紫外分光光度法检测溶氧对bFGF发酵的影响

探索溶氧对碱性成纤维细胞生长因子(basic Fibroblast growth factor,bFGF)发酵过程的影响及其控制方法.采用补料分批发酵,在不同溶氧控制方式下,紫外分光光度法测定bFGF蛋白质浓度和发酵液中菌体的产量,考察发酵过程中溶氧对bFGF表达的影响.结果表明控制溶氧为50％,30L罐发酵20h,产菌达34.54g/L,bFGF为18mg/L,与其他溶氧组比较产量显著增高,由此建立了最佳溶氧条件.溶氧对bFGF发酵表达有重要影响,优化溶氧条件有利于改进生产工艺从而节约成本和提高产量.     

RP-HPLC同时测定白花檵木花中的槲皮素和山奈酚

建立用反相高效液相色谱法同时测定白花檵木花中槲皮素和山奈酚含量的方法。采用Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);柱温:25℃;流动相为乙腈-0.4%磷酸水溶液(35:65,V/V);流速为1.0mL·min-1;检测波长为360nm。槲皮素在1.08×10-3—1.08×10-1μg·μL-1的范围内具有良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率97.23%,RSD为1.26%;山奈酚在1.04×10-3—1.04×10-1μg.μL-1的范围内具有良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率99.78%,RSD为0.46%。方法简便、准确、可靠,可作为白花檵木花中槲皮素和山奈酚的定量分析方法。     

大孔吸附树脂吸附法结合氯仿溶解法分离混合二元酸

建立利用大孔吸附树脂吸附法结合氯仿溶解法分离混合二元酸中丁二酸、戊二酸和己二酸的方法并使其分别达到一定的纯度和收率。首先利用LC-ESI-MS方法测定了混合二元酸中丁二酸、戊二酸和己二酸含量,然后通过对3种大孔吸附树脂AB-8、NKA-Ⅱ和D-380吸附性能的综合比较,筛选出AB-8大孔吸附树脂作为吸附剂,以水、10%、30%和95%乙醇水溶液作为洗脱剂对混合二元酸进行初步的分离,得到A、B、C和D4个分离部位,再利用氯仿对二元酸溶解度的不同,将该4个分离部位在55℃水浴恒温分别用氯仿进行溶解、过滤,通过LC-ESI-MS方法测定确定相应部位的组成情况后进行适当合并,最终达到将混合二元酸分离的目的。丁二酸纯度:70.3%,收率:92.7%;戊二酸纯度:94.1%,收率89.2%;己二酸纯度:90.7%,收率:88.7%。     

高效液相色谱法测定生物检材中毒鼠强

建立了生物检材样品中微量毒鼠强的高效液相色谱法.生物检材样品经用乙酸乙酯提取,在优化的色谱条件下,以ZORBAX Eclipse XDB-C8>(4.6 mm×150 mm,5μm)为分离柱,乙腈-水(15 85,体积比)为流动相,在220 nm波长下进行检测;方法的线性范围为5～500μg·L-1,相关系数为0.999 9,方法的检出限(S/N=3)为0.5μg·kg-1,生物检材样品(包括血浆、胃内容物、肝、心)加标平均回收率在92.3～98.5%之间.相对标准偏差为2.67%～4.53%.