高效液相色谱法分析牛乳中脂溶性维生素和β-胡萝卜

脂溶性维生素和β-胡萝卜素是人类和动物生存所必需的营养物质。用高效液相色谱(HPLC)测定血浆、药物、食品等样本中某几种这类化合物已有报道。本文描述了一种用Sep-Pak Silica预处理柱,同时提取脂溶性维生素A_1(V_A_1)、D_2(V_D_2)、D_3(V_D_3)、E(V_E)以及β-胡萝卜素和用HPLC-紫外检测分析它们的方法,并测试了牛乳中上述化合物的含量。     

高效液相色谱法同时测定食品中脂溶性维生素A,D3,E,K3

１引言维生素是维持细胞正常生理功能的营养成分之一。许多维生素是酶的辅基或酶的组成成分，因此，测定食品中维生素的含量是食品营养分析的主要内容之一。脂溶性维生素的分析方法一般采用生物法、分光光度法及薄层色谱法等，但这些方法都只能单独测定食品中的维生素，进入８０年代后，随着高效液相色谱（ＨＰＬＣ）技术在食品分析中的应用，国外许多研究工作者在利用高效液相色谱技术分析脂溶性维生素的研究上作了许多工作，发展了更具选择性的方法如电化学法、质谱法等，并且对同时测定脂溶性维生素的方法作了一些探索。本文旨在综合国内…     

同位素稀释/液相色谱-串联质谱测定婴幼儿配方奶粉中脂溶性维生素

采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)结合同位素稀释定量方法,建立了婴幼儿配方奶粉中维生素A、维生素D_2、维生素D_3、维生素E和维生素K15种脂溶性维生素同时测定的分析方法。样品经脂肪酶酶解,氢氧化钾-乙醇皂化,石油醚提取,乙醇定容,经BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm)分离后,以甲醇(甲酸0.02%)-0.1%甲酸溶液为流动相,0.4 m L/min梯度洗脱,采用大气压化学电离,正离子多反应监测模式测定。5种脂溶性维生素在一定浓度范围内具有良好的线性关系,相关系数(r2)大于0.99,加标回收率为83.8%~113.7%,相对标准偏差(RSD,n=6)为1.2%~10.1%,定量下限(LOQ)为0.5~10μg/100g。该方法简便、快速、灵敏、准确,可满足配方奶粉中脂溶性维生素的检测要求。     

差分脉冲溶出伏安法测定血清中维生素A、D_3和E

<正>维生素A(VA)、维生素D3(VD3)和维生素E(VE)是维持人体正常生理活动和机能的脂溶性维生素,缺乏这些维生素会导致多种疾病。目前有多种方法测定VA、VD3、VE的含量,如放射免疫法[1]、荧光分光光度法[2-3]和高效液相色谱法[4-6]等,但各有优缺点。放射免疫法虽然有专用的试剂盒,但价格昂贵;荧光分光光度法及高效液相色谱法所需仪器昂贵,操作复杂,分析时间长,不易临床推广。     

维生素D_2类似物的合成及生物活性研究进展

1α,25-二羟基维生素D_2(1α,25-(OH)2-D_2,125D_2)是维生素D_2的活性代谢产物,1α,25-二羟基维生素D_3(125D)则是维生素D_3最具活性的代谢产物。125D因高钙血症副反应而限制其临床应用,而维生素D_2及其类似物一般比相应维生素D_3类化合物副作用小。本文综述了两种临床应用效果较好的维生素D_2类似物度骨化醇及帕立骨化醇的合成新进展,以及侧链修饰、19-去亚甲基、A环C_3位修饰和九重氢同位素标记的维生素D_2类似物的合成及生物活性研究新进展,旨在为新型活性维生素D_2类似物的合成及临床开发提供参考。     

微流光反应技术制备树脂状维生素D_3

合成维生素D_3的关键步骤是7-去氢胆固醇光照开环合成预维生素D_3,目前合成是在釜式光反应器中进行,原料转化率低,产物提纯难度大,产品生产周期长。本文利用微流光反应技术开展预维生素D_3的制备研究,与传统釜式光反应器相比,原料转化率从低于30%提高到95%,光照产物无需纯化,可直接通过热异构化反应制备树脂状维生素D_3,生产周期大为缩短。     

1α,25-双羟基维生素D_3的合成研究——从猪去氧胆酸甲酯合成25-羟基胆固醇

25-羟基维生素D_3(1)和1α,25-双羟基维生素D_3(2)是维生素D_3(3)在体内的两个重要代谢产物。2是目前所知生理活性最强的维生素D.1和2可治疗软骨病,特别用于对肝脏、肾脏功能不全的维生素D缺乏症。最近日本Kureha公司报道,它们还具有抑制白血病细胞和骨髓肿瘤细胞生长的作用。25-羟基胆固醇(4)是合成1和2的关键中间体。文献已有许多关于它的合成报道。     

液相色谱-大气压化学电离串联质谱法测定婴幼儿配方奶粉中的维生素D

建立了婴幼儿配方奶粉中维生素D的液相色谱-大气压化学电离串联质谱(LC-APCI-MS/MS)分析方法。样品经正己烷和甲基叔丁基醚混合溶液提取,ProElut VDC固相萃取柱净化,Kinetex C_(18)色谱柱分离,采用大气压化学电离(APCI)源、正离子扫描和多反应监测(MRM)模式对维生素D_2和维生素D_3进行检测,内标法定量。结果表明维生素D_2和维生素D_3在5~5 000μg/L范围内均具有良好的线性关系,检出限为2μg/kg,定量限为5μg/kg。在5、10和100μg/kg添加水平下,维生素D_2和维生素D_3的回收率为85.2%~105.3%,相对标准偏差为4.7%~8.1%。该方法简便准确,灵敏度高,适用于婴幼儿奶粉中维生素D的测定。     

人体血清中3种脂溶性维生素的液相色谱-串联质谱分析方法研究

以人体血清中3种脂溶性维生素检测为例,探讨了一种针对人体内源性代谢物的分析方法。采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)对人体血清中维生素A、维生素D_3和维生素E进行检测,分别通过混合人血清基质加入标准品及内标再扣除内源性物质本底的方法,以及与牛血清白蛋白(BSA)模拟基质加标的方法建立标准曲线进行定量分析。结果表明,采用混合人血清基质所建方法对维生素A、维生素D_3和维生素E的检出限分别为4.2、0.8、67.2 ng/mL,定量下限分别为13.7、2.6、221.9 ng/mL。两种方法的线性相关系数均大于0.996;对于实际样品在低、高两个加标浓度下的回收率为90.7%～112%,相对标准偏差(RSD)为1.0%～4.5%,具有良好的准确性和重现性。对40组未知样本的检测结果表明,两种方法无统计学差异。因此,对于人体内源性代谢物采用混合人血清基质扣除本底的方法,可以实现标准品与待测样品基质匹配的准确分析,有利于临床相关疾病的便捷诊断。     

HPLC测定四水合硫胺焦磷酸酯原料药含量

1999年,FDA批准了注射用的12种复合维生素(CERNEVIT-12),该制剂不同于以往的单纯性水溶性维生素与单纯性的脂溶性维生素组合,它是一种同时具备水溶性与脂溶性维生素的复合维生素产品,能够为患者提供全面的维生素支持.     

超高效合相色谱法快速测定保健食品中10种脂溶性维生素

脂溶性维生素作为保健食品重要的功效指标,现有的标准方法存在测定组分少、样品前处理过程复杂、对人员操作能力要求较高等问题,因此建立一种快速、简便、准确,且能同时检测多种常见脂溶性维生素的方法具有重要的现实意义。该研究采用超高效合相色谱(UPC²)建立了同时测定保健食品中维生素A棕榈酸酯、维生素A醋酸酯、维生素E醋酸酯、维生素K₁、α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚、维生素D₂、维生素D₃等10种常用脂溶性维生素的方法。样品经含75%二甲基亚砜(DMSO)的水溶液在45 ℃水浴超声15 min破乳,再加入正己烷振摇提取90 min, 3000 r/min离心10 min,取上清液过滤后进行分析。使用LC-Simulator软件对色谱条件进行模拟及优化,选用ACQUITY UPC² Viridis HSS C18 SB色谱柱进行分离,CO₂和乙腈-甲醇(85∶15, v/v)为流动相,梯度洗脱,流速1.9 mL/min,柱温30 ℃,选取10种脂溶性维生素各自的最大吸收波长检测,外标法进行定量。结果表明,10种脂溶性维生素在各自范围内线性关系良好,相关系数(r)均大于0.9997,检出限(LOD)和定量限(LOQ)分别为片剂:0.2~30 μg/g和0.8~75 μg/g,胶囊:0.4~60 μg/g和2~150 μg/g,样品平均加标回收率在96.5%~113.9%之间,RSD均小于4%,精密度、稳定性、重复性测定结果的RSD值也均小于2%。经比较,该方法测定结果与现有的国家食品安全标准基本一致,但该方法简单、快速、灵敏、准确,可满足保健食品中10种脂溶性维生素的检测要求,为保健食品中脂溶性维生素的快速同时检测奠定基础。     

食品中维生素D与25-羟基维生素D检测技术及含量分布研究进展

维生素D是一种对于维持人体健康具有重要作用的脂溶性维生素,25-羟基维生素D是其在人体内循环和存储的主要形式。食品中维生素D和25-羟基维生素D前处理的通常采用碱皂化、有机溶剂提取、固相萃取或者半制备色谱净化;其测定方法多为放射免疫法和液相色谱法。液相色谱串联质谱凭借高灵敏度和高准确度,目前在食品中维生素D和25-羟基维生素D测定中发挥重要作用。近年来二维液相色谱和超高效超临界流体色谱由于其强大的分离能力,在食品中维生素D和25-羟基维生素D的分析中表现出强大的潜力。该文综述了近年来食品中维生素D和25-羟基维生素D的检测方法及二者在动物食品和植物食品中的含量分布研究,以期为建立适合不同食物样品的测定方法,指导居民合理膳食,进行膳食摄入量评估等研究工作提供参考。     

反相高效液相色谱法的多波长同时测定预混合饲料中的脂溶性维生素A，α－E，D_3，K_3

反相高效液相色谱法的多波长同时测定预混合饲料中的脂溶性维生素Ａ，α－Ｅ，Ｄ＿３，Ｋ＿３李桂凤，李缙扬，郝征红，聂燕，孟兆宏，李学春（山东省农业科学院中心实验室济南２５０１００）１前言对脂溶性维生素的分析，被许多国内外分析专家认为是高难度的分析项目。本...     

维生素B与铅

1978年 ,Tokarski和Reio发现 ,铅暴露使实验动物 (大鼠 )组织中的硫胺 (维生素B1)和核黄素 (维生素B2 )含量降低 ,并降低血和尿中烟酸浓度。随后发现 ,饲料中缺乏维生素B增强铅的毒性 (TandonSK ,1 984) ,而补充维生素B则可预防铅的毒性 (FloraSJS,1 984)。饲料中缺乏尼克酸可使脑中儿茶酚胺水平改变 ,铅中毒症状加重 (FloraSJS ,1 981 ) ,给予维生素B1则可预防牛、大鼠、鱼等实验动物血、肾和脑中的铅蓄积 ,降低铅致生物化学变化 ,加快组织中的铅排泄 ,并可降低铅中毒动物的死亡率 (BrattonGR ,1 981 ;FloraSJS ,1 986;GhazalyK…     

在线富集毛细管液相色谱法分析脂溶性维生素和β-胡萝卜素

以硅胶基质ODS整体柱为分离柱, 建立了毛细管液相色谱-紫外/可见光度法测定脂溶性维生素和β-胡萝卜素的方法. 对流动相组成、流速、样品溶解液和进样体积等参数进行了系统优化, 采用溶剂梯度区带压缩效应作为在线富集技术来提高检测灵敏度. 与传统的进样方式相比, 采用溶剂梯度区带压缩在线富集技术时, 在不损失分辨率的前提下, 可通过增大进样体积将脂溶性维生素和β-胡萝卜素的检测灵敏度提高34～60倍. 方法可用于检测玉米中的痕量维生素E.     

维生素D_2-A和CD片段醇的合成工艺改进

以维生素D_2(V-D_2)为原料,经高锰酸钾氧化、选择性切断和还原反应同时合成了维生素D_2-A(总产率30%)和CD片段醇(总产率45%),其结构经~1H NMR确证。     

高硒情况下维生素E对老龄大鼠血清中抗氧化作用的影响

研究了高Se或高维生素E下，老龄大鼠体内抗氧化活性的变化以及高Se下维生素E对其体内抗氧化水平的影响。将十二月龄Wistar大鼠32只随机分成4组：（1）正常饲料组；（2）高Se饲料组；（3）高维生素E饲料组；（4）高Se高维生素E饲料组。饲至十周末，处死大鼠，按试剂盒要求取其血液制成血清测GSH－Px,SOD活性，MDA含量。结果表明，高Se或高维生素E下饲养下的大鼠与对照组比较，血清中GSH－Px活性升高（P＜0．05）。SOD活性未见改变，MDA含量分别减少50％和56％，有显著差异（P＜0．01）；维生素E与高Se合用与高Se组比较能进一步同GSH－Px,SOD活性（P＜0．01）。结论：高Se会升高老龄大鼠的抗氧化活性，而与维生素E合用更加升高老龄大鼠血液中抗氧化活性。     

猪去氧胆酸化学 8:锇催化不对称双羟化合成 (24R,25R)-24,25,26-三羟基胆固醇

本文报道应用锇催化不对称双羟化对甾体化合物侧链三取代双键的反应合成得光学纯3a和3b,(3a∶3b=6.5:1),收率分别为71％和11％.从3a经五步反应合成新的维生素D_3类似物的关键中间体(24R,25R)-243 25,26-三羟基胆固醇(10).     

PAN-Co配合物用于维生素B12的示波测定

维生素 B12 是一种用于治疗恶性贫血和其他巨细胞型贫血的药物 .对维生素 B12 的测定 ,一般采用光度法[1～ 4 ] ,通过测定维生素 B12 中的钴含量可以换算出维生素 B12 的含量 . 1 - ( 2 -吡啶偶氮 ) - 2 -萘酚( PAN)是一种萃取光度法和光度测定或荧光测定 Al3+、Cd2 +、Co2 +、Ga3+等金属离子的显色剂 .在适宜的 p H值条件下 ,PAN能与 Co2 +等多种金属离子形成有色配合物 [5] .本文利用 PAN可在 Na OH底液中产生灵敏切口且当向其中加入含 Co2 +的溶液时 ,PAN的切口随 Co2 +的加入量线性降低的示波特性 ,对维生素 B12 中的钴含量…     

协同萃取在分析化学中的应用

所谓协同萃取,就是用两种或两种以上萃取剂萃取金属离子,此时其分配比(D_协)应显著大于每一萃取剂在相同条件下单独使用时分配比之和,即D_协>D_(加和),如D_协相似文献