维生素C磷酸酯镁的稳定性及其清除超氧离子自由基的动力学

维生素C磷酸酯镁(magnesium ascorbyl phosphate,MAP)是维生素C(VC)的替代品,由于其特有的性质而广泛应用在食品添加剂中.对比测定了MAP和VC清除超氧阴离子自由基(O2-·)的能力,研究了VC和MAP在不同温度和不同保存时间后清除O2-·自由基的能力和稳定性;并拟合了不同温度下储存不同时间后MAP的抗氧化能力.结果表明,MAP在20℃下保存20d对O2-·的清除能力仅减弱20%左右,半衰期为53d;但VC在20℃下保存10d后清除O2-·的能力几乎完全消失.与此同时,不同温度下储存不同时间后MAP清除超氧阴离子自由基的反应为一级反应,采用拟合方程计算的抗氧化能力理论值和实验值基本相符.     

蒙药漏芦花多糖提取工艺及其抗氧化抗菌活性研究

本文优化了蒙药漏芦花多糖的提取工艺,并评价其抗氧化和抗菌活性。以超声功率、超声温度、超声时间和浸泡时间为影响因素,多糖提取率为评价指标,在单因素实验的基础上利用正交试验优化提取工艺,测定漏芦花多糖对DPPH自由基、羟基自由基清除效果,检测其抗氧化活性,涂布平板法测定多糖抗菌活性。超声波辅助法提取蒙药漏芦花多糖的最佳工艺条件为超声功率180W,超声温度70℃,超声时间30min,浸泡时间40min,在此条件下多糖得率为1.125%。抗氧化实验表明,漏芦花多糖浓度在0.5～2.5mg·mL~(-1)范围内,随着漏芦花多糖浓度增加,总还原能力不断增强;其体外清除DPPH自由基能力也随浓度增大而增强,清除率最高达72.98%;当多糖浓度为1.5mg·mL~(-1)时,漏芦花多糖体外清除羟基自由基能力最强,为7.24%。漏芦花多糖浓度为12.8mg·mL~(-1)时,对沙门氏菌的抑菌圈直径为9.72mm。超声法提取蒙药漏芦花多糖操作简便、准确、灵敏、重现性好,漏芦花多糖抗氧化能力良好,且对沙门氏菌有一定的抑菌效果。     

Enterobacter Cloacae Z0206细菌胞外富硒多糖的抗氧化活性

利用产多糖菌Enterobacter cloacae Z0206(E.cloacaeZ0206)的深层发酵法制备了E.cloacae Z0206细菌富硒多糖;测定了其还原能力和清除1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl(DPPH)自由基、超氧阴离子及羟自由基的能力.结果表明,通过深层富硒发酵、醇沉离心等制备富硒多糖SEPS的产量为9.28g/L,富硒量为2.314mg/g;E.cloacae Z0206富硒多糖对DPPH自由基和羟自由基具有较好的清除作用,在浓度为5g/L时对DPPH自由基和羟自由基的清除率分别为80.35%和84.26%,并具有较强的还原能力,但其对超氧阴离子自由基的清除能力较差.     

梁王茶茎皮多糖提取工艺的优化及其抗氧化活性研究

本文为优化梁王茶茎皮多糖(PND)的提取工艺,并评价其抗氧化活性,以多糖提取率为评价指标,在单因素实验的基础上采用响应面法对超声时间、超声温度和超声功率三个影响梁王茶多糖提取工艺的主要因素进行优化;再通过DPPH、ABTS自由基清除实验和FRAP法评估其抗氧化能力。结果表明,超声提取梁王茶茎皮多糖的最佳工艺条件为超声时间120 min、超声温度60℃、超声功率125 W、浸泡时间20 min、液料比10∶1及乙醇浓度80%,该条件下多糖提取率为4.780%。抗氧化实验表明,梁王茶茎皮多糖浓度在1～10 mg·mL~(-1)范围内,随多糖浓度增加DPPH自由基清除能力增强,IC_(50)值为7.591±0.205 mg·mL~(-1);以Trolox当量来表示其ABTS自由基清除能力为1.464±0.194 mmol Trolox/g PND;以Fe~(2+)当量来表示其还原能力为0.302±0.020 mmol Fe~(2+)/g PND。     

白术多糖指纹图谱和抗氧化活性的谱效关系分析北大核心CSCD

将高效液相色谱(HPLC)指纹图谱、抗氧化活性研究与多元统计分析相结合,对不同产地的38批白术多糖进行质量评价.以三氟乙酸水解白术多糖,用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮进行衍生化,采用高效液相色谱法测定其中单糖的衍生物,得到指纹图谱.以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除能力、羟自由基清除能力和Fe^(3+)总还原能力为指标测定抗氧化活性,并对结果进行相似度分析、层次聚类分析和偏最小二乘法-判别分析等多元统计分析.结果表明,白术多糖指纹图谱鉴别了5个共有峰,分别为鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖.基于多元统计分析,浙江、安徽、河北和四川的白术样品分离显著.此外,选择半乳糖醛酸和半乳糖作为潜在的化学标记物,DPPH自由基清除能力对应的抗氧化活性可作为辅助鉴别的候选检测指标.     

红花黄色素抗氧化活性研究

通过考察红花黄色素(SY)及其主要化学成分对羟基自由基介导2-脱氧核糖氧化降解的抑制作用,以及对1,1-二苯基-2-苦肼基自由基(DPPH·)的清除能力,探究SY的体外抗氧化活性及其抗氧化的主要有效成分.通过Fenton反应产生羟基自由基,用紫外分光光度计检测了SY及其主要化学成分对2-脱氧核糖降解的抑制作用和对DPPH·的清除能力,同时对红花黄色素B(SYB)抑制2-脱氧核糖降解的作用机制做了初步研究.结果表明SY抑制Fenton反应对2-脱氧核糖的氧化降解的IC50为256.79 μg/mL,对DPPH·清除的IC50值为27.15μg/mL.羟基红花黄色素A(HSYA)和SYB是SY中抗氧化的两个有效成分,抑制2-脱氧核糖的氧化降解的IC50分别为220.68 μg/mL和207.01μg/mL;对DPPH·清除的IC50值分别为55.81 μg/mL和41.25μg/mL.SYB对2-脱氧核糖氧化降解的抑制作用机理研究表明,SYB除了对Fenton反应产生的羟基自由基具有直接清除作用外,又可通过与Fe2+离子的络合作用而阻断Fenton反应产生羟基自由基.由此可知SY具有明显的体外抗氧化活性,SYB和HSYA为其主要抗氧化活性成分.     

超声波辅助提取麻疯树果壳多糖及其体外抗氧化性研究

以麻疯树果壳为原料,采用超声波辅助法提取麻疯树果壳中的多糖。在单因素实验的基础上,利用正交实验优化提取条件,并采用还原能力、DPPH·有机自由基的清除能力、羟自由基的清除能力作为麻疯树果壳多糖的体外抗氧化作用评价的3个指标。结果表明,超声波辅助提取麻疯树果壳多糖的最佳工艺条件为超声功率160 W,提取温度80℃,提取时间1.0 h,料液比1∶25(g·m L-1),在此条件下多糖得率为5.96%。抗氧化实验表明,麻疯树果壳多糖具有良好的还原能力,且清除·OH及DPPH·的能力与浓度呈正相关。当麻疯树果壳多糖浓度为0.5 mg·m L-1时,对·OH及DPPH·的清除率分别达到70%和60%。因此,该本方法操作简便、高效,测定快速。     

新型姜黄素类似物的微波合成及其抗氧化活性

采用微波法,取代苯甲醛分别与环戊酮和环己酮经克莱森-斯密特缩合反应制得中间体2,6-双苯亚甲基环己酮(2a~2e)和2,5-双苯亚甲基环戊酮(5a);2a~2e或5a分别与硫脲或尿素经Biginelli反应合成了8个新型的姜黄素类似物(3a~3e,4a,4c和6a),其结构经1H NMR,13C NMR,IR和MS表征。利用DPPH法比较3~6与姜黄素的抗氧化能力。实验结果表明:3~6的抗氧化能力均比姜黄素母核结构高;3比4和6的自由基清除能力强;随用药量增大,抗氧化能力呈现先增强后下降的趋势,并在0.09 mg·mL-1~0.12 mg·mL-1自由基清除率达最大。     

响应面法优化微波提取夏枯草多糖及其抗氧化活性

以夏枯草多糖为研究对象,在单因素实验的基础上,采用响应面法对夏枯草多糖的微波提取工艺进行优化,测定其抗氧化活性。结果表明,夏枯草多糖的最佳提取条件为:液料比29∶1(mL·g~(-1)),乙醇体积分数68%,微波功率295W,微波时间8min,在该条件下夏枯草多糖得率为5.28%,与理论值(5.19%)的相对误差为1.73%。在此条件下得到的多糖提取物具有较好体外抗氧化活性,对DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子具有不同的清除能力,半数抑制浓度IC_(50)分别为0.58、0.49和1.19mg·mL~(-1 )。     

新型2,5-二取代-1,3,4-噻二唑衍生物的合成与生物活性

将自行合成的重要中间体2-氨基-5-取代-1,3,4-噻二唑(2)和2-氯硒基苯甲酰氯(6)反应,合成出了16个新颖的含苯并异硒唑酮结构的2,5-二取代-1,3,4-噻二唑衍生物7a~7p,利用IR,1H NMR和元素分析对目标产物进行了结构表征.评价了目标化合物的生物活性.实验结果表明,部分化合物具有抑制细胞分裂周期25 B磷酸酯酶(Cdc25B)的活性(IC50=1.67~6.66μmol·L-1).所有化合物对蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B(PTP1B)均有抑制活性(IC50=0.73~4.50μmol·L-1),并且部分化合物的抑制活性高于阳性对照药物齐墩果酸(IC50=1.90μmol·L-1).化合物7k对人结肠癌(HCT-8)细胞具有体外抗肿瘤活性(IC50=12.54μmol·L-1).部分化合物对羟自由基(HO·)和超氧阴离子(O·-2)具有中等的清除能力,但对DPPH·均无清除能力.     

7-取代三唑硫乙氧基黄酮衍生物的合成及生物活性

7-羟基黄酮与过量1,2-二溴乙烷反应得到7-溴乙氧基黄酮,将其分别与3-取代-4-氨基-1,2,4-三唑-5-硫酮肉桂醛席夫碱、3-取代-4-苯基-5-巯基-1,2,4-三唑、3-(α-萘亚甲基)-5-巯基-1,2,4-三唑及3-巯基-5-氨基-1,2,4-三唑肉桂醛席夫碱反应,得到4类共16个7-三唑硫乙氧基黄酮类衍生物.采用红外光谱(IR)、核磁共振氢谱(1H NMR)、质谱(MS)及元素分析(EA)等方法对化合物的结构进行了确证.测定了目标化合物清除超氧自由基(O-·2)、羟自由基(·OH)和2,2-二苯基-1-苦味酰基自由基(DPPH·)的活性及总还原能力,并测定了其抗菌活性.结果表明,多数化合物在0.5 mg/m L浓度时具有抗DPPH·活性,其中7-(5-苯亚甲基-4-苯基烯丙亚胺基-1,2,4-三唑-3-硫乙氧基)黄酮(1i)活性较强;多数化合物表现了较好的抑菌活性,其中7-(5-苯亚甲基-4-苯基-1,2,4-三唑-3-硫乙氧基)黄酮(2c)对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和黑曲霉均具有较强的抑制作用.     

氧化型谷胱甘肽对还原型谷胱甘肽清除自由基的协同作用

利用分光光度法和基质辅助飞行质谱法研究了谷胱甘肽对1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH)自由基的清除作用.通过比较不同浓度和不同配比的还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)以及Na2SeO3混合溶液的自由基清除率,发现GSH/GSSG的配比对自由基清除率有明显影响.当GSH/GSSG的配比大于50∶ 1时,自由基清除率比同浓度的GSH大,且自由基清除率随GSH和GSSG的绝对浓度的增加而明显增加,说明适量的GSSG可协同催化GSH清除自由基过程.质谱测定结果表明: 此协同作用与GSSG 参与自由基清除过程中的自由基反应有关.Na2SeO3对GSH的清除自由基的影响主要是通过与GSH反应生成GSSG来调控GSH/GSSG配比的结果.通过测定和分析一定配比的GSH+GSSG混合溶液与DPPH作用前后的质谱图,提出了少量的GSSG共存下,GSH催化清除DPPH自由基的作用机理.     

Moracin M的简便合成及其生物活性

以4-甲氧基水杨醛和3,5-二甲氧基溴化苄为原料,经取代、缩合和水解等3步反应,以38%的总收率合成了Moracin M。分别采用DPPH自由基清除法、小鼠巨噬细胞RAW264.7模型初步测试了Moracin M的抗氧化活性和体外抗炎活性,结果表明该化合物对DPPH自由基的清除能力很强(IC_(50)=0.0433 mg/mL),优于阳性对照药V_C,且具有一定的抗炎活性。     

3-氨基-7,8-二甲氧基香豆素及其衍生物的合成及抗氧化活性

合成了3-氨基-7,8-二甲氧基香豆素及其衍生物共11个化合物,其中3个化合物(2b、2d、2e)为新型香豆素芳酰胺类化合物。 通过猝灭1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2'-联氮二(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐阳离子自由基(ABTS^+·)和羟自由基实验考察了所合成化合物的抗氧化活性,结果表明化合物2b对DPPH自由基、羟自由基的清除能力超出或接近对照品维生素C,而衍生物2a、2b和2c的抗氧化活性优于母体。 故酰化可提高3-氨基-7,8-二甲氧基香豆素的抗氧化性能,尤其是普遍提高了羟基自由基的清除能力。     

景天三七总多酚提取工艺的优化及活性研究

采用超声提取景天三七中的多酚,并利用Box-Behnken响应面法对影响景天三七总多酚提取率的因素(液料比、乙醇浓度、超声时间、超声温度)进行了优化,并以DPPH自由基和ABTS自由基清除能力为评价指标,研究景天三七总多酚体外抗氧化活性。结果显示,最佳的提取条件为乙醇浓度63%,液料比36∶1(mL·g~(-1)),超声温度65℃,超声时间27 min。此条件下多酚的提取率为(28.08±0.21)mg·g~(-1)。此条件下得到的景天三七总多酚对DPPH自由基和ABTS自由基具有不同的清除能力,其半数抑制浓度(IC_(50))分别为0.81μg·mL~(-1),9.02μg·mL~(-1)。本研究为景天三七的资源开发提供理论基础。     

新型脱氢枞胺衍生物的合成及其抗自由基活性

通过不同的方法在脱氢枞胺中引入酰腙、没食子酸、肟、异烟基等对清除自由基有效果的基团,设计合成了几种新型的脱氢枞胺衍生物.利用1H NMR,13C NMR,IR和HRMS对所有合成的化合物进行了结构表征.测试了所合成的化合物对清除超氧阴离子(O2-)和二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)的活性,其中N-(3,4,5-三羟基苯甲酰基)-脱氢枞胺(6)对O-2的抑制率达到38.18%,是常用抗氧化药物Vc(18.35%)的两倍以上;对(DPPH·)的半数抑制浓度为0.002×103 mg/L,远优于Vc(0.236×103 mg/L).     

星点设计-响应面法优化麦冬总黄酮提取工艺及其抗氧化活性的研究

在单因素试验的基础上,利用星点设计-响应面法来优化酶提取法提取麦冬总黄酮的提取工艺,同时利用DPPH法和Fenton法测定总黄酮提取液清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基和羟基自由基的能力。结果表明麦冬总黄酮酶提取法的最佳提取工艺条件:酶用量为46.61 mg,酶解时间为4.14 h,酶解温度为55.56℃,提取率为0.283%。在此条件下,麦冬总黄酮提取液对DPPH自由基和羟基自由基有较强的清除作用,随着总黄酮浓度的升高,其抗氧化能力逐渐增强,其IC_(50)分别为7.33 mg·L~(-1)和14.08 mg·L~(-1)。该工艺稳定可行,可为麦冬黄酮类化合物的开发利用提供参考。     

金属卟啉白蛋白结合体模拟SOD酶性能研究

将两类水难溶性金属卟啉(MP),meso-四苯基卟啉金属配合物(MTPP,M=ZnII,CoII)和meso-四(p-羟基苯基)卟啉金属配合物(MTpHPP,M=ZnII,CoII)分别与牛血清白蛋白(BSA)结合,制得水溶性金属卟啉白蛋白结合体(MP@BSA).采用UV-vis光谱、聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)、圆二色谱进行了表征与分析,发现金属卟啉的水溶性和稳定性得到大幅度提高.采用NBT光还原法测定了MP@BSA结合体清除超氧阴离子自由基(O2·-)的能力,发现结合体MP@BSA具有清除O2·-的性能,与小分子金属卟啉相比,结合体的抗O2·-性能提高了一个数量级.MP@BSA抗氧化活性分别是VC和BSA的600倍和40倍.其中,羟基取代金属卟啉结合体表现出更强的清除O2·-的活性,CoTpHPP@BSA的EC50为1.5μmol/L,对天然Cu,Zn-SOD的模拟度为2.73%.最后提出了生物高分子结合体清除O2·-的可能机理.     

Moracin M的简便合成及其生物活性研究

本文以4-甲氧基水杨醛和3,5-二甲氧基溴化苄为原料,经取代、缩合和水解等3步反应,以38%的总收率合成了Moracin M。分别采用DPPH自由基清除法、小鼠巨噬细胞RAW264.7模型初步测试了Moracin M的抗氧化活性和体外抗炎活性,结果表明该化合物对DPPH自由基的清除能力很强（IC₅₀=0.0433mg/mL）,优于阳性对照药V_C,且具有一定的抗炎活性。      

氯化硝基四氮唑蓝显色检测超氧阴离子自由基的研究

将超氧化钾(KO2)溶解于二甲基亚砜(DMSO)和十八冠醚混合溶剂中可以制备稳定的超氧阴离子自由基(O2-·)的溶液,在该溶液体系中O2-·与氯化硝基四氮唑蓝(nitroblue tetrazolium,NBT)可以定量反应生成蓝色的单甲腊(monoformazan),用分光光度法进行检测.研究证实:单甲臢在DMSO溶液中的最大吸收波长为680 nm;反应时间和反应温度对测定结果有一定的影响.NBT与O2-·反应5 min较为适宜;由于低温条件下O2-·较为稳定,故测定温度维持在20℃左右.反应后体系吸光度与O2-·量之间的线性方程为:A680=(-0.071±0.015) (2.607±0.037)X,r=0.999 8,其中x为O2-·的量,标准偏差为1.4%.抗坏血酸对O2-·清除效果的验证实验表明,该方法可应用于实验室抗氧化剂的筛选与研究.