血清CEA、CYFRA21-1、pro-GRP、NSE检测在肺癌预后评估中的意义

目的总结分析血清CEA、CYFRA21-1、pro-GRP、NSE检测在肺癌预后评估中的意义。方法选择粤北人民医院收治的60例肺癌患者(肺癌组)、60例肺部良性病变患者(良性组)、60例健康体检正常者(对照组)为研究对象,空腹采集血液样本,测定CEA、CYFRA21-1、pro-GRP、NSE水平差异。结果肺癌组患者(其中非小细胞肺癌Ⅰ、Ⅱ期首选手术联合化疗,Ⅲ、Ⅳ期非细胞肺癌及小细胞肺癌首选化疗)后的CEA、CYFRA21-1、pro-GRP、NSE水平明显低于治疗前,(P0.05);肺癌组患者的CEA、CYFRA21-1、pro-GRP、NSE水平明显高于良性组及对照组,(P0.05)。结论联合检测血清中CEA、CYFRA21-1、pro-GRP、NSE对准确评估肺癌患者预后具有重要意义,临床值得推广使用。     

化学发光底物分辨双组分免疫分析法测定胶质瘤标志物NSE和CA15-3

本文建立了一种基于辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酯酶(ALP)化学发光底物分辨的双组分免疫分析新技术,用以检测人胶质瘤血清标志物神经元特异性烯醇化酶(NSE)和糖链抗原15-3(CA15-3).实验详细考察了捕获抗体、检测抗体、HRP和ALP酶标记物的用量,结果发现NSE和CA15-3的线性范围分别为0.5～20ng/mL(R20.99)和0.5～20U/mL(R20.99),最低检出限分别为0.2ng/mL和0.2U/mL;高、中和低三个浓度的血清加样回收率良好;天内和天间相对标准偏差均小于10%;且一份血清,两组分同时检测无交叉干扰.综合而言:本法能够一次实验,高灵敏、高特异地同时检测两种疾病标志物,具有血清用量少、检测时间短、操作简单、结果可靠的优点,有望为胶质瘤的临床早期诊断提供坚实的支持.     

增强CT联合血清指标诊断结直肠癌的价值

本文探讨癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA19-9)、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)及增强CT在结直肠癌中的联合诊断效果。选取100例结直肠癌患作为观察组,同时选取结直肠良性肿瘤患者60例作为对照组,检测血清CEA、CA19-9、IGFBP-3,同时给予增强CT检查。观察组血清CEA和CA19-9高于对照组(P<0.05),而IGFBP-3低于对照组(P<0.05);TNM分期Ⅲ~Ⅳ和Ⅰ~Ⅱ患者血清CEA、CA19-9和IGFBP-3差异比较有统计学意义(P<0.05);增强CT联合血清指标联合诊断灵敏性为89.00%、特异性为90.00%;增强CT诊断结直肠癌T分期、N分期与病理结果Kappa值分别为0.696和0.790(P<0.05)。CEA、CA19-9、IGFBP-3联合增强CT是一种具有较高效能的结直肠癌诊断方法。     

用于肿瘤标志物现场快速检测的便携式仪表的研制

针对肿瘤标志物高灵敏度现场快速检测的需求,将电化学检测技术与电子技术相结合,采用差分脉冲伏安法(Differential pulse voltammetry,DPV)研制了一种可用于肿瘤标志物现场快速检测的便携式仪表,检测电压和电流的分辨率分别为0.8 mV和1nA.结合实验室自制微流控纸芯片,利用该便携式仪表对肿瘤标志物癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen,CEA)进行检测,实验结果表明,在1～500 μg/L浓度范围内,DPV峰值电流响应与CEA抗原浓度对数呈线性关系,线性相关系数为0.998,检出限为10 pg/mL.根据抗原抗体特异性结合和电化学检测原理,检测到电化学反应的微弱电流后,仪表可以根据已经标定的电流与浓度之间的比例关系自动计算出肿瘤标志物的浓度.此便携式仪表具有检测灵敏度高、检出限低等优点,可广泛应用于肿瘤标志物的即时检测.     

微流控芯片电泳免疫激光诱导荧光检测人血清中肿瘤标记物癌胚抗原CEA

癌胚抗原CEA被认为是结/直肠癌的特异性肿瘤标志物,临床已将CEA作为结肠、乳腺癌、胰腺癌、肺癌等肿瘤普查筛选的指标之一.目前,检测CEA的常用方法有放射免疫分析法~([1])、酶免疫分析法~([2])、时间分辨荧光免疫分析法~([3])和化学发光免疫分析法~([4])等.本研究以荧光标记二抗为示踪剂,建立了测定了人血清中肿瘤标记物CEA的微流控芯片电泳激光诱导荧光均相非竞争免疫分析新方法.     

前列腺癌相关肿瘤标志物分析方法的研究进展

肿瘤标志物是在恶性肿瘤细胞中过表达的一类蛋白质,能反映肿瘤的发生、发展,并能监测肿瘤治疗的效果.因此,癌症患者血清中的肿瘤标志物的分析对于癌症状态的监测具有重要意义.常见的前列腺肿瘤标志物包括前列腺特异性抗原（PSA）、前列腺特异性膜抗原（PSMA）、α-甲酰基辅酶A消旋酶（AMACR,P504S）、前列腺酸性磷酸酶（PAP）和钙磷脂结合蛋白3（ANXA3）等.基于对前列腺肿瘤标志物的相关研究,本综述简要介绍了前列腺癌肿瘤标志物的组成、生物功能和生理意义,重点归纳了前列腺癌特异性抗原和前列腺酸性磷酸酶的检测技术,总结了当前前列腺癌肿瘤标志物检测技术的不足,并展望了前列腺癌肿瘤标志物检测在临床应用中的前景.     

虚拟导航超声支气管镜灌洗液miRNA在不同大体分型肺癌患者体内表达差异及诊断周围型肺癌的效能研究

本文探讨了虚拟导航超声支气管镜灌洗液微小RNA(miRNA)在不同大体分型肺癌患者体内的表达差异及诊断周围型肺癌(PLC)的效能。选取65例中心型肺癌(CLC)患者(中心型组)及65例PLC患者(周围型组),均检测miR-1260b、miR-135a-3p、miR-299-3p、miR-3175及癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)表达。周围型组miR-1260b低于中心型组,miR-135a-3p、miR-3175高于中心型组(P<0.05);miR-1260b、miR-135a-3p、miR-3175与CEA、NSE相关,且与PLC显著相关(P<0.05);miR-1260b、miR-135a-3p联合诊断PLC的AUC高于单独诊断;miR-1260b、miR-135a-3p、miR-299-3p、miR-3175联合诊断PLC转移的效能高于单独诊断。故可知PLC和CLC患者虚拟导航超声支气管镜灌洗液中miR-1260b、miR-135a-3p、miR-3175表达存在差异,联合检测对PLC具有重要诊断价值。而且miR-1260b、miR-135a-3p、miR-299-3p、miR-3175联合检测可预测PLC转移,为临床诊治提供依据。     

多肽抗体免疫富集-质谱法检测肝癌患者血清多肽标志物

血清多肽是癌症诊断信息的重要来源.近年来针对其复杂多样、丰度低、易降解的特点,多种多肽组技术得到快速发展.建立并优化了检测多肽标志物的免疫质谱方法,用于检测血清中的肿瘤多肽标志物.方法的线性范围为1-40 pmol;检出限为0.5 pmol;对5 pmol合成肽 5标准品平行检测3次的相对标准偏差(RSD)为9.5%....     

基于酶循环放大的DNA生物传感器用于检测食管鳞状细胞癌生物标志物蛋白PDGF-BB

食管鳞状细胞癌(ESCC)患者发病早期由于体内的肿瘤标志物种类少且含量低,难以在患病早期发现疾病从而快速反应并有效治疗.因此,找到一种合适的标志物对其进行快速高效检测是研究者亟待解决的问题.血小板衍生生长因子(PDGF-BB)在恶性肿瘤的早期诊断中具有极其重要的地位.该文基于酶循环放大荧光光谱设计了一种用于PDGF-B...     

微孔板化学发光酶免疫分析法分析人血清中游离前列腺特异性抗原

建立了一种定量分析人血清中游离前列腺特异性抗原(f-PSA)的高灵敏度微孔板化学发光酶免疫分析方法,以碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)为标记酶,4-甲氧基-4-(3″-磷酰氧基苯)-螺旋-(1,2-二氧杂环丁烷-3,2′-金刚烷)(4-methoxy-4-(3″-phosphate-phenyl)-spiro-(1,2-dioxetane-3,2′-adamantane),AMPPD)-ALP高灵敏的化学发光反应为检测体系,通过检测发光强度对人血清中f-PSA进行定量。对几种物理化学参数如温育时间、免疫反应步骤以及检测时间等进行了优化,采用了一步双抗体夹心法,37℃恒温静置温育2h,洗涤后加入50μL AMPPD,30~80min内检测。该方法线性范围为0.15~20μg/L,相关系数大于0.998;检出限可达0.01μg/L,批内和批间相对标准偏差(C.V.)均小于7%;回收率在88%~108%之间。对人体血清中共存的6种常见肿瘤标志物CA50、CA125、CA15-3、CA242、CEA和AFP的偶联反应进行考察,特异性良好。为了验证该方法用于商业试剂盒的可行性,在4℃和37℃条件下分别进行了3d,5d,7d的稳定性考察,其线性相关系数仍均大于0.998,相对标准偏差小于6%。对98例实际血样进行测定,并与进口试剂盒(Monobind.USA)作临床比对,相关性良好。这些结果均表明,该分析体系稳定,可靠,可以用于商业化试剂盒的开发,在临床分析人血清中f-PSA的辅助诊断前列腺癌方面具有很高的应用价值。     

插拔式压电肿瘤标志物微阵列免疫传感器的研制

以AT切型、基频10 MHz的金膜石英晶体作为换能器,通过螺旋检测池固定夹具构建一种新型插拔式压电石英晶体传感器,并组装成2×5型压电肿瘤标志物微阵列免疫传感器。研究了传感器的响应特性及参数。该微阵列传感器在甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、前列腺特异性抗原(PSA)和人绒毛膜促性腺激素(hCG)质量浓度分别为20~640μg/L、1.56~50μg/L、1.25~50μg/L、2.5~250 mIU/mL的范围内,压电石英晶体振荡频率偏移值对肿瘤标志物浓度均呈现良好的响应特性。应用微阵列传感器测定68例临床血清标本,结果与化学发光免疫分析法符合(相关系数分别为0.92、0.90、0.91、0.94)。该压电肿瘤标志物传感器微阵列具有结构简单、操作方便、稳定性好、灵敏度和特异性高,不需标记,能实时检测和重复使用等优点,可用于临床实验诊断,具有临床推广应用价值。     

基于砷和汞离子标记SiO2@Au纳米探针的超敏多元免疫分析方法研究

构建了一种基于As3+和Hg2+标记SiO2@Au复合纳米探针(NPs),以及氢化物发生-原子荧光(HGAFS)同时检测癌胚抗原(CEA)和糖蛋白19-9(CA 19-9)的超灵敏多元免疫分析方法。采用氨基化SiO2(核)@Au NPs(壳)分别吸附As3+和Hg2+,并标记CEA和CA 19-9的第二抗体(Ab2),由此获得了富As(或Hg)型信号探针(As(Hg)-SiO2@Au-Ab2)。基于夹心免疫分析方法,将两种信号探针和对应的抗原以及96孔板上一抗,在板底形成两种免疫复合物(Ab 1/Ag/As(Hg)-SiO2@Au-Ab2),利用HG-AFS同时检测As3+和Hg2+,其与CEA和CA 19-9的含量对数值成正比,可用于定量分析。此类探针不仅具有良好的分散性、还具有出色的信号放大效果。优化了探针合成和最佳反应条件,并对探针制备过程进行了表征。本方法与CEA和CA19-9分别在0.001~100μg/L和0.01~80 U/mL范围内呈线性关系,检出限分别为0.5 ng/L和0.005 U/mL(3σ),低于标准ELISA方法3个数量级。用于血清样品中CEA和CA 19-9同时检测,并与标准ELISA方法对照,结果一致。此免疫分析方法灵敏、简便、一次可实现多个肿瘤标志物检测,适合于基层卫生部门进行恶性肿瘤早期筛查。     

基于核酸适体的丙肝病毒核心蛋白检测新方法

丙型病毒性肝炎是由丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)引起的一种传染性疾病.发展对HCV抗原具有高亲和力高特异性的识别分子和检测方法对丙肝进行早期诊断具有非常重要的意义.我们通过SELEX筛选得到了能特异性识别HCV核心蛋白(core蛋白)的DNA核酸适体,建立了可对HCV core蛋白进行高灵敏检测的核酸适体-酶联免疫新方法,并成功应用于丙肝病人血清中HCV core蛋白的检测,有望发展成为简便、灵敏、低成本的HCV早期诊断和血清筛查新方法.     

新型压电肿瘤标志物微阵列免疫传感器的研究

采用螺旋固定夹具构建一种新型插拔式压电石英晶体传感器,巯基化自组装技术固定抗人甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)和前列腺特异抗原(PSA)的单克隆抗体,并组装成2×5型压电肿瘤标志物微阵列免疫传感器.研究了压电肿瘤标志物微阵列免疫传感器的响应特性及其影响因素.该微阵列传感器在AFP、CEA和PSA浓度分别为20～640 μg/L、1.56～50 μg/L和1.25～50 μg/L,压电石英晶体振荡频率偏移值对肿瘤标志物浓度呈现良好的响应特性.微阵列传感器用于68例临床血清标本的测定,结果与免疫化学发光法一致;相关系数分别为0.92、0.90和0.91.     

基于空心二硫化钼纳米球/金纳米花的神经元特异性烯醇化酶光电化学免疫传感器

以钼酸铵为钼源,硫脲为硫源,1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐离子液体为溶剂和形貌控制剂,采用溶剂热法制备空心MoS_2纳米球(MoS_2NBs)。以乙二醇为溶剂,三乙醇胺为还原剂,采用水浴法制备金纳米花(AuNFs)。将空心(MoS_2NBs)与AuNFs组装后修饰到玻碳电极表面,进一步固定神经元特异性烯醇化酶(NSE)的识别抗体,再经戊二醛交联、牛血清白蛋白封闭非特异性结合位点,制备NSE的位阻效应无标记光电化学免疫传感器。在最优化条件下,该传感器对NSE的线性响应范围为0.004～2.5 ng·mL~(-1),检测限(S/N=3)为1.83 pg·mL~(-1)。该光电化学免疫传感器对NSE检测还具有良好的选择性、稳定性、重现性以及较高的灵敏度。当用于临床血清样品中NSE的检测时,其结果与电化学发光法一致,表明该光电化学免疫传感器具有潜在的临床应用价值。     

表面增强拉曼光谱技术在microRNA检测中的研究进展

microRNA是一段长约为18~24个核苷酸的内源性非编码单链RNA. 最新研究发现: 许多疾病和肿瘤的发生与microRNA的表达水平息息相关, 且microRNA有望成为新型肿瘤标志物及癌症治疗的新目标. 因此, 发展高灵敏度、高特异性及简单快速的microRNA分析检测方法对于生物医学研究和癌症的早期诊断具有重要的意义. 表面增强拉曼光谱(SERS)技术由于具有灵敏度高、检测速度快、指纹识别、水干扰小等独特优势, 在癌症的早期诊断领域具有很大的应用价值. 作者综述了SERS技术在microRNA检测方面的最新研究进展, 分析了该技术在生物检测中亟待解决的关键问题和挑战, 并对其未来的发展前景进行了展望.     

基于电感耦合等离子体质谱的肿瘤标志物检测

癌症是导致死亡的重要原因和提高预期寿命的严重阻碍。研究表明,早期的诊断和治疗是降低死亡率最有效的途径。肿瘤标志物的浓度变化通常与肿瘤发生、肿瘤细胞转移和临床治疗相关,肿瘤标志物检测对癌症的早期诊断,进展监测和预后具有重要的意义。近二十年来,基于电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)检测肿瘤标志物的方法引起了研究者的广泛关注。ICP-MS具有分辨率高、灵敏度高、动态范围宽以及可多元素同时检测的优势。结合稳定同位素标记策略,已有许多基于ICP-MS的肿瘤标志物检测方法被报道。该文介绍了几种常见肿瘤标志物及其ICP-MS检测方法,并简要总结了ICP-MS在多组分生物标志物同时检测中的应用。     

18F-FDG PET/CT显像联合肿瘤标志物检查对女性不明原因腹腔积液的诊断价值

本文探讨了18 F-脱氧葡萄糖(18 F-FDG)正电子发射计算机断层显像(PET/CT)联合肿瘤标志物检查对女性不明原因腹腔积液的鉴别诊断价值。选取95例不明原因腹腔积液女性患者的18 F-FDG PET/CT影像资料及肿瘤标志物资料进行回顾性分析,并与病理诊断结果进行对照。结果显示:95例患者中,经病理证实恶性腹腔积液74例,良性腹腔积液21例。PET/CT对良恶性腹腔积液的诊断灵敏度为98.65%,特异度为19.05%,准确度为81.05%。恶性腹腔积液的SUV max与良性腹腔积液比较,差异无统计学意义(P>0.05)。将患者按病因进一步细分后发现,卵巢癌组的SUV max明显高于其他良性原因组(P<0.05),但与结核组和其他恶性肿瘤组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。肿瘤标志物中以CA125检测效率最高,其对卵巢癌及结核所致腹腔积液的诊断灵敏度为98.2%,特异度为7.7%,准确度为81.4%。PET/CT和CA125联合诊断对卵巢癌及结核所致腹腔积液的灵敏度、特异度及准确度与单一PET/CT或CA125诊断比较差异均无统计学意义(P>0.05)。本实验表明18 F-FDG PET/CT诊断女性不明原因腹腔积液的良恶性有较高的灵敏度和准确度,但特异性较差,联合肿瘤标志物检查并不能提高对卵巢癌及结核所致腹腔积液的诊断效能。     

肿瘤标志物联合C反应蛋白在肺癌诊断中的价值

目的探讨肿瘤标志物与C反应蛋白联合检测在肺癌诊断中的价值。方法选取2012年1月—2014年12月佳木斯大学附属第一医院收治的50例肺癌患者为实验组,选取同期50例肺良性疾病患者为对照组,对比两组患者体内C反应蛋白和4项肿瘤标志物含量。结果 1实验组患者的4项肿瘤标志物检测结果明显高于对照组,C反应蛋白含量低于对照组,组间差异具统计学意义(P0.05);2 4项肿瘤标志物与C反应蛋白联合检测对肺癌的阳性检出率可达86.0%以上。结论肿瘤标志物与C反应蛋白在肺癌诊断中具有应用价值,两者联合应用可以提高肺癌的阳性检出率。     

基于双光子诱导荧光的肿瘤标志物CA125的实时动态可视化活检

糖链抗原CA125(Ag)是肿瘤早期及癌变期最重要的标识物,该文利用抗CA125单克隆抗体Ab125(Ab)特异性亲合抗原的原理,用制备的双光子荧光标记探针LP标记抗体(LP-Ab)以特异性识别CA125,用近红外激光激发抗原-抗体复合物(LP-Ab·Ag),利用复合物荧光实现对肿瘤标志物CA125的量化检测和实时动态成像。该方法简单易行,克服了单光子荧光检测中的光致毒与光漂白,且能显著提高成像的分辨率、清晰度与灵敏度,对肿瘤及癌变的早期诊断与预防具有重要意义。