茶多酚对6-OHDA诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用

茶多酚在体内具有广泛的生物活性和药理作用,有助于预防与氧化应激相关的疾病,比如癌症,心血管疾病,神经退行性疾病和衰老. 氧化应激参与了帕金森病（PD）的病理进程. 活性氧在PD的发病机制中发挥了重要的作用,氧自由基直接损伤细胞膜引起脂质过氧化,损伤蛋白质和各种功能酶引起蛋白质沉淀,诱导促凋亡因子的表达,损伤DNA,最终导致了细胞的凋亡. 然而,关于茶多酚对PD的预防和治疗作用目前还不清楚. 本文应用氧化应激诱导的PD病理细胞模型,评价了茶多酚的神经保护作用. 结果表明茶多酚这类植物天然抗氧化剂对氧化应激诱导的细胞凋亡具有明确的抑制作用. 实验中我们选择了6-OHDA诱导的SH-SY5Y细胞作为细胞模型, 运用了MTT、流式细胞术、荧光显微成相, 竞争性ELISA和蛋白质杂交等方法研究了SH-SY5Y细胞的凋亡特性. 结果表明,6-OHDA对SH-SY5Y有时间-浓度依赖性细胞毒性,100 μmol/L 6-OHDA处理24 h,细胞活力减少50 %,同时伴随着活性氧增加（用ＥＳR）,线粒体膜电位降低,细胞内钙离子和一氧化氮增加,nNOS和iNOS表达量上升及蛋白结合的硝基酪氨酸水平升高. 单独茶多酚处理对细胞没有太大的影响,而茶多酚预处理可显著降低6-OHDA所产生的细胞毒性. 溶液实验证明,茶多酚对6-OHDA的自氧化有浓度-时间依赖性抑制作用（用ＥＳＲ）. 本研究表明茶多酚可能是通过活性氧-一氧化氮途径,减少过氧亚硝基的生成来对6-OHDA诱导的细胞凋亡表现保护作用的. 本文的实验结果提示茶多酚在治疗PD等慢性神经退行性疾病上可能是一种有着潜在疗效的药物.     

中国地鼠肺正常细胞V_(79)和癌变细胞V_(79)-B_1膜上巯基结合位置的性质

本文用五种不同链长的马来酰亚胺自旋标记化合物研究了中国地鼠肺正常细胞V_(79)和癌变细胞V_(79)7-B_1膜蛋白巯基结合位置的性质.从所得ESR波谱计算了强、弱固定化成分比(S/W)和旋转相关时间(τ_c).由这些波谱参数随自旋标记化合物分子链长的改变推论出V_(79)和V_(79)-B_1细胞膜蛋白巯基结合位置的形状是圆锥形的,而V_(79细胞膜蛋白巯基结合位置比V_(79)-B_1细胞的深和窄小。     

ESR自旋捕集技术的发展和在生物医学研究中的应用

ESR是研究自由基最直接和最有效的技术,但是这些自由基必须是相对稳定的,而且要达到一定浓度才能用ESR技术检测和研究. 而生物体系中产生的自由基大部分是不稳定的,这是常规ESR波谱仪无法检测的. 为了克服ESR技术的这一局限性,发展了自旋捕集技术,这是目前研究生物和医学体系中活泼自由基应用最多也是最成功的方法, 每年都有新的自旋捕集剂合成和大量在生物医学应用的报道,为自由基生物医学的研究和发展做出了巨大贡献.  作者建立和发展了捕捉超氧阴离子自由基、羟基自由基、脂质过氧化产生的脂类自由基、一氧化氮自由基和单线态氧及一氧化氮和氧自由基同时检测技术. 利用这些技术开展了细胞、组织产生自由基机理,天然抗氧化剂的筛选及一些重大疾病如炎症、心脏病、老年痴呆症、帕金森综合症,中风,辐射损伤,蛋白质氧化,植物光合系统中产生活性自由基和植物的发病机理研究中的应用,取得了一系列研究结果.     

用ESR研究缺血再灌注组织和多形核白细胞产生的NO自由基

总结了近年来我们实验室用低温顺磁共振(ESR)技术在生物体系,特别是在组织缺血再灌注和多形核白细胞中研究NO自由基的技术,波谱解析和所得到的结果.     

自旋捕集技术及其应用

自旋捕集技术是六十年代末期发展起来的一种检测短寿命自由基的方法。由于它在研究化学反应和生命过程中所产生的短寿命自由基方面具有独特的优越性,在短短的十几年内,得到了迅速的发展和广泛的应用。     

STUDIES ON THE PROPERTY OF SULFHYDRYL BINDING SITE ON THE LUNG NORMAL AND CANCER CELL MEMBRANE OF CHINESE HAMSTER WITH MALEIMIDE SPIN LABELS

In this paper, five maleimide spin labels with different chain lengths were used to studythe properties of binding sites of sulfhydryl groups on the meanbrane proteins of normal cellV_79 and cancer cells V_79-B_1 in the lung of Chinese hamster. The ratio of the strongly immobi-lized component to the weakly immobilized eomponent (s/w) and the rotational correlation time(τ_e) were calculated on the basis of ESR spectra. From the varying of the s/w and τ_c withthe ehain lengths of spilt labels it was deducted that the binding sites of sulfhydrylgroups on V_79 and V_79-B_1 membrane proteins were of eonical shape and that the binding sitesof sulfhydryl groups on V_79 membrane protein were deeper and narrower than those on V_79-B_1.     

几种氮氧自由基在植物中稳定性的ESR研究

为了在植物中合理地应用自旋标记物,文中比较了几种氮氧自由基在植物体中的稳定性. 在相同的条件下,将这几种氮氧自由基的稀溶液通过渗吸的方法导入植物体.在不同时间、植物体不同部位,用电子顺磁共振（ESR）方法检测信号的强弱程度,并且观察植株在吸入含氮氧自由基的稀释液后,生长状况的变化.发现能够在植物体中稳定存在、信号强、对植株毒害小的氮氧化合物的几个特点.如;分子量较小,大多为五元环的吡咯衍生物.绘制了氮氧自由基在植株中随时间而降解的曲线,通过比较发现,以浓度为10^-4 mol/L的稀释液浸泡,可以得到较好的顺磁信号,同时也不影响植物的生长.这一研究将对植物整体植株的顺磁成像技术的发展有帮助,同时有可能成为一种植物生理检测的方法.     

葡萄籽中多酚类物质对氧自由基清除作用的ESR研究

用ESR自旋捕集技术研究了从葡萄籽分离的单体、二聚体和三聚体等多酚类物质对羟基自由基和超氧阴离子的精除作用,并与化学发光法的测定结果进行了比较,得到了较一致的结果,证明葡萄籽中多酚类物质对氧自由基的确有较好的清除作用,这很可能是喝少量葡萄酒有利于身体健康的原因.     

利用电子自旋共振（ESR）技术研究一氧化氮自由基在心脑血管疾病和健康中的“双刃剑”作用

一氧化氮(NO)是一个简单的气体自由基,在心血管、免疫和神经系统是一个重要的信号分子．NO由不同形式的NO合酶,内皮型NO合酶(eNOS),神经型NO合酶(nNOS)和诱导型NO合酶(iNOS)在不同细胞中产生．NO在调节血压和血管稳态方面发挥重要的生理作用,但是,由iNOS产生过量的NO就会抑制心脏收缩、损伤线粒体甚至引起细胞凋亡．NO可以影响神经递质释放及突出体生成过程和可塑性,NO在脑的发育和维持调节脑回路、作为学习的信号分子发挥着重要作用．然而,越来越多的证据表明,如果NO产生过多,就可能损伤心血管和神经,甚至引起心脑血管还推行型疾病．该文综述了近年来利用ESR研究NO在心脑血管疾病和健康方面的“双刃剑”作用和天然抗氧化剂的保护作用的一些结果．     

茶多酚及其单体结构自由基的ESR研究

通过ESR检测方法研究了邻苯三酚、茶多酚及其四种单体的自氧化醌类自由基的ESR波谱信号,系统阐明了这几种物质的内在结构联系.