微板式磁化学发光酶免疫分析法对人绒毛膜促性腺激素(HCG)的灵敏快速测定

以磁性酶免疫测量分析为模型,建立了微板式磁化学发光酶免疫分析法.利用3-(2′-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3″-磷酰氧基)苯-1,2-二氧杂环丁烷(AMPPD)-碱性磷酸酶(ALP)化学发光体系对人绒毛膜促性腺激素(HCG)进行测定,测量的灵敏度较分光光度法提高了13倍.测定的线性范围为0.15～500 mIU/mL;批内变异系数(C.V.%)和批间变异系数(C.V.%) 均在18%之内;回收率在80%～116%之间;利用本法对血清样品进行了测定,并与其它化学发光免疫分析方法进行了比较,其相关系数为0.965.首次将酶免疫分析方法用于唾液中人绒毛膜促性腺激素(HCG)的测定,为建立非侵入式样品测定方法打下了基础.     

板式磁颗粒化学发光免疫分析测定人血清中糖类抗原125

在传统的板式化学发光免疫分析法和管式磁颗粒化学发光免疫分析法基础上,建立了人血清中糖类抗原125(CA125)的板式磁颗粒化学发光免疫分析方法.该方法以磁性微粒子作为分离固相,96孔板为反应容器,辣根过氧化物酶(HRP)催化H2O2-luminol化学发光体系作为检测体系.本法测定CA125的检测灵敏度可达2.0U/mL,线性范围为0～400U/mL.与常用的包被板化学发光免疫分析方法对比,该方法检测范围宽.与管式磁颗粒化化学发光法比较,其分析灵敏度与精密度高、线性范围、分析通量以及分析成本方面均显示了很好的优越性.采用该方法对人血清中CA125进行测定并与罗氏全自动电化学发光系统的测值结果进行了比对,两者显示了良好的相关性.     

化学发光酶联免疫分析检测血清中麻疹病毒抗体

化学发光酶联免疫分析检测血清中麻疹病毒抗体章竹君，邹克渭，程明洁（陕西师范大学分析科学研究所，西安，７１００６２）（陕西省卫生防疫站）关键词麻疹病毒抗体，化学发光，酶联免疫分析，辣根过氧化物酶目前在计划免疫工作中通常采用间接酶联免疫吸附分析法（ＥＬＩ...     

3种酶联免疫分析法在蓖麻毒素定量测定中的比较

建立了蓖麻毒素的3种酶联免疫定量分析法,即光吸收、荧光和化学发光免疫分析法,并系统优化了各项实验条件。结果显示:对于化学发光检测法,当酶标抗体HRP-4C13稀释倍数为1∶8000时可获得最佳的信噪比,且酶与底物反应3 min后信号趋于稳定。随后在各自优化的条件下将3种方法用于毒素的检测。比较结果表明:化学发光酶联免疫分析法除具有线性范围宽(0.02～5.5μg/L,r2=0.999)、灵敏度高(检出限为5 ng/L)的特点外,还具有简单、快速、体系稳定性好等优点。将本方法用于不同实际样品基质,如饮用水、碳酸饮料、奶粉、咖啡和血清中添加的蓖麻毒素的检测,其检出限为0.005～0.08μg/L,回收率为89.6%～108.8%,适于污染及中毒样品中痕量蓖麻毒素的定量分析。     

基于酶标噬菌体抗体的磁分离免疫分析方法

以磁微粒偶联多抗为磁性捕获探针,酶标噬菌体抗体为特异信号检测探针,采用"磁性捕获探针-待测物-酶标噬菌体抗体探针"的检测模式,成功建立了一种基于酶标噬菌体抗体的磁分离免疫分析方法。本方法检测β-银环蛇毒素线性范围为0.016~62.5μg/L,回归方程为Y=0.641X+1.355(R=0.9925,n=13,p<0.0001),检出限为0.016μg/L。本方法比传统ELISA法检测灵敏度提高了10倍,与采用酶标单抗复合物探针的双抗体夹心磁分离免疫分析法相比,检测灵敏度提高4倍。本方法灵敏度高,具有较好重现性与特异性,在毒素的痕量检测方面具有广阔的应用前景。     

高灵敏度化学发光磁酶免疫法检测人绒毛膜促性腺激素

将磁性微粒与抗体的偶联,通过优化偶联条件提高了偶联效率,制备了高灵敏度的磁微粒生物探针;采用3-(2-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3-邻氧酰苯基)-1,2-二氧杂环丁烷(AMPPD)--碱性磷酸酶(ALP)化学发光体系,建立了化学发光磁酶免疫检测方法;对检测方法进行了优化和改进,提高了系统的灵敏度和检测速度,并对HCG样品进行相关检测.结果表明,HCG浓度在0.15～150 IU/L范围内,光强随HCG浓度增大而增加,两者之间线性关系良好,相关系数r为0.960;检出限可达0.15 IU/L; 相对标准偏差(RSD)小于5%; 检测总时间少于1 h.本方法可以应用于其它免疫分子的检测,在临床免疫检测方面具有广阔的应用前景.     

化学发光酶联免疫分析测定血清中抗DNA抗体

建立起适于临床应用的抗ＤＮＡ抗体化学发光酶联免疫分析法。该法精密度良好，相对标准偏差为２．４％。比ＥＬＩＳＡ法更加简便、经济、省时，同时提高了灵敏度（８倍）和血清的阳性检出率。探讨了检测系统中对碘苯酚增强鲁米诺－过氧化氢－辣根过氧化物酶化学发光反应机理。     

化学发光免疫分析技术及其在农药残留检测中的应用进展

化学发光免疫分析技术发展迅速,具有特异性强、灵敏度高、线性范围宽、操作简单、成本底、检测时间短、易于实现自动化等优点,在农残检测领域得到广泛应用。以化学发光免疫分析为基础,介绍了吖啶酯类、鲁米诺类、咪唑类、苯酚类及芳基草酸酯类5种化学发光剂,及化学发光免疫分析法、荧光化学发光免疫分析法、化学发光酶联免疫分析法和电化学发光免疫分析法4种常见的分析方法,重点综述了化学发光免疫分析技术在农药残留检测中的应用,并对该领域的研究前景进行了展望,旨在为农药残留检测相关研究提供参考。     

流动注射化学发光发测定葡萄糖

β-D-葡萄糖的检测是临床化学的常规分析项目 .化学发光分析法测定葡萄糖具有线性范围宽、灵敏度高等优点[1～ 3] .我们曾研究了鲁米诺 ( L uminol) -KIO4 -H2 O2 化学发光反应体系[4 ] ,发现 H2 O2 浓度在 2 .0× 1 0 - 7～ 6.0× 1 0 - 4mol/L范围内与发光强度有良好的线性关系 .本文将生成 H2 O2 的葡萄糖 -葡萄糖氧化酶 ( GOD)的酶促反应与鲁米诺 -KIO4 -H2 O2 的化学发光反应相偶合 ,结合流动注射技术 ,建立了一种流动注射化学发光测定葡萄糖的新方法 .方法的线性范围为 0 .6～ 1 1 0 mg/L ,相关系数为 0 .9997,检出限为 0 .0…     

流动注射光度法测定铬(Ⅵ)

铬（Ⅵ）可干扰很多重要的酶的活性，损害肝脏和肾脏，是一种潜在的致癌物质，因此测定环境样品中的铬（Ⅵ）具有极其重要的意义。测定铬（Ⅵ）的方法主要有二苯基碳酰二肼分光光度法、原子吸收光谱法、流动注射分析法，而流动注射分析法又分为流动注射原子吸收光谱法、流动注射分光光度法、流动注射化学发光法。     

氨基纳米磁球免疫电化学法检测甲胎蛋白的研究

提出了一种利用纳米磁球免疫分离,进行酶催化电化学检测甲胎蛋白的新方法。在自制含有活性氨基的纳米磁球表面,用戊二醛固化甲胎蛋白（AFP）抗体,利用免疫夹心反应原理,捕获溶液中的AFP抗原和标记有辣根过氧化物酶的AFP抗体。在外加磁场的作用下,抗体-抗原结合物从样品溶液中分离,在含有邻氨基苯酚和过氧化氢的底液中,生成具有电活性的化合物3-氨基吩呃嗪,用灵敏的示差脉冲伏安法测定。响应电流与AFP抗原浓度分别在1～5和5～400βg／L范围内呈线性关系,检出限达0．5βg／L。实验表明,该方法具有分离效率高、测定时间短、抗干扰性强等优点,尤其适用于分析复杂生物样品。应用此法于人血清样品中AFP的检测,灵敏度显著高于酶联免疫吸附法。     

十八烷基三甲基溴化铵-十四烷基溴化吡啶协同增敏邻二氮菲间接光度法测定药品中安乃近

正安乃近属于吡唑酮类解热镇痛药物,临床上广泛用于感冒、头痛、发热、肌肉关节痛、牙痛、痛经、风湿及类风湿关节痛等的治疗。目前,安乃近的测定方法主要有碘量法[1]、高效液相色谱法[2-3]、电化学分析法[4]、分光光度法[5]、红外光谱法[6]、荧光分析法[7]和化学发光法[8-9]等。碘量法操作较为繁琐和费时,紫外-分光光度法操作简便,但灵敏度较低。基于Fe3+的显色反应采用可见分光光度法测定安     

光度分析法在药物分析中的研究与应用

综述了国内近年来光度分析法在药物分析中的研究与应用情况.就分光光度法、荧光光度法、化学发光法3种重要的分析方法,从反应条件、线性范围、灵敏度等方面介绍了光度分析法对不同反应体系的研究现状,展望了光度分析法在药物分析中的发展方向.     

管式磁性微粒子化学发光免疫分析法测定人尿液中的雌三醇

待测尿液中的雌三醇、辣根过氧化物酶标记的雌三醇与异硫氰酸荧光素(FITC)标记的兔抗雌三醇抗体在均相体系中发生竞争性免疫反应,再加入用羊抗FITC抗体包被的磁微粒,反应生成物结合在磁微粒上,在磁场中经分离、洗涤后加发光底物,检测发光强度(RLU),测定尿液中雌三醇的含量。通过对检测条件的优化,建立了磁性微粒子化学发光免疫分析法测定人尿液中雌三醇的方法,并对正常男性、女性和孕妇的尿液中雌三醇含量进行了测定。结果表明,本方法的线性范围为1～100μg/L,检出限为0.25μg/L,具有很高的灵敏度;批内相对标准偏差<14%;批间相对标准偏差<7%,具有良好的稳定性和重现性。     

β2-兴奋剂的样品前处理与分析检测方法研究进展

许多国家禁止β2-兴奋剂用于动物饲养,但违禁药品的使用屡有发生,因此β2-兴奋剂的分析检测引起了高度关注.该文综述了β2-兴奋剂分析的样品前处理方法,包括溶剂萃取、固相萃取、固相微萃取等,并对常用的β2-兴奋剂检测方法(如色谱分析法、电化学检测法、酶联免疫法、化学发光法等)的研究进展进行了评述.     

磁性微粒子化学发光免疫分析法测定人血清中雌三醇

利用化学发光免疫分析(chemiluminescence immunoassay, CLIA)高灵敏度和高特异性的特点, 将磁性微粒子应用于化学发光免疫分析中, 用两种不同的方法对人体血清内的雌三醇(E3)含量进行了测定. 磁性微粒子分别作为固相一抗包被材料和二抗分离剂参与反应. 两种方法检测雌三醇浓度的线形范围均为0.6～60 ng/mL. 其中, 固相一抗法的批内变异及批间变异系数分别小于11%和15%, 回收率为90%～116%, 健全性系数为0.9987. 二抗分离法的批内变异及批间变异系数分别小于8%和10%, 回收率为88%～118%, 健全性系数为0.9974. 两种方法分别与经典板式化学发光法对比, 检测人血清样本, 结果相关性较好, 且磁性微粒子法更为省时、简便, 适于推广应用.     

磁纳米探针检测人绒毛膜促性腺激素

采用链霉亲和素包被磁纳米粒子,将生物素标记的特异性抗体偶联在磁纳米粒子上,制备出高特异性的磁纳米探针;利用此探针对人绒毛膜促性腺激素(HCG)进行测定,建立了定量检测蛋白类激素的化学发光分析方法.利用紫外可见分光光度计、透射电镜及动态光散射仪对磁纳米探针进行表征,同时对化学发光实验条件进行优化.在2×10~(-4) mol/L鲁米诺、8×10~(-4) mol/L H_2O_2, pH=13的优化条件下,将磁纳米探针用于HCG的定量检测.结果表明,所测发光强度与待测HCG浓度之间线性相关,相关系数r为0.9924,线性检测范围由常规板式ELISA的5～200 μg/L扩展到0.5～250 μg/L;相对标准偏差为3.82%.采用本方法和常规ELISA法同时对34份人血清标本HCG进行测试,两者相关性良好.利用制备的磁纳米探针定量测定微量蛋白类激素,具有灵敏、高效、快捷、检测范围宽等优点,有望应用于其它微量蛋白的检测.     

管式磁微粒化学发光免疫分析法测定玉米样品中的黄曲霉毒素B1

开发了一种管式磁微粒化学发光免疫分析法测定玉米样品中黄曲霉毒素B1的方法,该方法使待测玉米样品中的黄曲霉毒素B1、辣根过氧化物酶标记的黄曲霉毒素B1与异硫氰酸荧光素(FITC)标记的黄曲霉毒素B1单克隆抗体在均相体系中发生竞争性免疫反应,再加入用抗FITC抗体包被的磁微粒作分离剂,抗原抗体复合物结合在磁微粒上,在磁场中经分离、洗涤后加发光底物,检测发光强度,测定玉米样品中黄曲霉毒素B1的含量.此方法标准曲线线性范围为0.05～5ng/mL,检测限为0.02ng/mL,批内相对标准偏差小于9%,批间相对标准偏差小于15%,具有良好的稳定性和重现性.     

分光光度法测定二氢乳清酸酶酶活的比较

分别采用紫外分光光度法测定二氢乳清酸(DHO)的减少量、PDAB显色法测定N-氨甲酰-天冬氨酸(CA-asp)的生成量来测定二氢乳清酸酶酶活,并对两种方法进行了比较。结果表明紫外分光光度法和PDAB显色法均有良好的回收率,分别为99.4%～101.2%、98.0%～101.3%。但由于PDAB显色法的检测范围为0.05～1.00g/L,较紫外法的检测范围0.05～0.30g/L更为宽泛,仪器要求低,便于实际操作。因此,采用PDAB显色法测定二氢乳清酸酶酶活较为方便。     

流动注射化学发光法测定盐酸仑氨西林

盐酸仑氨西林(lenampicillin hydrochloride)是新一代广谱口服半合成青霉素类抗菌素,测定盐酸仑氨西林的方法有紫外分光光度法[1],高效液相色谱法[2-4]。光度法灵敏度都不高,高效液相色谱法仪器昂贵且操作烦琐。利用流动注射化学发光分析法测定盐酸仑氨西林,尚未见报道。本文研