控温相变免疫分析测定雌酮

通过热引发聚合与氧化还原引发聚合，合成水凝胶，作为雌酮全抗原(E1— BSA)载体；以异硫氰基灾光素标记雌酮的单克隆抗体(McAb)作为示踪剂，建立了控温相变竞争免疫分析测定雌酮(EI)的方法并应用于分析血清样品。实验表明：以热引发聚合合成的水凝胶为载体的荧光免疫分析方法具有更高的灵敏度，它的线性范围为10-700μg/L，检出限为1μg／L(n=10，3倍空白)。经水凝胶性质的比较(包括LCST、非特异性吸附、抗原与抗体反应时间及固定化抗原活性)，证明了热引发聚合的水凝胶较氧化还原引发聚合的水凝胶更适合于作为免疫分析的载体。     

人脑乙酰胆碱酯酶的分离纯化及特性

人脑纹状体及部分丘脑AChE在低盐缓冲液中以1％Triton X-100溶脱后,经Con A、短臂及长臂凝胶配基亲和层析纯化在还原条件下SDS-PAGE呈一主带,纯化的AChE比活性可达3384U/mg,产率20％,其单体分子量66 kD,聚丙烯酰胺凝胶电泳显示有单体及二、四、六、八聚体存在,等电点在pH5.3—6.0之间,人脑AChE活性大部分能用Con A亲和层析法回收说明为糖蛋白,纯化的人脑AChE与抗电鳐电器官AChE单克隆抗体3F3无抗原抗体反应,而与IH11及2G 8有弱的交叉反应,以Con A及短臂凝胶配基亲和层析纯化的人小脑AChE为抗原免疫Balb/c小鼠产生的抗血清与电鳐电器官AChE有较强的免疫交叉反应而与人红细胞膜AChE反应较弱,纯化的人脑AChE经还原羧甲基化及TPCK处理的胰蛋白酶切割后,再用反相HPLC分离,显示几个大肽峰及许多小肽峰,几个大肽峰以ELISA法测定有抗原性。     

满江红鱼腥藻单克隆抗体的制备和应用研究

建立了40株分泌抗满江红鱼腥藻特异性单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株。 根据免疫荧光抗体试验,40个McAb分为8个类型。这8类McAb将采自世界名地的195个品种(系)满江红的体内鱼腥藻分为8个抗原群。 McAb对人工萍藻共生体和杂交满江红体内鱼腥藻的鉴定结果表明,人工萍藻共生体的鱼腥藻保持其在供体满江红叶腔中的抗原性,杂交满江红体内鱼腥藻保持其母本满江红体内鱼腥藻的抗原性,二者都不因蕨体遗传性状的改变而发生抗原结构变异。     

十二烷基硫酸钠毛细管电泳法分析非还原单克隆抗体药物纯度的前处理条件优化

十二烷基硫酸钠毛细管电泳法因具有快速、分辨率高的优势，已成为单克隆抗体纯度分析的主流方法。在非还原单克隆抗体纯度检测中，其样品前处理过程对于结果有显著影响。为优化样品前处理，考察了以碘乙酰胺和N-乙基马来酰亚胺为巯基封闭剂，在pH 6.0~9.0的样品缓冲液条件下，不同种类和批次的单抗的纯度。发现在两种巯基封闭剂中，高pH的样品缓冲液会影响巯基封闭的效果，产生较多的抗体片段；而在低pH条件下，抗体片段较少，单抗的纯度更高。因此在进行非还原单抗的纯度检测中，pH 6.0的样品缓冲液为最佳的前处理条件。     

圆二色谱和紫外可见光谱研究抗体-卟啉的相互作用

圆二色谱（CD）和紫外可见光谱（UV－VIS）可用来研究单克隆抗体（McAb)－卟啉之间的相互作用，卟啉形成McAb－卟啉复合物，在Soret带区域最大吸收峰有显著红移和增色现象，在350－450nm区域，形成复合物时能检测诱导的CD光谱。CD光谱遵守朗伯－比尔定律，显示等吸收行为。McAb－卟啉复合物的紫外可见吸收及诱导的CD光谱在PH6－11的范围内保持不变，说明复合物异常稳定，也说明McAb－卟啉结合位点之间疏水相互作用是主要因素。     

Preparation of Europium Induced Conformation—specific anti—calmodulin Monoclonal Antibody

Monoclonal antibody technique was employed to detect the conformational difference of CaM induced by metal ions. A trivalent europium ion induced conformation-specific anti-calmodulin monoclonal antibody was successfully prepared with europium-saturated calmodulin as antigen.     

抗活化血小板单克隆抗体与尿激酶杂合分子的纤溶作用

用双功能团试剂将尿激酶(UK)B链和抗人活化血小板α-颗粒膜蛋白GMP-140单克隆抗体(SZ-51)的Fab片段共价偶联。偶联的杂合分子UK-SZ-51保留了原抗体的结合专一性,它在体外的溶栓效率较尿激酶提高约5倍,其溶栓作用对血浆中纤维蛋白原的含量无影响。     

NEWS

视黄醇结合蛋白(RBP)是一种低分子量蛋白,其分子量为21000,广泛分布于人体血清、脑脊液、尿液中。在正常血浆中,90%的RBP与甲状腺结合蛋白结合,不能被肾小球滤出;10%的游离RBP经肾小球滤除后被肾小管重吸收。     

稻瘟灵单克隆抗体的制备及评价

该文制备了农药稻瘟灵的单克隆抗体,并建立了稻瘟灵的酶联免疫吸附（ELISA）检测方法。在完全保留稻瘟灵结构的基础上从二硫杂环戊烷结构中衍生不同长度的活性手臂制备了2个半抗原,并分别与载体蛋白偶联合成免疫原与包被原。通过小鼠免疫、细胞融合、淘筛、腹水制备等步骤获得特异性识别稻瘟灵的单克隆抗体mAb－DWL。结果显示,基于mAb－DWL构建的间接竞争ELISA法的半抑制浓度（IC50）为55.2 ng/mL,线性范围为4.6 ~ 530.2 ng/mL,其与结构类似物的交叉反应可忽略不计。所建立的ELISA方法对蔬菜及粮食等样品的加标回收率为77.2% ~ 116%,可用于实际样品的快速检测。     

胶体金免疫层析法快速检测腹泻性贝毒软海绵酸的研究

腹泻性贝毒是一类分布较广的赤潮毒素,严重威胁到人类的健康和安全。本文用胶体金标记利用细胞融合技术制备的抗软海绵酸单克隆抗体,使用卵清蛋白合成高偶联比的包被抗原,以硝酸纤维素膜为载体,利用免疫层析技术原理,建立了快速检测软海绵酸的免疫层析试纸条方法。方法检出限12 ng/mL(0.96纳克/条)。