HPLC法测定黄芪中黄酮类成分和黄芪甲苷的含量

比较黄芪对照药材和甘肃省近20个乡镇大面积种植的黄芪中黄芪甲苷和2个黄酮类化合物的含量,确定甘肃黄芪质量评价指标 采用KromasilODS-1色谱柱,甲醇-水为流动相,梯度洗脱,流速为1.0mL/min,检测波长254nm测定黄酮类成分的含量;乙腈-水为流动相,等度洗脱,流速为1.0mL/min,检测波长为200nm测定黄芪甲苷的含量.黄酮类成分毛蕊异黄酮的线性范围为2.350×10-3～4.700×10-2μg,平均回收率为98.34%,RSD为2.00%;芒柄花素线性范围为:2.325×10-3～4.650×10-2μg,平均回收率为96.53%,RSD为1.63%;黄芪甲苷线性范围为1.215～6.075μg,平均回收率为101.47%,RSD为2.21%.该方法简便,可靠,准确,具有一定的实用性,可用于黄芪药材质量控制.     

高效液相色谱法测定盐酸甲氯芬酯胶囊的含量

建立了用高效液相色谱测定盐酸甲氯芬酯胶囊含量的方法.采用Hypersil C18柱(5 μm,4.6 mm i.d.×200 mm),流动相为V(乙腈)∶V(0.12% NH4HCO3-0.50%三乙胺)溶液＝33∶67 (甲基磺酸调pH至3.0),流速: 1.0 mL/min,检测波长为225 nm.盐酸甲氯芬酯的线性范围为1.632～163.2 μg/mL,平均回收率为99.67%,RSD=1.8% (n=9).     

鱼腥草中3种有效成分含量的测定

建立鱼腥草不同品种、不同部位绿原酸、芸香苷和槲皮素的测定方法. 以90% EtOH为溶剂, 采用索氏提取器提取, 利用HPLC测定3种活性成分的含量. 采用DiamonsilTMC18 (4.6 mm×150 mm, 5 μm)为色谱柱, 流动相分别为0.06 mol/L V(NaH2PO4)∶V(MeOH)＝7.3∶2.7、 V(MeOH)∶V(H2O)∶V(HAc)＝48∶50∶2, 流速为1 mL/min, 绿原酸检测波长为326 nm, 芸香苷和槲皮素为254 nm. 绿原酸、芸香苷、槲皮素的线性范围分别为4.6～30.7 μg/mL、 0.30～7.5 μg/mL、 0.034～0.85 μg/mL, 平均回收率和RSD分别为99.3%、 1.0%, 98.9%、 1.6%, 98.7%、 0.7%. 该方法可用于鱼腥草原料选择和制剂质量的控制.     

蒸发光散射高效液相色谱法测定黄芪饮片中的黄芪甲苷含量

采用蒸发光散射高效液相色谱法测定黄芪饮片中黄芪甲苷的含量。黄芪饮片分别用甲醇和正丁醇提取,以Na OH溶液洗涤,蒸干,再用甲醇溶解,采用Agilent SB–C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离测定,流动相为乙腈–水(32∶68),流量为1.0 m L/min,漂移管温度为80℃。方法检出限为1.5μg/m L,黄芪甲苷溶液的质量浓度在2~12μg/m L范围内与色谱峰面积线性关系良好(r2=0.999 6),测定结果的相对标准偏差为0.65%(n=6),平均加标回收率为99.6%。该方法稳定可靠,可用于黄芪药材及其生物制品中黄芪甲苷含量的测定。     

HPLC测定藏药香菊活血丸中士的宁的含量

采用RP-HPLC法,色谱柱:Symmetry C18 (5 μm,4.6 mm×250 mm);流动相:V(甲醇)∶V(0.025 mol/L KH2PO4 (pH 2.8))=20∶80;检测波长260 nm;流速:0.7 mL/min,进样量10 μL,对香菊活血丸中士的宁进行含量测定.结果显示士的宁在0.004～0.128 μg (r=0.9993)范围内有良好的线性关系;平均回收率为101.73% (平均RSD=1.153%).本方法可用于香菊活血丸中士的宁的质量控制.     

加压毛细管电色谱测定葛根中三种异黄酮类化合物

建立了加压毛细管电色谱(pCEC)检测葛根中异黄酮类化合物葛根素、大豆苷、大豆苷元的方法。采用C18毛细管色谱柱,以NaH2PO4缓冲盐水溶液和甲醇为流动相,优化流动相比例、流动相流速、NaH2PO4缓冲盐水溶液浓度和pH、分离电压等色谱条件。结果表明,在流动相为17.5 mmol/L NaH2PO4缓冲盐水溶液(pH 4.0):甲醇=55:45(V/V),分离电压3 kV,流动相流速80μL/min,检测波长250 nm的条件下,葛根素、大豆苷、大豆苷元质量浓度在200～1000μg/mL范围内线性关系良好,相关系数在0.9960～0.9982之间,平均回收率在98.6%～100.9%之间,RSD为3.1%～3.5%之间。该方法已用于葛根中异黄酮类物质的分离检测。     

高效液相色谱法测定3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶抑制剂的活性

通过检测反应体系中烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(NADPH)浓度的变化,建立了测定HMG-CoA还原酶抑制剂活性的HPLC法.使用Hypersil C18色谱柱,流动相V(K2HPO4-KH2PO4)∶ V(甲醇)＝4∶ 1, pH 7.2,流速1 mL/min,柱温25 ℃,检测波长337 nm.在NADPH浓度为0.5～100 μmol/L时,其浓度与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9995);检出限为0.01 μmol/L;方法对NADPH的回收率为99.8%～100.7%;相对标准偏差(RSD)为1.04%～1.25%(n=5).     

HPLC-UV检测病人胃粘膜活检组织中8-羟基脱氧鸟苷

采用HPLC-UV与反相C18柱,以50 mmol/L的KH2PO4(pH 5.5)-10%的甲醇(V/V)作为洗脱液,同步快速检测了21位健康人与90位病人胃粘膜活检组织中的脱氧鸟苷(deoxyguanosine,dG)和8-羟基脱氧鸟苷(8-Hydroxydeoxyguanosine, 8-OHdG)的量.方法线性范围分别为3.0～400 μg/mL、0.2～10μg/mL,检出限可分别达到1.0、0.1 μg/mL(S/N=3).实验发现病人胃粘膜活检组织中的8-OHdG量远远高于健康人,此结果在临床早期诊断相关疾病方面具有很高的应用价值.     

高效液相色谱法测定保健食品和饮料中的阿斯巴甜

建立了保健食品和饮料中的甜味剂阿斯巴甜的高效液相色谱快速测定方法.固体样品用纯水超声提取;饮料样品超声脱气.取适量提取液或饮料样品,经0.45 μm滤膜过滤后,取20 μL进样色谱柱分析.色谱条件:分离柱为C18柱(250mm×4.6 mm i.d.,10μm),柱温35℃,流动相为V(10 mmol/L KH2PO4,pH 3.50):V(乙腈)=80:20,流速1 mL/min,检测波长210 nm.本法线性范围为0～16 μg,最低检出量为0.0024 μg,回收率为92.3%～102%.相对标准差小于1.6%.本法准确度和精密度均能满足保健食品和饮料中阿斯巴甜测定的要求.     

RP-HPLC法测定唐古特铁线莲中芦丁的含量

建立了唐古特铁线莲中芦丁含量测定的RP-HPLC方法.色谱条件:采用C18柱 (4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相:V(甲醇)∶V(0.4% H3PO4)=55∶45,流速:1.0 mL/min,柱温:30 ℃,检测波长:360 nm,芦丁在0.24～1.2 μg范围内成良好的线性关系,r=0.9992,回收率RSD=1.0%,对青海省不同地区唐古特铁线莲中芦丁进行了定量分析,测定结果:不同产地该药材中芦丁的含量有较大差异,含量在0.119%～0.317%之间.     

反相离子对液相色谱法同时测定11种氟喹诺酮类药物的研究

建立了高效液相色谱-荧光法同时测定11种氟喹诺酮类药物的分析方法.主要研究了流动相、流动相配比及流动相的pH对氟喹诺酮分离的影响.确定了液相色谱分析最佳条件.分离条件为:Xbridge Shield RP C18柱,以V(0.10%三氟乙酸)∶V(乙腈)∶V(甲醇)=89∶4∶7为流动相;检测波长为λex=280 nm和λem＝450 nm.方法检出限为:诺氟沙星、环丙沙星、培氟沙星和恩诺沙星0.007μg/mL,单诺沙星0.002 μg/mL,沙拉沙星和氧氟沙星为0.04 μg/mL,二氟沙星和奥比沙星为0.02 μg/mL,依诺沙星、麻保沙星为0.4 μg/mL,各组分回收率在97%～100.2%,相对标准偏差为0.2%～2.9%.     

毛细管气相色谱法测定杭白菊中乐果的残留量

采用乙腈作为提取剂 ,选用DB - 170 1型毛细管色谱柱 (30m× 0 .32mmi.d .,0 .2 5 μm)和火焰光度检测器 ,以毛细管气相色谱法测定杭白菊中乐果的残留量。线性范围为 0～ 12 .0 μg/mL ,线性回归方程为A =4 4 7.0c - 13.4 4 ,相关系数r =0 .999 88,检出限为 2 .6 8× 10 -2 μg/mL ,测定结果的相对标准偏差为 1.3%～ 3.1% ,回收率为 96 .3%～ 10 3.9%。     

基于超高效合相色谱对黄芪中5种主要黄酮类化合物的快速检测

建立了利用超高效合相色谱法(Ultra performance convergence chromatography,UPC2)快速分离和测定黄芪中5种主要黄酮类化合物(毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮苷、美的紫檀素、芒柄花苷、芒柄花素)的方法.黄芪样品采用80％乙醇提取后,以超临界CO2-0.2％ H3PO4-甲醇溶液为流动相,梯度洗脱,色谱柱为Waters ACQUITY UPC2 CSH柱(100 mm×3.0 mm,1.8 μm),柱温为40℃,流速为0.4 mL/min,进样量为1μL,检测波长为280 nm.整个分析过程仅需15 min,分析速度是传统液相色谱的3倍以上.结果表明:毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮苷、美的紫檀素、芒柄花苷与芒柄花素的检出限及定量限范围分别在0.3 ～0.5 mg/kg和1.0～2.0 mg/kg之间,5种黄酮类成分的加标平均回收率均高于99.7％,相对标准偏差(RSD)小于2.2％(n=6);在最优条件下,对13批不同产地的黄芪进行检测,毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮苷、美的紫檀素、芒柄花苷与芒柄花素的含量范围分别在4.8 ～ 102 mg/kg、14 ～ 277 mg/kg、0 ～ 135 mg/kg、5.3 ～ 119 mg/kg及2.8 ～ 41 mg/kg之间;本方法简便快速,重复性良好,结果准确可靠,可用于黄芪药材中5种主要黄酮类成分的含量测定.     

高效液相色谱柱后衍生测定鸡组织中甲基盐霉素残留量

建立了鸡组织中甲基盐霉素的高效液相色谱柱后衍生化分析方法.样品经异辛烷提取,离心后上层有机相过硅胶固相萃取小柱,洗脱液浓缩后用V(甲醇)∶ V(水)=90∶ 10混合液溶解.采用Inertsil ODS-3 C18柱,以V(甲醇): V(乙酸)∶ V(水)=94∶ 3∶ 3为流动相,香草醛为衍生剂进行高效液相色谱柱后衍生分析,520 nm检测,外标法定量.方法检出限为6 μg/kg; 定量限为20 μg/kg; 添加浓度在20～1800 μg/kg范围内,平均添加回收率为76.4%～93.1%; 批内相对标准偏差(RSD)在2.6%～8.9%之间; 批间相对标准偏差(RSD)在4.7%～9.7%之间.样品浓度在0.07～10.0 mg/L范围内与峰面积呈良好的线性关系,r>0.9993.     

高效液相色谱-质谱联用技术测定人血浆中的西替利嗪

建立了人血浆中西替利嗪的液相色谱-质谱联用测定方法.血浆样品调至pH 6,经V(乙酸乙酯):V(CH2Cl2)＝4:1液-液提取后,以Agilent Zorbax SB-C18(2.1 mm×150 mm i.d.,3.5 μm)柱为色谱柱,流动相为V(乙腈):V(1%甲酸水)＝55:45溶液,流速为0.5 mL/min,柱温:25 ℃,进样量:5 μL,在Agilent 1100 LC/MSD XCT离子阱质谱仪上,以多重反应离子(MRM)方式进行定量分析,用于监测的离子为m/z 389→201(西替利嗪)和m/z 515→497(替米沙坦,内标物).西替利嗪的检出限为0.50 μg/L(S/N=3),线性范围为2.5～400 μg/L,方法回收率在82.0%～86.7%之间(n=5),精密度与准确度符合生物样品分析要求.该法可用于西替利嗪临床血药浓度和药代动力学研究.     

RP-HPLC测定反式-2-硝基乙烯基噻吩的含量

建立了反相高效液相色谱测定反式-2-硝基乙烯基噻吩含量的方法.采用shim-pack C18柱(5 μm,4.6 mm i.d.×250 mm),流动相为V(乙腈)∶V(pH 3的KH2PO4水溶液)=50∶50,流速为1.0 mL/min,检测波长为210 nm.外标法定量,反式-2-硝基乙烯基噻吩在0.002～0.1 mg/mL浓度范围内呈良好的线性关系,线性回归系数(r)为0.9998,平均回收率为99.80%,RSD=0.67% (n=9).     

离子对色谱法测定生产己内酰胺中副产环己酸磺酸

建立了反相离子对色谱内标法测定甲苯法生产己内酰胺中副产环己烷羧酸磺酸含量.色谱条件为:色谱柱Agilent Hypersil ODS (4.0 mm×250 mm,5μm),内标物甲苯-4-磺酸,流动相为37.5%甲醇(V/V),10 mmol/L四丁基溴化铵,25 mmol/L KH2PO4,H3PO4调节pH 2.5～3.5,柱温30 ℃,流速1.2 mL/min,检测波长230 nm.结果表明:线性范围0.1006～3.0192 mg/mL,相关系数为0.9994,回收率99.51%～102.34%,RSD为0.4950%～0.5270% (n=6).     

高效液相色谱-串联质谱法测定猪肉中泰拉霉素残留

建立了高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)测定猪肉样品中新型兽药泰拉霉素残留的方法.样品用V(甲醇): V(0.1% H3PO4)=70: 30混合溶液提取,经离心后用PCX固相萃取小柱净化, 以SymmetryC8色谱柱为分离柱,在串联质谱多反应监测(MRM)模式下检测,内标法定量.方法的线性范围为10～500 μg/kg,检出限为5.0 μg/kg,在3个浓度水平(10,20和50 μg/kg)进行添加实验,平均回收率为93.1%～105.5%; 批内相对标准偏差为1.5%～4.6%; 批间相对标准偏差为1.8 %～5.6%.     

柱前衍生-高效液相色谱法快速测定膨化食品中的甜蜜素

建立了一种柱前衍生-高效液相色谱法快速测定膨化食品中甜蜜素的方法.用水直接提取膨化食品中的甜蜜素,在强酸环境中用次氯酸钠衍生处理,生成具有较强紫外吸收的N,N-二氯环己胺,通过HPLC,在C18柱上用V(乙腈):V(水)=70:30为流动相,在314 nm处,外标法定量.在1～100 μg/mL范围内线性良好.在0.1,0.2和0.4 mg/g 3个添加水平下回收率95.4%～118.8%之间,RSD%在0.96%～4.2%之间.     

毛细管色谱法测定芳香异羟肟酸二丁基锡中有机溶剂残留量

建立了毛细管气相色谱法测定芳香异羟肟酸二丁基锡中的有机溶剂残留量.采用HP-5 (5%苯基甲基聚硅氧烷)毛细管色谱柱,FID检测器.载气为N2,柱温为45 ℃,检测器温度为160 ℃,流速为1.2 mL/min,分流比为20∶1,四氢呋喃为内标进行测定.结果表明: 甲醇、无水乙醇、三氯甲烷、正己烷、苯的线性范围分别为: 7.9～63.2 μg/mL (r=0.9991),8.69～69.52 μg/mL (r=0.9999),19.77～158.16 μg/mL (r=0.9990),295.6～2364.8 μg/mL (r=0.9996),8.74～69.92 μg/mL (r=0.9996),平均回收率分别为104.2%、 98.8%、 97.9%、 103.1%和102.0%,RSD分别为1.6%、 2.3%、 2.1%、 3.8%和1.9% (n=9);检出限分别为3.16、 3.47、 23.90、 1.97和0.87 ng.方法可用于有机溶剂残留量的测定.