Separation of Phenylalanine Methylester 5'-Phosphoamidates of d4T Diastereoisomers by Supercritical Fluid Chromatography

采用超临界CO2流体色谱技术,分析d4T-5'-N-磷酰化苯丙氨酸甲酯手性磷的非对映异构体.色谱柱为Hpersil ODS2 (250 mm× 4.6 mm,5 μm),流动相为夹带改性剂甲醇、乙醇和异丙醇的超临界CO2流体.以容量因子、选择性和分离度为指标,考察改性剂、背压和柱温对分离的影响.在甲醇、乙醇和异丙醇3种改性剂中,甲醇为最好的改性剂,其中在7％甲醇改性剂下,该化合物的分离度可达到3.35.在7％甲醇改性剂条件下,考察了压力( 10～20 MPa)和温度(303.15～318.15 K)的影响.在优化的分离条件(改性剂为7％甲醇,流速为2 mL/min,柱温为308.15 K,背压为15 M Pa)下,d4T-5'-N-磷酰化苯丙氨酸甲酯的两种非对映异构体完全达到基线分离,分离时间约15 min.     

超高效合相色谱法拆分卡多曲对映体研究

利用超高效合相色谱仪(UPC2),建立了卡多曲对映体拆分方法。考察了手性固定相、有机改性剂、动态背压以及柱温对卡多曲对映体分离度的影响。结果表明,卡多曲对映体手性拆分的最佳色谱条件:采用Lux Cellulose-2(2.5μm,2.1 mm×150 mm)手性色谱柱,CO2-甲醇(60:40,V/V)为流动相,等度洗脱,流速为1.0 m L/min,柱温为40℃,动态背压为13.79 MPa,进样量1μL时,卡多曲对映体得到基线分离。     

超临界流体色谱对吴茱萸中吲哚类生物碱的快速分析

建立了超临界流体色谱快速分析吴茱萸中吲哚类生物碱的方法。以标准品混合物和复杂样品为对象比较4种色谱柱的分离效果,进行色谱柱的筛选;考察了进样体积、改性剂、添加剂、温度和背压对保留行为的影响。结果表明,进样体积对峰形影响显著;添加剂对保留时间和色谱峰形影响有限;改变改性剂能使保留时间显著改变;降低温度,升高背压,保留时间减小。经过优化,确定采用Waters ACQUITY UPC² BEH色谱柱,以甲醇为改性剂,在35 ℃柱温和2.07×10⁷ Pa背压条件下,15 min内完成复杂样品的分析。同时采用超高效液相色谱完成复杂样品的快速分析。结果表明,超临界流体色谱可用于天然产物的高效快速分析,同时该方法与超高效液相色谱在分离选择上的差异有助于天然产物分析方法的拓展。     

反相液相制备色谱法结合超临界流体制备色谱法分离纯化海风藤中的化合物

建立了基于反相液相制备色谱和超临界流体制备色谱的组合方法,用于分离纯化醇提水沉后石油醚层中的海风藤。首先以甲醇作为改性剂,采用醇提水沉法去除海风藤甲醇提取物中的叶绿素,加入硅藻土后用石油醚回流富集目标成分。选用反相C18制备色谱柱将其分为18个组分,然后将组分在SFC模式下进行制备。选用酰胺色谱柱,以甲醇为改性剂,在柱温30℃、背压15.0 MPa的条件下进行分离。基于反相色谱和超临界流体色谱不同的分离选择性,最后分离得到6个高纯度化合物。该法展示了反相制备色谱和超临界流体制备色谱在海风藤分离纯化方面的优势,特别是超临界流体色谱在天然产物的分析和制备方面的巨大潜力。     

超高效合相色谱对芳樟醇对映体的拆分及热力学研究

在超高效合相色谱(UPC2)模式下,研究了β-环糊精手性固定相对芳樟醇对映体的手性分离情况,考察了不同的有机改性剂、动态背压(ABPR)、柱温及进样量对芳樟醇分离度的影响。结果表明,乙腈作为有机改性剂比甲醇更有利于芳樟醇对映体的分离;柱温由30℃增至55℃时,芳樟醇对映体的保留时间和分离度均随之减小;芳樟醇体积分数为0.01%,进样量为3μL时,其对映体具有最佳的峰形和分离度,且分析时间仅需3 min。最佳实验条件为:采用CAPCELL PAK Chiral CD-Ph(150 mm×3.0 mm,4.6μm)手性色谱柱,CO2-乙腈(97∶3)为流动相,等度洗脱,流速为1.2 m L/min,检测波长215 nm,柱温30℃,动态背压(ABPR)为1 700 psi。初步研究了超高效合相色谱下芳樟醇对映体分离的热力学机理,为UPC2拆分手性化合物提供了实验基础。     

超高效合相色谱-质谱法对甲卡西酮对映异构体的手性分离和定量检测

建立了超高效合相色谱-质谱法(UPC2-MS)对甲卡西酮(MC)对映异构体进行手性分离和定量检测。使用Acquity UPC² Trefoil CEL2 (2.5μm, 3.0 mm×150 mm)手性色谱柱,以超临界流体CO₂为主要流动相,含10 mmol/L甲酸铵和0.1%甲酸的异丙醇为改性剂进行梯度洗脱,可以在13 min内实现2个对映异构体的基线分离。在三重四极杆质谱多反应监测(MRM)模式下,2个对映异构体的检出限为0.5 ng/mL,定量限为1.0 ng/mL,在1～100 ng/mL质量浓度范围内线性关系良好,线性相关系数(R²)≥0.999, 10种常见毒品和药品对检测均无干扰。对实际缴获毒品的检测结果表明：直接作为毒品销售的MC主要为外消旋体,而非法制造麻黄碱的地下窝点缴获的MC以S构型为主。     

高效液相色谱法手性色谱柱分离3-羟基丁酸乙酯对映体

采用Chiralcel OD-H手性色谱柱(4.6mm×250mm,5μm)作为分离柱,用高效液相色谱法对3-羟基丁酸乙酯对映体进行了拆分。在优化的色谱条件下,正己烷-异丙醇(100+5)溶液为流动相,流量为1.0mL·min-1,柱温为25℃。3-羟基丁酸乙酯对映异构体在11min内成功分离,分离度达4.25。     

戊唑醇和三唑酮对映体的手性拆分

以纤维素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)(CDMPC)高效液相色谱手性固定相(CSP)成功地拆分了戊唑醇和三唑酮对映异构体,通过考察流动相中异丙醇的含量、柱长及温度对手性拆分的影响,优化色谱分离条件。结果显示：该固定相对两种手性农药有较好的拆分效果,使用250mm色谱柱,流动相中含5％异丙醇时戊唑醇得到最佳分离,分离度为1．22;三唑酮在异丙醇含量为2％时有最大分离度1．47。减少异丙醇含量对两种农药均有利于增大分离度,温度升高则降低分离效果。     

超临界流体色谱系统中采用单泵在线添加改性剂

摘要：采用单个注射泵,以并联流路装置,在超临界CO2流体中在线添加甲醇等改性剂,用作填充柱超临界流体色谱的流动相。改性剂的粘度及流路长度显著地影响改性剂体积分数。利用该装置,可以方便地调节流动相的体积分数,改性剂的体积分数稳定且持久,可初步代替双注射泵系统添加改性剂。     

多糖类手性固定相超临界流体色谱法分离手性化合物

采用超临界流体色谱法(SFC),在多糖固定相Chiralpak IA、IB、IC、ID、IE和IF上成功拆分了11种手性化合物。分离结果表明,这6支手性色谱柱对这些手性化合物具有良好的手性识别互补性,均可以在10 min之内得到良好的分离结果,具有较好的实用性。改性剂甲醇、乙醇和异丙醇对手性化合物的保留时间以及手性选择性均具有良好的调节作用,需要根据不同手性物质在手性柱上的分离情况加以区别,选择使用,并调节改性剂至合适的比例。针对键合型固定相溶剂通用性的特征,特殊改性剂的应用也有助于优化手性分离。     

直链淀粉手性固定相高效液相色谱法拆分比索洛尔对映体

采用直链淀粉手性固定相高效液相色谱法在正相条件下直接拆分了比索洛尔对映异构体。分别以异丙醇、乙醇为有机改性剂,考察了流动相的组成与配比、流速及柱温等因素对比索洛尔对映体分离的影响。确定了比索洛尔对映体的最佳拆分条件:流动相正己烷-乙醇-二乙胺(体积比为88∶12∶0.1),流速0.6 mL/min,检测波长270 nm,柱温20 ℃。该方法可快捷、简便地拆分比索洛尔对映体。     

黄芪中黄酮类化合物的超临界流体色谱分离方法研究

考察了超临界流体色谱（SFC）中的色谱柱、改性剂、添加剂、流速、柱温和背压等因素对9种黄酮类成分（包括芒柄花素、异鼠李素、毛蕊异黄酮、山奈酚、槲皮素、紫云英苷、芒柄花苷、异槲皮苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷）分离的影响,与高效液相色谱法（HPLC）进行了比较,并建立了黄芪饮片中5种主要黄酮类化合物的SFC分析方法。采用Agilent ZORBAX RX－SIL色谱柱（4.6 mm × 150 mm,5 μm）进行分离,CO2－0.1%磷酸甲醇溶液为流动相梯度洗脱,流速为3 mL/min;柱温为35 ℃;背压为10 MPa,9种黄酮类化合物可在10 min内实现基线分离。5种黄酮类化合物在一定质量浓度范围内均具有良好的线性关系（r2 ≥ 0.963 2）,检出限为10.69 ~ 16.21 μg/mL,日内相对标准偏差（RSD）为1.3% ~ 2.0%;日间RSD为1.6% ~ 2.2%。5种黄酮类化合物在48 h内具有良好的稳定性,重复性为3.6% ~ 6.0%,回收率为91.8% ~ 112%。与HPLC法相比,9种化合物的保留时间顺序基本相反,SFC法更快速、经济环保,且其保留及选择性受色谱柱、改性剂和添加剂的影响较大,添加剂对色谱峰形影响明显。     

手性固定相高效液相色谱法同时测定琥珀酸索利那新原料药中对映异构体和非对映异构体

以手性填料色谱柱为固定相,建立了同时测定琥珀酸索利那新原料药中对映异构体和非对映异构体的高效液相色谱法。分别以Daicel CHIRALPAKAD-H手性色谱柱、Daicel CHIRALCELOJ-H手性色谱柱、研创SCDP52546手性色谱柱、研创RC-OD52546手性色谱柱为分离柱,进行色谱柱筛选,并考察了不同检测波长、柱温及流动相体系对对映异构体和非对映异构体分离检测的影响。优化后的色谱条件为:以Daicel CHIRALPAKAD-H手性色谱柱为分离柱,正己烷-乙醇-二乙胺(900∶100∶1)为流动相;检测波长为220 nm;流速为1 mL/min;柱温为30℃。该色谱条件专属性良好(分离度≥2.0);精密度良好(RSD≤2.0%);对映异构体、非对映异构体Ⅰ、非对映异构体Ⅱ分别在0.240 5~10.822 5,0.186 8~8.406 0,0.196 1~8.824 5μg/mL范围内线性关系良好(r≥0.999);检出限为0.062 25~0.080 13μg/mL,定量下限为0.186 8~0.240 5μg/mL;加标回收率为94.4%~95.7%,相对标准偏差为2.5%~3.1%。该方法简便、有效,可用于生产中琥珀酸索利那新原料药中对映异构体和非对映异构体的含量检测。     

超高效合相色谱/二极管阵列检测器测定螺旋藻保健食品中的类胡萝卜素

建立了超高效合相色谱(UPC2)/二极管阵列检测器(PDA)快速测定螺旋藻保健食品中β-胡萝卜素、玉米黄质和叶黄素3种类胡萝卜素的分析方法。优化了色谱柱、助溶剂、背压和色谱柱温以及提取溶剂,优化实验条件为:样品采用二氯甲烷-乙醇(2∶1)超声提取,过0.22μm GHP滤膜后,采用CO2-甲醇梯度洗脱,经ACQUITY UPC2HSS C18SB(150 mm×3.0 mm,1.8μm)色谱柱分离,色谱柱温为40℃,背压为2 000psi,外标法定量。3种类胡萝卜素在一定浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数均不小于0.999 3。方法检出限为0.012~0.035 mg/g;定量下限为0.040~0.120 mg/g;不同水平的加标回收率为82.5%~95.7%,相对标准偏差为7.6%~9.8%。本方法快速、准确,可用于螺旋藻保健食品中3种类胡萝卜素的测定。     

高效液相色谱手性固定相法分离R基-3-吡啶基亚砜对映体

利用正相高效液相色谱法在一种纤维素衍生物手性固定相（OB-H）上成功分离了一系列（7个）的R基-3-吡啶基亚砜的对映异构体。通过考察流动相中异丙醇的含量和温度对手性分离的影响，优化色谱分离条件。随着流动相中异丙醇含量的增加，除了带有支链的化合物Ⅲ外，其他6个化合物对映体的容量因子k’和分离度Rs都会减少。柱温变化对分离度的影响不大。长的碳链和支链都会使溶质与固定相的作用减弱，因此，容量因子k’和分离度Rs也会减小。所有测试结果显示：该固定相对这类化合物有较好的分离效果。最佳分离条件是流动相中含有30％的异丙醇，柱温为25℃。     

超高效超临界色谱分析聚合物制品中的7种添加剂

采用超高效超临界色谱(UPSFC)-二极管阵列检测器(PDA)建立了快速分析高分子材料中7种常用聚合物添加剂的方法。在检测波长为220 nm条件下,通过考察样品的稀释溶剂、流动相添加剂、柱温、背压、柱流速对分离的影响,最终确定7种添加剂分离的最优化条件：采用正己烷/异丙醇(1/1,v/v)为稀释溶剂,流动相添加剂为甲醇/乙腈(1/1,v/v),流速2 mL/min,柱温50 ℃,背压12.41~13.79 MPa条件下,7种聚合物添加剂能够在5 min之内达到完全基线分离。利用微波辅助萃取方法对实际样品中的添加剂进行提取,经UPSFC-PDA分析,7种添加剂的回收率为69.9%~118.9%,相对标准偏差(RSD,n=9)低于10%。该方法简便、快速,选择性强,能够准确快速地分析聚合物制品中的添加剂。     

超临界流体萃取-高效液相色谱离线联用分析灵芝中三萜类化合物

在系统考察压力、温度和时间对萃取率影响的基础上,利用超临界流体萃取技术提取了灵芝子实体中的三萜类化合物。其最佳萃取条件为:压力15 MPa,温度35℃,动态萃取时间120 m in,CO2流量1 mL/m in,背压阀温度50℃。此外,还建立了高效液相色谱梯度洗脱分离三萜类化合物的方法。通过比较超临界流体提取物和甲醇提取物的色谱图,发现两者具有相似的峰形,说明超临界流体能够达到与甲醇相近的萃取效果,可以取代甲醇作为新一代的绿色萃取溶剂。     

橄榄油和山茶油中5种未衍生化脂肪酸含量的分析对比

建立了超高效合相色谱-质谱(UPC2-M S)法快速分析橄榄油中软脂酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸等5种脂肪酸的方法,并比较了橄榄油和山茶油中上述5种脂肪酸的含量差异。以标准品为对象比较了4种色谱柱的分离效果,进行色谱柱的筛选;考察了流动相中助溶剂、柱温和背压、补偿溶剂对分离的影响。助溶剂对保留时间和色谱峰形有影响;降低背压,升高柱温,保留时间增大;补偿溶剂对目标物的离子化效率影响不大。经过优化,确定采用UPC2BEH2-EP色谱柱,以超临界CO2-甲醇/乙腈(V/V=1:1)为助溶剂,在50℃柱温和13.79 M Pa背压条件下,以质谱检测器进行检测,3 min内完成植物油样品的分析。橄榄油和山茶油中的脂肪酸组成比较接近,属于高油酸(含量均76%)类型的植物油,总不饱和脂肪酸含量远高于饱和脂肪酸,且该结果与气相色谱法测定结果无显著差异。     

典型醇类物质超临界水氧化反应途径研究

采用自主设计的连续流动气封壁超临界水氧化反应装置,研究了典型醇类物质甲醇、乙醇和异丙醇在超临界水中氧化的反应途径,并归纳了醇类物质超临界水氧化反应的规律及特点。研究结果表明,甲醇超临界水氧化反应的主要中间产物为甲醛,同样条件下转化率较乙醇和异丙醇低;乙醇和异丙醇超临界水氧化反应的主要中间产物为丙酮、乙酸、乙醛和甲醇等。三种醇超临界水氧化过程中均涉及到大量活性自由基的相互作用,表现为脱氢、裂解和聚合等反应形式;产物包括碳链增长、不变、降低三种类型。总体来看,醇类物质超临界水氧化反应的趋势是向碳链降低的方向进行,即通过一系列中间产物最后生成CO2和水。     

纤维素衍生物手性固定相高效液相色谱法分离盐酸川丁特罗对映体

以纤维素三-(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)为手性固定相(Lux Cellulose-1),建立了在正相色谱条件下直接分离盐酸川丁特罗对映体的高效液相色谱法。考察了乙醇、异丙醇等有机改性剂,三氟乙酸、二乙胺等流动相添加剂和柱温对对映体分离的影响。结果显示,酸性和碱性添加剂对对映体分离的影响最为显著: 添加二乙胺时两对映体无分离趋势;添加三氟乙酸时对映体保留强,且分离趋势明显;而同时添加三氟乙酸和二乙胺则两对映体分离显著改善,分离度可达4.0。优化后的色谱条件: 色谱柱为Lux Cellulose-1手性柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm),流动相为正庚烷-乙醇-三氟乙酸-二乙胺(88:12:0.3:0.05, v/v/v/v),流速为1.0 mL/min,紫外检测波长为246 nm,柱温为25 ℃。该方法简便,快速,可用于左旋盐酸川丁特罗原料中右旋异构体杂质的检查。