钍试剂Ⅱ与蛋白质作用的共振胱散射特征及微量蛋白质的光散射测定

研究了钍试剂Ⅱ与蛋白质在PH4．3条件下作用的共振光散射特征，并以此建立了测定微量蛋白质的新方法。用普通荧光分光光度计测量了这一体系的共振光散射光谱，考察了影响因素。在最佳实验条件下，牛血清白蛋白（BSA）浓度在0mg/L-10.0mg/L范围内成线性关系，方法已用于尿中微量蛋白质的测定。     

用铬黑T作为共振光散射探针测定蛋白质

研究了金属指示剂铬黑T（EBT）作为共振光散射探针测定蛋白质的分析方法。实验表明，在pH=4.10的Britton-Robinson缓冲溶液条件下，铬黑T只有极弱的光散射，它与蛋白质结合后有强烈的共振光散射作用。在λ=375nm处，光散射强度最大，光散射强度与蛋白质的浓度成正比。据此建立了一种测定蛋白质的新方法。该方法简便、快速、灵敏度高，对HSA的检出限达到39μg/L;线性范围为0－15mg/L，用于人体血清样品的分析并用考马斯亮蓝法比较，取得了令人满意的结果。同时亦研究了牛血清白蛋白（BSA）、λ球蛋白、鸡蛋白蛋白、溶菌酶与染料EBT之间的作用。比较了2种不同类型的荧光仪器绘制的共振光散射光谱，并探讨了共振光散射的机理。     

同多酸和染料探针共振光散射法测定蛋白质

在酸性条件下,铬黑T、钼酸铵与蛋白质形成聚合物,使体系的共振光散射明显增强。据此建立了利用共振光散射技术测定总蛋白含量的新方法。在最佳条件下,体系的最大散射峰位于555nm处。共振光散射增强的程度与蛋白质的浓度呈良好的线性关系。牛血清白蛋白和人血清白蛋白的线性范围分别为0.20～10.0μg/mL和0.10～8.0μg/mL,检出限为0.050μg/mL和0.039μg/mL。方法已用于人血清样品的分析,并与考马斯亮蓝的测定结果进行了比较,两者无显著性差异。     

蛋白质-四羧基铜酞菁体系的共振散射行为及其分析应用

在pH 3.0的Clark-Lub's 缓冲溶液中,蛋白质与四羧基铜酞菁(CuPc(COOH)4)作用,使体系的共振光散射增强,在λ=389 nm处光散射强度最大.增强作用的强弱与蛋白质的含量成正比,据此建立了共振光散射测定蛋白质的新方法.此方法对牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)、免疫球蛋白G(IgG)、鱼精蛋白(Protamine)、血清总蛋白(TP)的测定范围分别为0.05～1.60 mg/L、 0.025～1.60 mg/L、 0～1.45 mg/L、 0.1～1.50 mg/L、 0～1.60 mg/L,相应检出限分别为1.12×10-2 mg/L、 1.11×10-2 mg/L、 1.95×10-2 mg/L、 3.61×10-3 mg/L、 4.34×10-3 mg/L.方法应用于实际人血清样品中总蛋白的测定,结果与考马斯亮蓝法基本一致.     

偶氮洋红G-SDS体系共振光散射法测定蛋白质

在十二烷基磺酸钠存在下及pH 1．98的Brittion-Robinson介质中,蛋白质与偶氮洋红G作用形成复合物,使最大波长421nm的共振光散射光谱得到加强,根据其共振光散射的增强程度,可定量测定蛋白质。十二烷基磺酸钠的加入,使灵敏度提高2．7倍。牛血清白蛋白、γ-球蛋白的线性范围分别为0.04～1．6、0．12～3．8mg／L,检出限分别为5．3、8．5μg/L。用于人血清、牛奶、豆浆、尿液中总蛋白质的测定,结果与经典的考马斯亮蓝法一致。     

四羧基镍酞菁共振散射法测定蛋白质

建立了一种测定蛋白质的新方法．在pH3．6的Britton-Robinson（B-R）缓冲溶液中,蛋白质与四羧基镍酞菁NiPc（COOH）4发生相互作用,使体系在λ=388nm处的共振散射（RLS）增强,并且增强的散射强度（IRLS）与蛋白质的含量成比例,据此利用四羧基镍酞菁NiPc（COOH）4为光谱探针共振散射法测定人血清中的总蛋白质,同时优化了体系光散射检测的实验参数．在最佳的实验条件下,对牛血清白蛋白（BSA）、人血清白蛋白（HSA）、人血清总蛋白（TP）的线性范围分别为0．00～1．20mg／L、0．00～1．00mg／L、0．00～1．00mg／L,相应检测限分别为5．97×10^-4mg／L、2．90×10^-4mg／L、4．76×10^-4mg／L．将该方法应用于实际人血清样品中总蛋白的测定,结果与考马斯亮蓝法比较,令人满意．     

甲基紫6B共振光散射法测定脱氧核糖核酸

基于甲基紫6B与脱氧核糖核酸在酸性条件下共振光散射的增强效应,建立了测定DNA的共振光散射法。在pH值为2．0～3．0的三羟甲基氨基甲烷一盐酸缓冲溶液中,甲基紫6B与fsDNA、ctDNA分子作用后共振光散射增强,其强度增加值与DNA的浓度呈线性关系,线性范围分别为0～1．0、0～1．5mg／L,相关系数分别为0．9993、0．9997,检出限分别为15．3、12．2ug／L,用于DNA合成样品的测定,测定结果的精密度、准确度较高。     

亮黄共振光散射法测定微量蛋白质

基于蛋白质对生物染色剂亮黄的共振光散射的增强效应,拟定了一种测定蛋白质的共振光散射法。在pH 2.5的Britton Robison缓冲溶液中,亮黄在510 nm处的共振光散射增强与蛋白质浓度呈线性关系。对牛血清白蛋白,线性范围为0.25~11.5 mg·L-1,检出限48μg·L-1。方法用于合成样品和人尿样品中蛋白质的测定,结果满意。     

流动注射-共振光散射联用技术测定注射液中肝素的含量

在近中性介质中,亚甲基兰与肝素作用产生共振光散射（BLS）增强信号,最大散射峰位于365．0nm处,增强的共振光散射强度（DIRLS）与肝素浓度具有线性关系,据此建立了流动注射．共振光散射联用技术测定痕量肝素的新方法。在pH为7．96,离子强度为0．0275mol／L的载流中加入肝素后,在365．0nm处产生增强的RLS信号。采用时间扫描测定该增强RLS强度,在最佳实验条件下,可检测1～20mg／L肝素,检出限为8．41mg／L。对浓度为4．0mg／L的肝素钠标准液平行测定11次的相对标准偏差为3．2％。用于注射液中肝素含量的测定,RsD小于2．3％。     

木质素桃红与蛋白质作用的共振光散射研究

研究了木质素桃红与蛋白质结合的共振光散射光谱. 实验结果表明, 在pH 2.56的酸性介质中, 木质素桃红与蛋白质发生静电作用产生以282.0、 346.0、 420.0 nm以及570.0 nm为特征峰的共振光散射（RLS）增强光谱. 在570.0 nm波长光激发下, 蛋白质的质量浓度与增强共振光散射强度ΔIRLS呈线性关系, 对BSA和HSA的检出限分别为39.0和22.3 ng/mL. 方法已用于尿样中总蛋白质分析.     

刚果红-OP-蛋白质体系共振光散射特性的研究及牛尿中白蛋白的测定

蛋白质的测定对于生命科学的研究、临床诊断和疾病的治疗均有十分重要的意义~([1]).本文研究了刚果红(Congo Red,CR)与牛血清白蛋白的相互作用.实验表明:在非离子表面活性剂聚乙二醇辛基苯基醚(乳化剂OP)的存在下及pH=4.35的B-R缓冲介质中,蛋白质与刚果红形成复合物,使573 nm处的共振散射光谱得到加强,并且增强的共振光散射信号与蛋白质的浓度成正比.据此,建立了共振光散射技术测定微量蛋白质的新方法.     

钙试剂-蛋白质体系的共振光散射光谱研究

基于蛋白质对钙试剂共振光散射的增强作用,拟定了一种测定蛋白质的共振光散射法。在pH 4.00的水溶液中,钙试剂在595 nm处的共振光散射增强与蛋白质浓度呈线性关系。此方法对人血清白蛋白、牛血清白蛋白的检出限分别可达0.068和0.085μg/mL。同时得到钙试剂与人血清白蛋白和牛血清白蛋白的结合常数(K)以及结合位点数(n)分别为8.15×104mol/L,0.18和7.67×104mol/L,1.5。     

刚果红共振光散射法测定蛋白质

本文研究了生物染料刚果红(Congo red)与人血清白蛋白(HSA)作用的共振光散射光谱,pH为4．35的溶液中,刚果红与人血清白蛋白作用导致在575m处共振光散射明显增强,且共振光散射信号值与蛋白质的浓度具有线性关系。     

藉L-半胱氨酸包覆的ZnS纳米粒子的共振光散射定量分析蛋白质

合成和表征了功能性L-半胱氨酸包覆的ZnS纳米粒子。在pH5．12的NaAc-HAc溶液介质中,L-半胱氨酸包覆ZnS纳米粒子于波长308．0nm处出现共振光散射峰。一定量蛋白质的加入能明显增强体系的共振光散射,且峰强度增加值与蛋白质浓度间存在良好线性关系,据此建立了一种灵敏的测定微量蛋白质的方法。用L-半胱氨酸包覆ZnS纳米粒子作为探针,不仅克服了有机染料可能出现的光漂白等缺点,而且本身不具毒性。该法用于人血清试样中总蛋白的测定,其结果与临床数据一致。     

PbS-PAA复合纳米粒子共振光散射法测定蛋白质

基于蛋白质对聚丙烯酸修饰的纳米PbS复合粒子共振光散射的增强效应,建立了一种新的测定蛋白质的共振光散射法。在超声辐射下,用过二硫酸钾(KPS)做引发剂,用原位聚合的方法使丙烯酸原位聚合在纳米PbS上。所得的复合纳米粒子表面就覆盖了大量的羧基(—COOH),不仅增加了复合纳米粒子的水溶性和稳定性,而且使其具有良好的生物相容性。在pH=0.91的NaAc-HCl溶液中,复合纳米粒子与蛋白质结合后,使得其共振光散射强度剧增,且其增强的程度与所加入的蛋白质浓度成线性关系。在λ=385 nm处,共振光散射强度最大。在最佳条件下,建立了工作曲线,线性范围为0.2~20μg.mL-1(HSA),0.2~20μg.mL-1(Humanγ_IgG),0.15~18μg.mL-1(BSA);检出限分别为25、14、27 ng.mL-1。该法简便、快速、灵敏度高。     

盐酸雷尼替丁的共振光散射新体系研究及其分析应用

在酸性条件下,盐酸雷尼替丁、铬黑T和钼酸铵通过静电作用形成三元离子缔合物,使体系的共振光散射明显增强.据此建立了共振光散射测定盐酸雷尼替丁的新方法.在最佳条件下,体系的最大散射峰位于363 nm处.共振光散射增强的程度与盐酸雷尼替丁的浓度呈良好的线性关系.方法的线性范围在0.015～0.165 mg/mL,检出限为9.5×10-3 mg/mL.将该方法用于市售盐酸雷尼替丁片的测定,并与药典方法进行对照,证明两种方法之间无显著性差异.     

依波西隆蓝与蛋白质作用的共振光散射光谱及其分析应用

微量蛋白质对依波西隆蓝的共振光散射产生增强作用，且增强程度与蛋白质浓度有良好的线性关系，由此建立了测定蛋白质的灵敏共振光散射分析方法。利用该方法测定合成样品和血清样品中的蛋白质，均获得了可靠的分析结果。     

共振光散射探针法测定壁画胶结材料中蛋白质含量

用酸性铬蓝K(ACBK)为共振光散射探针,对壁画含不同颜料的胶结材料中的蛋白质含量进行了定量测定在pit3．96乙酸-乙酸钠缓冲溶液条件下,在λ=345nm处,以生血清白蛋白(BSA)为标准样品绘制工作曲线测定敦煌壁画中含不同颜料的胶结材料中蛋白质结果分别为：白色颜料1．5361μg／mg;绿色颜料1．5714μg／mg：蓝色颜料1．6801μg／mg;棕色颜料1．8756μg／mg和红色颜料3．2673μg／mg．对BSA测定的线性范围为0．13～10．88μg／L。该方法简单、快速、灵敏度高,平行测定的相对标准偏差(RSD)为3．8％,蛋白质的加标回收率为95％～107％。     

溴化十六烷基吡啶的双波长共振光散射比率法测定

应用双波长共振光散射（DW—RLS）比率法研究了溴百里酚蓝（BTB）与阳离子表面活性剂溴化十六烷基吡啶（CPB）的相互作用。在pH1．5的乙酸钠-HCl缓冲溶液中,CPB本身的共振光散射很弱,BTB有一定的共振光强度,加入CPB后BTB的共振光信号显著增强,最大散射峰位于523nm,且散射光强度与CPB的浓度呈线性关系,可以通过单波长共振光散射法检测CPB,CPB质量浓度的线性范围和检出限分别为0．05—0．60mg／L和42μg／L。使用248nm和424nm两波长处散射强度比值（I248／I424）代替单波长处的共振光散射强度测定CPB,其线性范围和检出限分别为0．03～1．0mg／L和3μg／L。与共振光散射法相比较,DW—RLS比率法受酸度、离子强度等环境条件影响较小,并且有更宽的线性范围和更低的检出限,应用于合成和实际水样中CPB的测定,获得较好的结果。     

小檗碱共振光散射法测定脱氧核糖核酸

研究了小檗碱与DNA作用的共振光散射光谱，在pH＝2.0-2.8的范围内，DNA的加入导致小檗碱共振光散射的增强，在308nm处，存在一共振光散射增强峰，其强度与DNA的浓度呈线性关系，据此建立了一种测定DNA的共振光散射法。该方法的线性范围为0－600μg/L，相关系数为0.9972，检出限为19.9μg/L。将该方法用于混合样品中DNA的测定。结果令人满意。