ATP生物发光法检测E. coliO157∶H7的研究

ATP生物发光法是近年来发展最快的定量微生物检测分析技术之一,具有快速、简便、灵敏度高等特点,已在食品、化工、环境等众多领域得到了广泛应用,主要是通过间接测定活菌总数来监测样品清洁度或卫生状况。文章利用ATP生物发光法建立了E. coliO157∶H7与光源计数值的定量线性模型,研究了pH 7.4下四种不同的缓冲液（KH2PO4-NaOH,Na2HPO4-C6H8O7,PBS、Tris-HCl）、质量浓度为10 g.L^-1下五种不同的化学物质（NaOH,NaCl,NaH2PO4,KCl,MgCl2）对E.coliO157∶H7光源计数值的影响。结果表明：Tris-HCl缓冲液对菌液的稀释效果最好,其对不同稀释浓度的区分能见度好,并且背景信号最小;MgCl2对发光有明显的增强作用,而NaOH,NaCl,NaH2PO4,KCl对发光有较大的抑制作用,其中NaOH对发光的抑制作用最大,达60.56%。同时,ATP生物发光法与传统的培养法相关性良好（r=0.9608）,检测限可达103cells.mL^-1。     

免疫磁分离技术在E.coli O157:H7检测中的应用

免疫磁分离(immunomagnetic separation)技术因其具有选择性好、特异性强、能起到浓缩的作用,已与其他快速检测方法如电化学、光学等方法连用,应用于食品、环境卫生检测等领域.免疫磁分离技术是目前最有推广价值的技术之一.文章通过比较不同的E.coli O157:H7-免疫磁珠(immunomagnetic beads,IMB)浓度配比、E.coli O157:H7与Bacillus subtilis不同的体积比下的免疫磁分离的捕获率,得出当E coli O157:H7-IMB浓度配比为1:30时,捕获率近100%,即所有的目标菌均可被捕获到;在总体积不变、IMB的加入量一定的情况下,随着Bacillus subtilis比例的增加,捕获率出现先下降后上升的情况.同时,将IMS与ATP生物发光法结合起来,对不同浓度的E coli O157:H7进行了检测,得出该方法与传统的平板培养法具有很好的线性相关性,则R2=0.988 2,检测限可低达102 CFU·mL-1.     

H2O+KCl(饱和)+NaCl+NH4Cl的等压研究

在298.15K条件下采用等压实验方法对KCl饱和的四元水溶液体系H2O+KCl(饱和)+NaCl+NH4Cl及其两个三元亚系H2O+KCl(饱和)+NaCl和H2O+KCl(饱和)+NH4Cl进行了研究.以NaCl或CaCl2水溶液为参考溶液,测定了不同水活度条件下该四元水溶液的渗透系数及水活度.实验结果表明,该四元系与其两个三元亚系之间存在着简单的共性,在实验误差允许范围之内,该四元系的等压行为符合类理想溶液模型.     

SPR生物传感器快速检测大肠杆菌O157:H7的研究

建立了一种基于表面等离子体共振(surface plasmon resonance,SPR)原理的生物传感器方法,实现了快速检测大肠杆菌O157:H7.研究选用BIACORE 3000系统及葡聚糖修饰的CM5芯片,先用EDC/NHS将芯片活化,然后抗体直接通过酰胺键固定在金表面,再用乙醇胺封闭,这样处理之后的芯片就可用于检测大肠杆菌O157:H7.利用NaOH溶液对芯片再生,实现对多个不同浓度样品检测,采用时间对响应单位(RU)记录数据.该法检测大肠杆菌O157:H7的检测限为3×105 CFU·mL-1,RU变化值和大肠杆菌O157:H7的浓度在一定范围内相关性良好,相关系数达到0.99.检测时间短,一个样品仅需5～7 min,再生效果好,芯片可重复使用50次以上.可快速、在线、稳定地检测大肠杆菌O157:H7,有望成为一种在线检测食品致病性微生物的有力手段.     

Ca10Li（PO4）7∶Dy3+,Ce3+材料的制备及发光性能

采用高温固相法制备了Ca10Li(PO4)7∶Dy3+发光材料,研究了Dy3+在Ca10Li(PO4)7基质中的发光特性。XRD测量结果表明,烧结温度为1 050℃时所制备的样品为纯相Ca10Li(PO4)7晶体。从激发谱可以看出样品主激发峰位于349 nm(6H15/2→6P7/2),363 nm(6H15/2→6P5/2),385 nm(6H15/2→6M21/2),样品可被UVLED管芯有效激发。发射谱由位于481 nm(蓝)和572 nm(黄)的两个峰组成,对应的能级跃迁为4F9/2→6H15/2、6H13/2。研究了不同Dy3+掺杂浓度对发光强度的影响,当Dy3+的摩尔分数为10%时发光最强。掺入Ce3+作为敏化剂,Ce3+→Dy3+发生共振能量传递,当掺杂量为10%Dy3+、14%Ce3+时,样品发光最强,其强度为单掺10%Dy3+时的13.4倍,发光颜色由黄白变为蓝白。     

新型发光材料磷酸锌钾纳米片的制备

以ZnSO4·7H2O和K3PO4·3H2O为原料采用固相反应合成磷酸锌钾,应用均匀设计和数据挖掘技术设计实验方案,采用XRD、SEM和EDS等方法对产物进行表征,并对产物的长余辉发光性能进行了研究。结果表明,根据产物的产率和锌的含量进行回归分析可以建立2个数学模型,对模型进行优化处理可以得到固相法合成磷酸锌钾的最优工艺条件。在n(K3PO4·3H2O)∶n(ZnSO4·7H2O)=1.01、研磨时间31 min、保温温度750℃、保温时间3.2 h的最优条件下制备的KZnPO4纳米片,在紫外光照后可产生蓝绿色长余辉发光,最强发光峰的波长范围为415～530 nm。     

测定化学物对萤光素酶抑制毒性的微板发光法研究

基于萤火虫萤光素酶生物发光反应体系,以SpectraMax M5酶标仪为发光强度测试设备,建立了测定化学物对萤光素酶抑制毒性的微板发光测试薪方法.系统地研究了萤光素酶浓度、萤光素浓度、ATP浓度、pH、温度、反应时间等实验条件对发光强度的影响.发现ATP对发光呈现双相响应关系,最大发光度出现在ATP浓度为1.1×10-4 mol·L-1.应用该方法成功地测定了NaF,NaC1,KBr和NaBF对萤光素酶的发光抑制毒性效应,基于非线性最小二乘法拟合化学物对萤光素酶毒性的剂量-效应曲线(DRC),拟合效应与实验结果之间的决定系数(R2)均大于0.99.通过拟合的DRC参数,准确地计算了化学物的半数效应浓度EC50.对比有关文献方法,萤光素酶毒性测试的微板发光法具有更简便快捷,节省试剂药品,便于多次平行测定从而提高准确度等优点.     

SPR生物传感器快速检测大肠杆菌O157∶H7的研究

建立了一种基于表面等离子体共振(surface plasmon resonance,SPR)原理的生物传感器方法,实现了快速检测大肠杆菌O157∶H7。研究选用BIACORE 3000系统及葡聚糖修饰的CM5芯片,先用EDC/NHS将芯片活化,然后抗体直接通过酰胺键固定在金表面,再用乙醇胺封闭,这样处理之后的芯片就可用于检测大肠杆菌O157∶H7。利用NaOH溶液对芯片再生,实现对多个不同浓度样品检测,采用时间对响应单位(RU)记录数据。该法检测大肠杆菌O157∶H7的检测限为3×105CFU.mL-1,RU变化值和大肠杆菌O157∶H7的浓度在一定范围内相关性良好,相关系数达到0.99。检测时间短,一个样品仅需5~7 min,再生效果好,芯片可重复使用50次以上。可快速、在线、稳定地检测大肠杆菌O157∶H7,有望成为一种在线检测食品致病性微生物的有力手段。     

黄海水体生物发光所致离水辐亮度变化及其与固有光学性质和深度的联系

利用黄海不同季节实测生物发光数据,结合同步测量的固有光学性质数据,基于辐射传输模拟,分析了生物发光所致离水辐亮度（L_w-bio）的数值变化和光谱变化,并讨论其与固有光学性质及生物发光所处深度的联系。主要结论如下：（1）黄海水体L_w-bio幅值不仅具有显著的季节变化特征,同时具有显著的空间变化特征,影响其变化的主要因素除水体本身发光生物的丰度和发光能力外,与水体自身固有光学性质和发光生物所处深度有关。（2）在光谱变化方面,L_w-bio最大峰值波长漂移不仅随着生物发光所处深度加深而增大,同时与固有光学性质有关,在固有光学性质其值较大的水体,当生物发光的光源深度位于表层以下,L_w-bio峰值波长可由蓝光波段（474 nm）变为绿光波段（最大可移动至578 nm）;在固有光学性质其值较小的清澈水体中,辐亮度光谱变化较弱,其L_w-bio峰值波长仍在蓝光波段范围内（最大可移动至500 nm）。（3）黄海海域宽泛的固有光学性质对生物发光光源的几何深度反演影响较大,但可通过L_w-bio的光谱信息,反演光源的几何深度。     

三元体系NaCl-KCl-H2O35℃活度系数的研究

研究了 35℃NaCl KCl H2 O三元体系的活度系数 .用Na+ 、K+ 和Cl-的离子选择性电极分别测得了 (0 .1～ 1.5mmol/L)不同离子强度下该体系中NaCl和KCl的平均活度系数 .回归了该体系Pitzer方程的相互作用参数 .实验值与计算值最大相对误差为 5 .6 % ,而平均相对误差为 2 .3% .