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建立了动物组织中金霉素残留测定的高效液相色谱柱后衍生法,研究了镁离子和草酸体系对金霉素荧光强度的影响。结果表明,镁离子浓度和草酸浓度为1∶1.2时,金霉素的荧光强度最强。动物组织样品以5%高氯酸提取,正己烷脱脂,C18净化,Hy-persil ODS C18(250×4.6 mm,5μm)分离,流动相为甲醇∶0.05 mol/L草酸=80∶20(V/V),流速为0.7 mL/min,柱后0.05 mol/L乙酸镁衍生,流速为0.1 mL/min,紫外检测器和荧光检测器同时测定,提高了金霉素残留定量灵敏度。紫外检测波长365nm,荧光检测波长eλx=360 nm,eλm=520 nm。 相似文献
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1 引 言多环芳烃是一类重要的致癌物质 ,环境样品中痕量的多环芳烃分析具有重要意义。其中高效液相色谱 程序波长荧光检测器检测是测定多环芳烃最常用的方法。紫外二极管矩阵检测器具有检验峰纯度、比较未知光谱与谱库光谱辅助定性的功能 ,其检测结果可靠性比程序波长荧光检测器高。但是紫外检测器灵敏度比荧光检测器低近两个数量级 ,对于清洁水样 ,多环芳烃含量很难达到紫外检测器的定量范围。为了解决清洁水样中多环芳烃的紫外二极管矩阵检测器检测 ,我们研究了色谱柱在线富集的方法 ,大大提高了多环芳烃的富集倍数 ,清洁水样中多… 相似文献
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荧光团杂化纳米SiO2微球作为生物标记探针的应用研究 总被引:4,自引:0,他引:4
近年来 ,无机发光量子点[1,2 ] 、荧光纳米乳液微球[3 ,4 ] 及发光团掺杂 Si O2 纳米粒子[5] 等纳米荧光探针的出现 ,为生物标记提供了新的发展领域 .将有机染料以共价方式包埋在 Si O2 中所得的复合材料具有独特的光学性质 ,然而其在生物标记方面的应用并未得到重视[6 ,7] .本实验通过控制荧光团修饰的硅烷前体在反相胶束体系中的水解缩合 ,合成了用于生物染色和诊断的高灵敏度、高稳定性的新型荧光团杂化纳米 Si O2 微球 ( NFHS微球 ) .在 NFHS微球中 ,荧光团以共价方式地均匀分散在 Si O2 网络结构中 ,避免了与外界体系中溶解氧的… 相似文献
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高效液相色谱-荧光检测法测定环境样品中的过氧化物 总被引:9,自引:0,他引:9
对高效液相色谱-荧光检测法测定过氧化氢和有机过氧化物的方法进行了改进,从而提高了方法的检测灵敏度。以氯化血红素(hemin)作催化剂进行柱后衍生反应,过氧化物将对羟基苯乙酸氧化生成能吸收荧光的二聚物,然后用荧光检测器检测。实验确定了最佳反应管温度和荧光检测波长。应用该法测定了大气和雨水样品中过氧化物的浓度。 相似文献
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填充柱超临界流体色谱法分离单糖 总被引:1,自引:0,他引:1
在食品和医药卫生方面对糖的分析很重要,液相色谱法是广泛采用的方法。因糖本身缺乏紫外吸收基团,不适于直接用紫外检测仪来分析。经离子交换柱或氨基柱分离后,糖可直接用折光检测仪测定,虽方法简便,但灵敏度不高。为改善检测限,可以对糖进行柱前或柱后衍生反应而产生紫外或荧光官能团,并用灵敏度较高的紫外或荧光检测仪进行测定。通用型和高灵敏度的火焰离子化检测仪(FID)是气相色谱中广泛采用的检测器,适于在超临界流体色谱(SFC)中分析无紫外吸收基团的有机物。目前关于SFC的报道已越来越多,其应用范围正日益扩大,已能用于分析某些具有较大极性的物质,如用毛细管柱SFC分析低聚糖和多糖。与毛细管柱 相似文献
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4-4 电化学检测器 在液相色谱中对那些没有紫外吸收或不能发出荧光但具有电活性的物质,可采用电化学检测法。目前电化学检测器主要有四种类型:极谱、安培、库仑和电导检测器。若在分离柱后采用柱后衍生技术,还可将它扩展到非电活性物质的检测。它已在各种有机和无机阴、阳离子、组织和体液中的代 相似文献
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《理化检验(化学分册)》2017,(5)
正用于气相色谱分析的检测器种类繁多,其中以热导检测器(TCD)、氢火焰离子化检测器(FID)最为常用。但有些物质在氢火焰中基本没有响应,用FID不能解决这些检测问题。所以,在色谱分析工作中对TCD的研究具有重要意义。国产热导型气相色谱仪死体积大,灵敏度相对较低,通常选用填充柱与其使用~([1-4])。随着石英毛细管色谱柱的出现与发展,毛细管色谱柱逐步取代填 相似文献
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用荧光标记技术对含羧基类中药成分进行标记,探索中药成分荧光标记方法,提高其检测灵敏度、为中药药代动力学研究奠定基础。以荧光试剂8-氨基芘-1,3,6-三磺酸三钠盐(APTS)和绿原酸组成研究体系,对标记条件进行优化。反应体系中加入1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC.HCl)与N-羟基丁二酰亚胺(NHS)可使衍生反应在室温下进行。APTS标记绿原酸的较优反应条件为:绿原酸与APTS的浓度比为1∶5,EDC的浓度为5 mmol/L,NHS的浓度为0.33 mmol/L。以0.1mol/L、pH5.50的NaH2PO4-Na2HPO4为缓冲溶液,绿原酸首先与EDC、NHS避光反应4 h,再与APTS反应4h,即可达到较好的标记效果。此标记方法操作简便,灵敏度高,可以用于含羧基类中药成分的荧光标记研究。 相似文献
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细胞内组分复杂、含量低,因此测定单细胞内化学组分的分析方法必须具有灵敏度高、选择性好和分辨率高的特点。高灵敏度的荧光检测技术是单细胞分析中应用最多的检测方法之一。但是细胞内绝大部分物质其天然态是没有荧光的,且由于细胞膜的阻碍,衍生试剂不能自由地进入细胞内。为了使衍生试剂透过细胞膜标记细胞内待测物质而不引起显著的稀释效应,已进行了大量的研究工作。本文综述了在单细胞分析中常用的荧光标记方法,包括细胞作为微反应器的衍生法,借助于脂质体与聚乙二醇(PEG)等增加细胞膜通透性的衍生方法和在毛细管/芯片毛细管电泳分析单细胞时柱上衍生和柱后衍生法以及量子点的标记法等。对这些方法的原理、特点和在单细胞分析中的应用也做了较为详细的阐述。 相似文献
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在环境监测中微量F~-的分析受到很大的重视.过去采用了分光光度法、离子选择电极法和荧光光度法,前两种方法选择性好,但灵敏度略低;荧光光度法灵敏度较高,可直接测定简单样品中的微量氟.在测定氟的荧光方法中,均是采用荧光熄灭法.此法的特点是灵敏度高,但操作繁琐,很少用于实际样品分析.我们研究了氟的几个新体系,从中筛选出灵敏度高、操作简便的锆-8-羟基喹啉-5-磺酸体系.在水溶液中测定,1μg F~-使体系荧光强度下降68%,与文献报道的体系相比是较高的.本法灵敏度为0.002μgF~-/mL,是测定氟的最灵敏方法之一. 相似文献
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本文采用倒置荧光显微镜,以汞灯为激发光源,自行设计组装了芯片毛细管电泳荧光检测系统。以荧光素异硫氰酸酯(FITC)为检测对象,对双通道门控光子计数器、CH151型光子计数探测器、电荷耦合器件(CCD)三种荧光检测器的灵敏度进行了比较研究。根据芯片毛细管电泳图谱分析,FITC在双通道门控光子计数器、CH151型光子计数探测器、CCD三种检测器中的检出限(S/N=3)分别为7.0×10-10mol/L,1.2×10-9mol/L,3.2×10-8mol/L。进一步采用CH151型光子计数探测器和CCD两种较常用检测器,对FITC和荧光素、曙红和荧光素两组荧光试剂的分离及检测进行了研究。结果表明,使用CH151型光子计数探测器作为检测器,灵敏度高,基线稳定,信噪比高。 相似文献
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通常用于DNA定量的主要方法有聚合物酶链反应(PCR)、紫外光谱法和荧光光谱法等.PCR测定DNA的灵敏度较高,但操作繁琐费时,而且对序列依赖性较强[1].紫外吸收光谱法可直接用于DNA的测定,但它的灵敏度较低且较容易受到DNA样品中的单链核苷酸和其它杂质的干扰.荧光光谱法不但有较高的灵敏度,而且对DNA的选择性也较好.目前已建立了许多荧光测定DNA的方法,这些测定方法一般都是基于DNA对荧光探针的荧光增强的原理而实现的.通常采用荧光光谱仪、荧光测读分析仪、流式细胞仪等测定荧光标记的DNA的荧光信号,但这些仪器均存在样品消耗量较大、仪器价格昂贵、分析时间较长、不易自动化等缺陷.毛细管电泳仪已经成为许多分析实验室中常用的DNA分离检测工具,将其应用于DNA的定量检测有望克服上述仪器的一些缺陷.Landers等以YO-PRO-1和PicoGreen为DNA标记试剂, 在毛细管电泳仪上对DNA含量进行了较好的分析[2]. 相似文献