人胎盘的生殖内分泌学研究——Ⅱ.细胞滋养层细胞的激素分泌功能

本文采用了无血清培养技术,研究了细胞滋养层细胞在体外分泌hCG、孕酮、雌激素、cGnRH和β-内啡肽的功能,在8天的培养中发现,细胞滋养层细胞在培养24h去除内源激素后能持续地分泌少量的hCG;与此不同,孕酮的分泌量逐日上升,第6天的孕酮分泌量为第1天的两倍;在外加雌激素的前身物雄烯二酮的情况下,细胞能合成雌激素,其产量亦是逐日上升,反映出细胞芳香化酶活性的不断提高,这种酶活性的提高与雄烯二酮的存在与否无关;在两种滋养层细胞培养中,唯有细胞滋养层细胞培养液中测得有cGnRH,产量以第2天为最高,接近4pg/10~5个细胞,合体滋养层细胞在离体下能分泌β-内啡肽,但其产量逐日下降,与此相反,细胞滋养层细胞的培养液中不但测到β-内啡肽的存在而且其含量在培养4—6天间明显上升。     

人胎盘的生殖内分泌学研究——Ⅲ.妊娠早期人滋养层组织孕酮分泌的调节

在体外无血清培养条件下,低剂量的促黄体素释放激素(GnRH)(10~(10)—10~(-8)mol/L)可促进妊娠6—8周人胎盘绒毛的孕酮分泌,高剂量则抑制孕酮的分泌,抗hCG多克隆抗血清与单克隆IgG明显抑削孕酮的生成,而且抑制程度与抗体剂量及作用时间相关,然而不同浓度的TRH,PGE_2,PGF_(2a),睾酮、雌二醇等对胎盘绒毛的孕酮分泌则无显著影响,本研究结果表明,妊娠早期人胎盘绒毛的孕酮分泌是受GnRH与hCG调节的,这为证明胎盘中可能存在激素分泌的自我调节系统提供了重要的依据。     

幼鼠Sertoli细胞分泌一种刺激Leydig细胞合成雄激素的因子

本文利用幼鼠Sertoli和Leydig细胞单独或一起培养的方法研究了Sertoli细胞对Leydig细胞的局部影响。结果发现:(1)FSH和LH都能刺激胚胎和幼鼠的睾丸细胞雄激素的生物合成,最大的刺激作用是在生后3—5天;(2)幼鼠Sertoli细胞在FSH作用下分泌一种(些)物质,它能直接(只在幼龄期)或与LH协同刺激Leydig细胞雄激素的合成;(3)Sertoli刺激因子不是类固醇或其他小分子化合物,可能是一种热不稳定的多肽。这种因子可能对幼鼠Leydig细胞向成鼠Leydig细胞的分化和激素合成能力的转化过程中起重要作用。     

小鼠Sertoli细胞tPA和PAI-1基因表达的激素调节

本文首次提出证据表明:(1)在FSH和cAMP生成因子作用下,小鼠Sertoli细胞主要分泌tPA,而Leydig细胞主要产生uPA;(2)Sertoli细胞也具有分泌PAI-1的功能。PAI-1基因表达明显受FSH、生长因子和GnRH激发;(3)因为在各种激素作用下Sertoli细胞分泌到培液中的tPA和PAI-1活性蛋白与细胞中的tPA和PAI-1mRNA增加一致,激素是在转录水平上调节小鼠Sertoli细胞tPA和PAl-1的生物合成。Sertoli细胞产生的tPA可能与精子发生有关。     

基于AuNPs/PANI-NF复合膜的电化学细胞传感器对姜黄素诱导HeLa细胞凋亡的抑制作用检测

以聚苯胺纳米纤维(PANI-NF)-纳米金(AuNPs)复合膜构建传感界面,在AuNPs/PANI-NF界面上修饰转铁蛋白(Tf),利用转铁蛋白与人宫颈癌细胞(HeLa)表面大量表达的转铁蛋白受体(TfR)之间的特异性识别作用,将细胞捕获到传感器界面,导致电化学阻抗值变化。利用电化学阻抗谱研究姜黄素对HeLa细胞的抑制作用。结果表明,随着药物浓度的增大和作用时间的延长,电化学阻抗值下降,表明姜黄素对细胞的抑制作用增强。电化学阻抗值的变化率与药物浓度和作用时间具有量效关系;电化学方法检测显示,姜黄素对HeLa细胞的抑制作用趋势与MTT法及倒置显微镜检测到的姜黄素对HeLa细胞的抑制作用结果相吻合,从而建立了一种检测药物对细胞抑制作用的新方法。该方法具有简便、灵敏度高、费用低廉等优点。     

信息

微量元素与激素微量元素可以在激素的分泌、活性以及与组织的结合等各个环节上影响激素。例如,锌与生长激素相结合,可使之更稳定,不易失活。体内锌态势的改变可影响胰岛素的合成、分泌、贮藏和活力,锌与胰岛素蛋白质结合形成一种复合物,可延长胰岛素的作用时间,锌与性激素的关系也十分密切。锌促进睾丸酮的合成分泌。锌可能控制激素与受体的结合过程。微量元素碘是合成甲状腺素的关键成分。甲状腺素包括T4和T3。T4的活性很低。T4经含硒酶催化而脱碘,转变为T3。T3的活性比T4高几倍。所以缺硒可以加重缺碘所造成的危害。(颜世铭)人体微量元…     

硒抑制人癌细胞株和人B细胞的EB病毒效应

应用间接免疫荧光法和显微荧光分光光度技术,研究了试管内无细胞毒性浓度的亚硒酸钠对来源于伯基特淋巴瘤的Ｒａｊｉ细胞株,Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ病毒抗原表达的影响以及抑制ＥＢＶ转化人脐血Ｂ淋巴细胞的作用。     

抗雌激素治疗垂体泌乳素腺瘤的体外实验研究

研究了抗雌激素药物三苯氧胺(TAM)在体外对垂体泌乳素(PRL)腺瘤细胞生长和激素分泌的影响,及其与溴隐亭(BROM)的相互作用。体外培养人PRL腺瘤细胞,用不同浓度TAM作用体外培养的腺瘤细胞,检测腺瘤细胞生长及激素分泌的变化;用相同方法检测TAM与BROM的相互作用。结果表明,低、中剂量的TAM对腺瘤细胞生长和激素分泌无作用,高剂量TAM可以抑制PRL腺瘤的激素分泌水平,与对照组比较可降低(25±7)%;其作用可被雌激素拮抗,未发现腺瘤细胞生存状态的改变;TAM对腺瘤细胞的作用弱于BROM;联合应用TAM和BROM具有协同作用,腺瘤细胞激素分泌比对照组降低(47±4)%;与单用BROM相比在抑制腺瘤细胞激素分泌和生长方面差别具有显著性(P<0 05)。提示联合应用TAM与BROM,可以明显抑制PRL腺瘤细胞的生长和激素分泌,提高BROM的疗效。     

人肝癌Bel-7402细胞及Bel-7402/5-FU细胞的N-连接聚糖的差异分析

以培养的人肝癌细胞Bel-7402及其5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药细胞(Bel-7402/5-FU)为研究对象,通过使用快速PNGase F酶切,结合TMPP-Ac-OSu和甲胺化共衍生方法,对两者的总蛋白和分泌蛋白的N-连接聚糖进行了基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析。从两种细胞总蛋白中共鉴定到56种N-连接聚糖,分泌蛋白中鉴定到38种N-连接聚糖。5-FU与Bel-7402相比,耐药细胞岩藻糖化唾液酸糖型在总蛋白和分泌蛋白中都显著升高;高甘露糖型N-聚糖在总蛋白中下降,而在分泌蛋白中显著增加。本研究为进一步探索肿瘤耐药提前诊断提供糖链标志物起到一定的参考作用,并为后续解决癌症治疗的耐药提供理论依据。     

硒化壳聚糖抗K562细胞的实验研究

用MTT法和AO/EB荧光染色法观察了硒化壳聚糖对K 562肿瘤细胞株生长的影响。结果发现,硒化壳聚糖可有效地抑制K 562细胞生长,并呈量效、时效关系。经硒化壳聚糖作用后的细胞可明显出现核固缩、碎裂等凋亡形态改变。硒化壳聚糖可诱导K 562细胞凋亡,抑制其生长。     

微量元素与激素

微量元素可以在激素的分泌、活性以及与组织的结合等各个环节上影响激素。例如，锌与生长激素相结合，可使之更稳定，不易失活。体内锌态势的改变可影响胰岛素的合成、分泌、贮藏和活力，锌与胰岛素蛋白质结合形成一种复合物，可延长胰岛素的作用时间，锌与性激素的关系也十分密切。锌促进睾丸酮的合成分泌。     

单独和合用硒化壳聚糖与阿霉素对K562细胞作用的研究

应用MTT法和AO／EB荧光染色法观察单独和合用硒化壳聚糖与阿霉素对K562细胞株的影响,结果发现硒化壳聚糖和阿霉素均可有效地抑制K562细胞生长。且两药联合使用效果更佳。硒化壳聚糖可诱导细胞凋亡。两药合用诱导细胞凋亡效果更好。     

硒化壳聚糖诱导NB4细胞凋亡及周期阻断作用

为研究硒化壳聚糖对NB4细胞的凋亡及周期阻断作用,用流式细胞法观察了药物对细胞的诱导凋亡及周期阻断作用。结果表明,硒化壳聚糖作用NB4细胞24 h,可剂量依赖性地诱导细胞凋亡并使G0—G1期细胞增多。提示硒化壳聚糖可诱导细胞凋亡,并对NB4细胞周期有特异性阻断作用。     

DBAH-Tf靶向药物及其对乳腺癌细胞的杀伤作用分析

以转铁蛋白(Tf)为靶向载体,与双氢青蒿素(DHA)化学偶联制备一种新的双氢青蒿素衍生物-转铁蛋白靶向药物.以DHA为原料先合成了12β-对甲酰肼苯基双氢青蒿素(DBAH),并采用紫外、红外、核磁共振及电化学等手段对目标产物的结构进行了表征.利用高碘酸钠氧化Tf的C端的N-糖链上的邻位羟基,其氧化产物和DBAH通过希夫碱偶联合成了DBAH-Tf靶向药物,采用紫外吸收光谱法和电化学方法进行表征.四甲基氮唑蓝法(MTT)分析了DBAH-Tf及DHA对人乳腺癌细胞(MCF-7)和正常乳腺细胞的体外杀伤作用, 结果表明,DBAH-Tf对MCF-7的杀伤作用是正常乳腺癌细胞的286倍,体现出良好的靶向性.     

细胞在单壁碳纳米管无纺膜支架上的生长行为

以具有纳米拓扑结构特征的单壁碳纳米管无纺膜材料为支架, 选择在促进组织修复和再生中起重要作用的成纤维细胞株作为实验细胞, 研究了该材料对细胞生长行为的影响. 通过X射线光电子能谱分析, 表征其在细胞培养液中浸泡后的表面化学组成; 通过细胞粘附、增殖实验以及细胞骨架发育观察, 探讨了材料的微观纳米拓扑结构对细胞的作用, 以及与碳纤维、聚氨酯浇铸膜和空白培养板材料对细胞作用的差异和可能的机理; 并采用双层细胞培养装置, 研究了该材料通过细胞通讯途径对在其它材料上生长的细胞增殖的影响. 实验结果表明, 单壁碳纳米管无纺膜材料为细胞提供了十分接近天然细胞外基质的人造微环境, 具有显著促进细胞粘附和长时间增殖的功能, 而且生长在该支架上的细胞可能通过旁分泌方式将某些化学介质分泌到细胞外液中, 经局部扩散作用于在其它材料上生长的细胞, 促进它们的增殖.     

硒化壳聚糖对K 562和K 562/ADM作用的比较研究

应用MTT法和细胞集落形成率法观察了硒化壳聚糖对K562和K562／ADM肿瘤细胞株生长的影响，结果发现硒化壳聚糖可有效地抑制两种K562细胞生长，呈量效关系。同等剂量的硒化壳聚糖对K562细胞的作用强度高于对K562／ADM细胞。硒化壳聚糖对耐药的细胞株可产生抑制作用，若与化疗药合用则可减慢甚至部分逆转临床上K562细胞耐药性的发生。     

文昌鱼哈氏窝上皮细胞超微结构的研究

本文用透射电子显微镜观察到文昌鱼哈氏窝顶部上皮细胞质中分泌颗粒生成的数量,各种细胞器的发育随性腺的发育和成熟,呈现一种正的相关性,同时,唯有这种细胞对GnRH-A发生应答。从细胞学和内分泌生理学方面证实,这种细胞可能是文昌鱼原始的促性腺激素分泌细胞。     

硒化合物诱导细胞凋亡的信号转导机制

从硒化合物诱导细胞凋亡及其机理阐明硒防治肿瘤的生物功能,是当今硒的生物无机化学与相关学科交叉的前沿。本文通过作者的研究工作及国内外有关工作介绍了活性氧（ROS）介导的硒化合物诱导细胞凋亡的信号转导机制,阐述了ROS作为信号分子的特性及硒化合物与ROS作用的化学基础。     

稀土对人正常肝细胞株7701和人宫颈癌Hela细胞生长的影响及其诱导细胞凋亡的作用

采用MTT法考察了16种稀土元素在9×10-8~2×10-4mol.L-1浓度范围内对体外培养的人正常肝细胞株7701细胞和宫颈癌Hela细胞的生长的影响。结果表明,稀土对细胞生长的影响存在浓度依赖性;低浓度促进细胞增殖,高浓度抑制细胞生长;不同稀土离子对细胞作用强弱不同,稀土间存在轻重分组效应;不同细胞对稀土的响应不同,表现出稀土对正常细胞和癌细胞作用的某种选择性。Hoechst 33258标记细胞DNA,用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪对稀土处理的肝细胞株7701进行形态学观察和DNA含量分析。结果表明,较高浓度的稀土作用后的肝细胞株7701出现了明显的凋亡特征,稀土表现出的细胞毒性作用,其本质是诱导细胞发生凋亡。     

GnRHa对去垂体大鼠卵巢tPA和PAI-1基因表达的调节

给去垂体大鼠注射促性腺激素释放激素(GnRH)的类似物(GnRHa)可诱导卵巢颗粒细胞(GC)和膜间质细胞(TI)组织型纤溶酶原激活因子(tPA)和抑制因子(PAI-1)基因在时间上和不同细胞间的协调表达。tPA主要由GC产生,GC也分泌少量PAI-1;而卵巢中的PAI-1主要由TI产生,TI也分泌少量tPA。在排卵前GC和TI中tPA mRNA和生物活性均达到高峰;与此相反,PAI-1的表达在GC和TI中却完全不同,TI中的PAI-1 mRNA和生物活性在tPA峰值前6h达到最高水平;而GC中的PAI-1峰值却出现在排卵后。上述变化与人绒毛膜促性腺激素(hCG)诱导正常大鼠排卵所引起的两种基因的表达的动力学变化无异。这些结果提示,hCG(通过PKA途径)和GnRHa(通过PKC途径)这两种不同的调控信号可通过各自不同的受体,经过不同的信息传递系统而最终影响tPA和PAI-1基因的相同的协调表达引起排卵。