25 ng/ml and the linear range 0.25-320 ng/ml. The processes of the electro-reduction of the product of the enzyme-catalyzed reaction have been investigated in detail.