加拿大一枝黄花中酸性成分抗肿瘤活性初探

探讨加拿大一枝黄花（Solidago canadensis L．）花序乙酸乙酯提取物中酸性成分体外及体内抗肿瘤活性．采用MTT法跟踪提取物细胞毒活性；用S180和EAC昆明小鼠模型进行提取物的体内抗肿瘤活性评价．结果表明，加拿大一枝黄花花序的酸性成分具有显著抑制多株人肿瘤细胞株生长的作用，并呈明显的量效关系．乙酸乙酯提取物中的酸性成分对小鼠移植性肿瘤S180和EAC的生长也有显著的抑制作用，并和剂量正相关，高剂量组对小鼠移植性肿瘤S180和EAC的抑制率分别为52.06％，32.90％．显示了加拿大一枝黄花具有较强的体内和体外抗肿瘤作用．     

紫草多糖的免疫调节和肿瘤抑制活性研究

为研究紫草多糖在体外对小鼠脾淋巴细胞的免疫调节活性及对肿瘤细胞的细胞毒作用,本实验采用水提醇沉法,经脱蛋白、脱色、透析等方法提取紫草多糖,MTT法检测紫草多糖对淋巴细胞增殖及对HepG2、SPC-A-1肿瘤细胞的杀伤作用.实验结果显示:当质量浓度在121～364 μg*mL-1时,紫草多糖能显著的促进ConA刺激的T淋巴细胞增殖(P<0.01),对HepG2肿瘤细胞有显著杀伤作用(P<0.01),对SPC-A-1肿瘤细胞有明显的杀伤作用(P<0.05),且随着浓度的提高,增殖作用或抑制作用增强.在质量浓度为364 μg*mL-1时,对HepG2细胞的抑制作用明显高于对SPC-A-1细胞的抑制作用,而在质量浓度为24 μg*mL-1时,对HepG2细胞的抑制作用低于SPC-A-1细胞,紫草多糖对HepG2细胞的抑制表现出更强的剂量-效应依赖性.以上结果表明,紫草多糖不仅有免疫调节活性,还对肿瘤细胞具有一定的细胞毒作用.     

乌药根挥发油的体外抗肿瘤活性及其有效成分分析

采用MTT法检测乌药根挥发油对7种人癌细胞系的细胞毒性以评价其体外抗肿瘤作用.利用乙醚萃取法、硅胶柱色谱法及GC(气相色谱法)和GC-MS(气质联用)法对乌药根挥发油的成分进行分离鉴定,并结合MTT法对分离得到的成分进行抗肿瘤活性筛选.结果表明:乌药根挥发油对所试肿瘤细胞均表现出明显的细胞毒性,特别是对人食道癌Eca-109细胞和人胃癌SGC-7901细胞增殖的抑制作用尤为明显(IC50=24.8μg/mL);经多种方法从乌药根挥发油中分离、鉴定并筛选到的抗肿瘤有效成分为吉马酮.     

加拿大一枝黄花二萜成分的抗肿瘤活性

通过对4株人癌细胞系，肝癌SMMC7721，红白血病K562、乳腺癌Bcap37和肺腺癌SPC-A1的体外抑制实验发现，加拿大一枝黄花花序的石油醚、乙酸乙酯浸膏具有较强的体外抑制肿瘤细胞生长的能力,二者对上述4株肿瘤细胞的半数抑制浓度（IC50）低于50μg／mL．依据初筛结果，采用MTT法进行活性成分的跟踪检测，从乙酸乙酯浸膏中分离到两个抗肿瘤活性二萜．由NMR确定它们的结构分别是6β-当归酰克拉文酸和6β-巴豆酰克拉文酸．这两个化合物对4株肿瘤细胞株的半数抑制浓度（IC50）在7～12μg／mL．由于两个化合物对人永生化上皮细胞系HaCaT的毒性较小（IC50〉50μg／mL），加拿大一枝黄花可能成为开发抗肿瘤药物的新来源，是一种具有研究价值的草药．     

牛磺酸通过上调MST1蛋白表达诱导宫颈癌细胞凋亡

为观察牛磺酸(Tau)对宫颈癌细胞凋亡的诱导作用及初步机制。以人宫颈癌细胞系SiHa细胞为对象,MTT比色法检测细胞增殖活性,将pEGFP-N1-MST1重组质粒转染SiHa细胞,流式细胞术检测细胞凋亡及Western blot检测细胞中MST1,Bcl-2及Bax蛋白水平。结果显示:Tau能抑制SiHa细胞增殖并诱导其凋亡;上调SiHa细胞MST1及Bax蛋白表达(P<0.01),下调Bcl-2表达水平(P<0.01),且MST1过表达能增强Tau对凋亡的诱导作用(P<0.01)。结果表明牛磺酸通过上调MST1蛋白表达,进而引起Bax蛋白表达上调和Bcl-2蛋白下调,诱导宫颈癌SiHa细胞凋亡。     

乌药提取物的抗肿瘤及抗氧化活性

使用不同极性的有机溶剂分离得到了5种（石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、水）乌药提取物,并采用多种实验方法研究了其抗肿瘤及抗氧化活性.抗肿瘤活性研究结果显示：乌药石油醚萃取物对供试4种人癌细胞的细胞毒性最强;而HepG2细胞对乌药石油醚部位的细胞毒性最为敏感,半数抑制率（IC50）为（71.9±1.1）mg·L-1;乌药石油醚萃取物是通过诱发细胞凋亡来达到其体外抗HepG2作用的.抗氧化活性研究结果显示：乌药乙酸乙酯萃取物具有最强的体外抗氧化能力.     

紫萁多糖抗菌活性初步研究

本文报告了从紫萁中分离到的紫萁多糖，对金黄色葡萄球菌和藤黄色八叠球菌均有一定的抑制作用。作者根据祖传秘方的配制工艺和使用方法，将紫萁多糖应用于临床外科烧烫伤的治疗，发现其抗菌消炎的作用优于应用原药的治疗效果；临床试用的效果优于体外平皿实验效果。提示紫萁多糖在生物体皮肤上有协同的抗菌护肤作用。     

纳米二氧化硅体内与体外氧化应激及细胞毒性实验研究

研究了纳米二氧化硅(SiO2)体内及体外氧化应激损伤及细胞毒性作用及机制.体内实验采用ICR小鼠,纳米SiO2经口灌胃染毒3次,检测肺组织中MDA(丙二醛)和SOD(超氧化物歧化酶)含量,观察纳米SiO2对小鼠肺的氧化应激毒性.采用体外培养的小鼠上皮细胞(JB6细胞),观察不同质量浓度纳米SiO2染毒后的细胞形态改变,通过蛋白免疫印迹实验检测纳米SiO2是否通过FAS信号途径引起细胞凋亡.研究结果表明:纳米SiO2经口染毒后对小鼠肺具有氧化应激损伤作用,表现为随染毒剂量的升高,肺组织中MDA产生量增加,呈一定的剂量-反应关系.同时,肺组织内SOD水平总体趋势降低,但是差别未见统计学意义.体外培养细胞实验中,纳米SiO2染毒后可引起细胞出现凋亡并呈空泡样变.蛋白免疫印迹实验中,纳米SiO2可引起FAS信号蛋白表达量明显上升,但是FADD表达水平并不升高.     

HPLC法测定利巴韦林注射液的含量

以水－甲醇（８０：２０）为流动相，ＯＤＳＣ１８为色谱柱，使用高效液相色谱法测定利巴韦林注射液的含量，操作简便，结果与原有的比色法基本一致。     

氧氟沙星镍配合物的合成、红外光谱、热分析与抗肿瘤活性

合成了以氧氟沙星为配体的镍(Ⅱ)配合物Ni(ofo)2*4H2O,通过红外光谱和热分析等方法对配合物的结构进行了表征,推测了配合物的可能结构,并利用液体稀释法测定了药物配体和配合物对两种革兰氏阳性菌和两种革兰氏阴性菌的体外抑制活性.结果表明配合物与药物配体的抗菌活性和抗菌谱相同.采用MTT比色法测定了配体及配合物对HL-60(人急性早幼粒白血病)细胞的抑制作用,采用SRB蛋白染色法测定了配体及配合物对BEL-7402(人肝细胞性肝癌)细胞的抑制作用.结果表明Ni(ofo)2*4H2O对BEL-7402细胞没有抑制作用,对HL-60细胞在较高浓度时有一定的抑制作用.     

高效液相色谱法分离制备十足目甲壳动物AGH蛋白的研究

对十足目甲壳动物的雄性腺体激素（ＡＧＨ）蛋白成分的分离、制备，本文研究了两种不同的高效液相色谱分析方法，研究结果表明，排阻色谱法（ＳＥＣ）分离ＡＧＨ效果显著，分析速度快，分离完全，流动相易得、易处理，便于ＡＧＨ纯品的收集、制备．     

坛紫菜对赤潮异弯藻生长和光合活性的影响

以赤潮异弯藻为研究对象, 利用水样叶绿素荧光仪等研究新鲜坛紫菜、灭活坛紫菜、坛紫菜水溶性浸提液和甲醇提取物对有害赤潮微藻生长和光合活性的影响. 结果表明 新鲜坛紫菜具有抑制赤潮异弯藻的生长和光合活性(叶绿素a含量、光系统Ⅱ的最大光能转换效率和相对电子传递速率)的作用; 灭活坛紫菜(3.20g·L-1)、坛紫菜水溶性浸提液(0.80、1.60g·L-1)和甲醇提取物(3.20g·L-1)对赤潮异弯藻的生长和光合活性具有“先抑后促”作用. 坛紫菜水溶性浸提液(3.20 g·L-1)对赤潮异弯藻的生长和光合活性具有极显著抑制作用(P<0.01). 生长抑制作用大小为坛紫菜水溶性浸提液>灭活坛紫菜>新鲜坛紫菜>坛紫菜甲醇提取物, 坛紫菜可通过释放化感物质来抑制赤潮异弯藻的生长和光合活性, 且主要成分具有水溶性.     

茶叶糖蛋白对树突状细胞表面分子表达的影响

为探讨茶叶糖蛋白对小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDCs)表面分子表达的影响,采用细胞因子诱导法,以贴壁法获得贴壁单核细胞,添加重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重组白细胞介素4(rm IL-4)进行体外诱导培养,倒置显微镜动态观察细胞形态的变化;采用MTT法,观察不同浓度的     

鱼腥草外用抗菌霜剂的制备及局部皮肤抗感染研究

以系统溶剂法分别制备了鱼腥草的石油醚提取物、氯仿提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和水提取物.各提取物的体外抑菌实验表明,鱼腥草的氯仿提取物对金黄色葡萄球菌、苏云金杆菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和白色葡萄球菌的生长具有很好的抑制作用.以该提取物为主要成分,制作了一种鱼腥草的外用抗菌霜剂.豚鼠皮肤刺激实验表明,该霜剂对皮肤无刺激性.豚鼠皮内注射金黄色葡萄球菌皮肤局部感染模型的建立及抗感染实验结果表明,该霜剂对金黄色葡萄球菌引起的皮肤局部感染有明显的治疗效果,每天给药3次,每次给药0.1 g（区域面积20 mm×30 mm）,7 d后皮肤红肿现象完全消失;局部皮肤体外微生物培养实验发现,注射部位皮肤已无病原菌感染.     

热挤压铸造新型镁合金微观组织及细胞生物活性分析

采用热挤压铸造工艺制造新型镁合金, Mg-Nd-Zn-Zr-Mn (平衡-3-0.2-0.4-0.2%)基, 研究了新型镁合金表面特征、力学性能及细胞生物活性. 选择NZ30K添加Mn元素制成新镁合金, 挤压前通过均匀化热处理, 减少挤压过程中铸态合金中的粗大析出相以及树枝晶形成的带状组织. 光谱测试分析合金成分; 显微观察合金铸态、横纵截面; 扫描电镜扫描; X射线衍射分析. 将合金制成金属棒、螺钉、接骨板等形状, 测试力学性能. 进行体外细胞培养, 利用DMEM完全培养基制作镁合金浸提液, 滤膜过滤后4℃保存; 大鼠骨髓间充质干细胞提取培养, 待细胞生长至70%~80%传代于24孔板种板, 添加浸提液培养12、24、36h, 利用线粒体膜电位检测试剂盒检测细胞凋亡活性. 以纯镁作为对照组, 进行力学性能测试及细胞活性凋亡测试. 热挤压后合金的组织由细小的再结晶晶粒与变形晶粒组成, 与铸态合金相比, 其组织明显细化. 经挤压加工后, Mg-3Nd-0.2Zn-0.4Zr-0.2Mn合金横截面为细小的等轴晶组织, 组织均匀性好; 纵截面出现了晶粒尺寸相对较大的长条状组织, 组织均匀性稍差. 扫描电镜图显示Mg-3Nd-0.2Zn-0.4Zr-0.2Mn合金中第二相颗粒沿挤压方向被碾碎成更细小的颗粒, 只有非常少量的弥散分布的颗粒状析出相, 而在该合金中有较多被碾碎的第二相, 发生了明显的动态再结晶, 挤压后获得的组织不均匀, 大晶粒被发生再结晶的小晶粒包围. 从X射线衍射图中可以看出该合金铸态组织主要由α-Mg、Mn、Mg12Nd和Y相等这几相组成. 力学性能测试表明, 新型镁合金综合力学性能明显优于纯镁金属. 短期细胞培养中, 新型镁合金无明显细胞毒性, 对细胞生长有积极促进作用. 新型镁合金热挤压后的横截面为细小等轴晶组织, 组织明显细化且均匀性好, 力学性能有极大提升; 在短期细胞培养过程中新型镁合金与纯镁都表现出无细胞毒性, 新型镁合金对细胞活性的提升优于纯镁组.     

人t-PA P区在大肠杆菌中表达及其活性研究

用PCR方法获得编码人组织型纤溶酶原激活物（tissure-typeplasminogenactivator,t-PA）C端P区肽段的DNA,并经测序证实,长810bp,含有全部的t-PA的丝氨酸蛋白酶编码序列.将这段序列克隆到表达载体pQE30中转化大肠杆菌JM109菌株,经SDS-PAGE检测转化菌株中表达出分子量约29×103的蛋白,用纤维平板法测定激活纤溶活性,结果表明表达的t-PA蛋白C端P区具有很强的激活纤溶蛋白酶原的活性.证实t-PA蛋白C端P区的酶结构区的功能是独立的,其生物活性不受其它区域影响．     

压电生物传感器研究进展

简要介绍了压电传感器的基本原理，并从气态物质分析、微生物分析、细胞分析、生物过程监测、反应动力学分析、蛋白质分析、核酸分析、酶分析以及生物小分子物质分析等方面介绍了压电传感器在生物分析领域的研究进展     

水稻花药特异表达基因启动子的扩增及克隆

采用ＤＮＡ聚合酶链式反应（ＰＣＲ）扩增技术，以水稻黄化苗总ＤＮＡ为模板成功地扩增到水稻花药特异表达基因启动子Ｏｓｇ６Ｂ的７７０ｂｐ和９６０ｂｐ两个片段Ｏｓｇ６Ｂａ和Ｏｓｇ６Ｂｂ．并将其克隆到ｐＵＣ１８上形成完整的Ｏｓｇ６Ｂ，这为通过基因工程方法进行水稻杂种优势利用奠定了基础．     

密码子优化的人溶菌酶基因在毕赤酵母中的分泌表达及抗菌活性分析

人溶菌酶（human lysozyme,hLYZ）是一种天然活性蛋白质,具有抗菌性,目前主要应用于食品添加剂、动物饲料、药物治疗领域。根据毕赤酵母表达偏爱密码子特点,通过优化hlyz基因密码子,人工合成目的基因,构建了分泌表达载体pPIC9K-hlyz。通过电击转化法将pPIC9K-hly质粒重组至毕赤酵母GS115染色体中,经筛选得到重组毕赤酵母GS115-pPIC9K-hlyz。在28 ℃、pH 6.0、转速240 r·min^-1、1%甲醇诱导下表达120 h,发酵液上清酶活达到最高,为（2 414.9±108.1）U·mL^-1,蛋白浓度为166.7 μg·mL^-1。发酵液上清经过Sephadex G50纯化,获得较纯的hLYZ,经SDS-PAGE分析,在近14.7 kDa处显示单一条带。抗菌实验结果表明,重组hLYZ对革兰氏阳性菌的抗菌效果大于革兰氏阴性菌;重组hLYZ的抗菌效果是hLYZ标准品的10~20倍。