酶联免疫吸附法直接测定血清雌二醇

本合成了３种不同载体蛋白的雌二醇抗原，研究了载体蛋白免疫原性对雌二醇抗体产生的影响。应用酶联免疫吸附分析法测定了血清中雌二醇，浓度范围为５－１６０ｎｇ／ｍｌ（１．８×１０＾－＾８－５．９×１０＾－＾７ｍｏｌ／Ｌ）．ＲＳＤ％小于１０．％，检测限为１．９７ｎｇ／ｍｌ，相当于９８．５ｐｇ／孔（按空白平均值的二倍标准偏差计算）。另外，本还建立了一种用考马斯亮蓝Ｇ－２５０测定半抗原与蛋白结合比的方法，提     

骨巨细胞瘤组织块的冻存与复温培养观察

本文以10％二甲亚砜或15％甘油为保护剂,在液氮温度(-196℃)下将6例骨巨细胞瘤的组织块保存了3—180天.在复温培养中冻存组织块的各种细胞成分均能存活,其细胞形态、生长行为及乳酸脱氢酶同功酶谱等特点均与用新鲜组织块培养的细胞相同.电子显微镜观察显示二甲亚砜对细胞超微结构的冷冻保护作用优于甘油.本实验证明骨巨细胞瘤组织块的冻存以缓慢降温、快速复温为宜,因为在上述条件下冰晶主要形成于细胞间隙,对细胞损伤较小.     

荧光免疫法测定生物样品中的氯胺酮

制备了氯胺酮的多克隆抗体,以间接酶联免疫吸附法为基础,异硫氰酸荧光素为荧光探针,建立了检测氯胺酮的荧光免疫法。在优化的反应条件下,方法的线性范围为1～1000μg/L,检出限为0.48μg/L。不同浓度的氯胺酮在人体血清和尿液样品中的加标回收率在99%～107%。方法适用于生物样品中氯胺酮的检测。     

生物素-亲和素放大酶联免疫吸附法测定氯胺酮

建立了检测氯胺酮的生物素-亲和素放大酶联免疫吸附测定法(BA-ELISA)。实验最佳测定条件:抗原包被浓度为2.0mg/L、氯胺酮单克隆抗体浓度为10.2mg/L,生物素化羊抗小鼠IgG(Biotin-IgG)和酶标链霉亲和素(SA-HRP)的最佳反应浓度分别为0.29和1.0mg/L。在此优化条件下,方法的线性范围为0.1～1000μg/L;检出限为0.03μg/L。氯胺酮生物样品的加标回收率为94%～102%。与酶标二抗体系ELISA法相比,BA-ELISA具有更高的灵敏度,适于低浓度氯胺酮的检测。     

人血清吸收光谱的研究

用吸收光谱的方法测试正常人血清和癌症病人的血清,发现它们的吸光度有差异。另外,在人血清中加入一定数目的癌细胞后测其吸光度,得到一些有意义的结果。     

甲基睾酮的控温相分离荧光免疫分析

本文报道一种新的甲基睾酮（ＭＴ）测定的免疫分析法。通过将ＭＴ与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）偶联制得了ＭＴ全抗原ＭＴ－３－ＢＳＡ（ＡｇＭＴ）,将ＡｇＭＴ经兔子免疫获得了针对ＭＴ的多克隆抗体。与温度敏感性水凝胶偶联的抗原和游离半抗原ＭＴ竞争性地与有限量的异硫氰基荧光素标记抗体反应。根据临界析相温度以上免疫复合物沉淀的特性进行分离,降低背景干扰。该法对ＭＴ测定的线性范围在２７．５ｎｇ／ｍＬ￣１．１μｇ／ｍＬ,     

生物素-亲和素体系测定雌酮

雌酮与牛血清白蛋白共价结合,合成雌酮的完全抗原。利用此抗原免疫小鼠,通过细胞融合技术制备了雌酮的单克隆抗体,经纯化表征知,抗体是IgG1型,相对分子量为164000,与固定抗的亲和常数为8.2×10^8L/mol。以生物素化的羊抗鼠免疫球蛋白及辣根过氧化物酶标记的链亲和素为标记体系,通过竞争抑制的方式测定游离的雌酮,结果表明：雌酮在10～10000pg/mL内呈线性关系。     

TISSUE CRYOPRESERVATION AND REWARMING STUDY ON GIANT CELL TUMOR OF BONE

An attempt has been made of cryopreservation of tissue fragments from 6 GCTB surgicalspecimens. They have been kept in 10% DMSO or 15% glycerol medium and stored in liquidnitrogen for periods up to 180 days. Tumor cellular components survive the process of slowfreezing and rapid thawing as cellular growth is successful in subsequent culture. Thoughcertain reversible ultrastructural changes have been detected, no apparent distinction couldbe found in microscopic morphology, motility, growth behavior and LDH isozyme pattern be-tween cultured cells of the cryopreserved fragments and those of the fresh ones. Electronmicroscopy shows that DMSO exceeds glycerol in protecting the ultrastructure of the cells.Slow cooling and rapid thawing is recommended because ice-crystals form in the intercellularspace. which causes only light damage to the cells.     

时间分辨荧光免疫分析法直接测定雌二醇

合成了雌二醇抗原,并获得了雌二醇单克隆抗体,通过酶联免疫吸附法测得效价为１．０×１０＾７。使用洗脱增强－时间分辨荧光免疫分析法测定了血清中的雌二醇,浓度范围为１．０×１０＾－２－１．０×１０＾３μｇ／Ｌ,最低检出限为５．６ｎｇ／Ｌ,批内ＲＳＤ％小于３．７％,批间ＲＳＤ％小于７．５％。将测定结果 放射免疫分析法作了比较。