鼠脑组织中6-羟基-1-甲基-1,2,3,4-四氢-β-咔啉及其相关生物胺的高效液相色谱-电化学检测

建立了大鼠脑组织中6-羟基-1-甲基-1,2,3,4-四氢-β-咔啉(6-OH-MTHβC)、5-羟色胺(5-HT)和5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量的高效液相色谱-库仑阵列电化学检测(HPLC-ECD)方法。采用的色谱柱为DiscoveryHS F5柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为缓冲液（40 mmol/L柠檬酸+20 mmol/L磷酸氢二钠+0.3 mmol/L乙二胺四乙酸二钠,pH 4.0）-甲醇（体积比为78∶22）混合液,流速为1 mL/min。6-OH-MTHβC、5-HT、5-HIAA在1.0～500.0 μg/L范围内线性关系良好(r>0.9992),检出限分别为0.56,0.26,0.53 μg/L,日内和日间精密度(以相对标准偏差表示)均低于6.1%,回收率分别为87.1%～98.2%,87.0%～95.3%,90.1%～97.7%。用该方法检测新生7 d的SD胎鼠脑内6-OH-MTHβC及5-HT、5-HIAA的含量,发现SD胎鼠在急性酒精中毒8 h后6-OH-MTHβC显著上升(P<0.05);而5-HT和5-HIAA的含量有所下降,但无显著性差异。该法简便、稳定、灵敏度高,适用于测定鼠脑组织中6-OH-MTHβC和5-HT,5-HIAA含量的相关研究。     

Salsolinol合成酶的高效液相色谱-电化学活性检测方法研究

Salsolinol合成酶是一种催化多巴胺(DA)和乙醛(AcH)生成Salsolinol的酶,它在内源性儿茶酚异喹啉类物质代谢过程中起重要作用。研究显示该类物质具有一定的神经毒性,与帕金森病(PD)发病机制密切相关,因此Salsolinol合成酶可能是PD的一种关键致病因子。本文从雄性SD大鼠鼠脑中分离得到Salsolinol合成酶的粗酶液,采用高效液相色谱结合电化学检测器体系(HPLC-ECD)建立了一套灵敏度高、重复性较好的酶活检测方法,并进行了方法稳定性和灵敏度的验证,方法简便、稳定,适用于不同生物样品中该酶活性的测定;同时也将该方法应用于超滤分离后不同截留分子量样品的活性测定,结果显示该酶的活性主要集中在3K下层滤液。     

Magnéli相亚氧化钛Ti8O15的电子结构和光学性能的第一性原理研究

采用基于密度泛函理论的平面波超软赝势法研究了Magnéli相亚氧化钛Ti₈O₁₅的电子结构和光学性能. 计算出的能带结构显示Ti₈O₁₅相比锐钛型TiO₂禁带宽度大幅度降低. 态密度分析表明, 其原因在于Ti₈O₁₅的O原子的2p轨道以及Ti原子的3p, 3d轨道相对于TiO₂的相应轨道向左产生了偏移, 同时由于O原子的缺失使得Ti原子的3d, 3p轨道多余电子在Fermi能级附近聚集形成新的电子能级. 态密度分析结果还显示, 相对于TiO₂, Ti₈O₁₅ Fermi能级附近电子格局发生了如下变化: O原子的2p轨道电子贡献减少, Ti原子的3d轨道的电子对Fermi能级贡献增大. 光吸收计算图谱表明, TiO₂仅在紫外光区有较高的光吸收能力, 而Ti₈O₁₅由于禁带宽度变窄引起光吸收范围红移到可见光区, 从而在紫外光区和可见光区都有较高的光吸收能力, 计算结果与实验得到的紫外-可见漫反射吸收光谱结果一致. 关键词： 第一性原理 8O₁₅')" href="#">Magnéli相亚氧化钛Ti₈O₁₅ 电子结构 光学性能     

Magnli相亚氧化钛Ti8O15的电子结构和光学性能的第一性原理研究

采用基于密度泛函理论的平面波超软赝势法研究了Magneli相亚氧化钛Ti8O15的电子结构和光学性能.计算出的能带结构显示Ti₈O₁₅相比锐钛型TiO₂禁带宽度大幅度降低.态密度分析表明,其原因在于Ti₈O₁₅的O原子的2p轨道以及Ti原子的3p,3d轨道相对于TiO₂的相应轨道向左产生了偏移,同时由于O原子的缺失使得Ti原子的3d,3p轨道多余电子在Fermi能级附近聚集形成新的电子能级.态密度分析结果还显示,相对于TiO₂,Ti₈O₁₅Fermi能级附近电子格局发生了如下变化:O原子的2p轨道电子贡献减少,Ti原子的3d轨道的电子对Fermi能级贡献增大.光吸收计算图谱表明,TiO₂仅在紫外光区有较高的光吸收能力,而Ti₈O₁₅由于禁带宽度变窄引起光吸收范围红移到可见光区,从而在紫外光区和可见光区都有较高的光吸收能力,计算结果与实验得到的紫外-可见漫反射吸收光谱结果一致.     

谷氨酸和γ-氨基丁酸对爪蟾胚胎神经肌肉接点乙酰胆碱自发释放的作用

在培养的爪蟾胚胎神经肌肉细胞的接点上,探测到由于神经末梢自发释放乙酰胆碱(Ach)而在肌细胞上造成的微终板电流(MEPC)活动,灌流10μmol/L谷氨酸后,这种活动的频率和幅度都有明显的增加,去除谷氨酸后,这种效应仍能保持相当长时间,我们将这一现象称为长时程易化作用,与谷氨酸相反,20μmol/L的γ-氨基丁酸(GABA)对这一电活动的频率和幅度均有明显的抑制作用,去除GABA后,这一电活动反而比加药前更活跃,呈现出一种后增强作用(post potentiation),局部施加药物证明谷氨酸的作用部位在接头,而GABA的作用部位在神经元胞体。     

The Effects of Glutamate and GABA (Gamma-Amino-Butyric-Acid) on Spontaneous Acetylcholine Release at the Neuromuscular Junction in Xenopus Laevis Embryo Cell Cultures

The miniature endplate currents (MEPC's) were recorded at the neuromuscular junction of Xenopus laevis embryo neuron-muscle co-cultured cells. These MEPC's were due to the spontaneous release of acetylcholine from the nerve terminal. After perfusion with glutamate (10 μmol/L), both frequency and amplitude of the MEPC's increased. After washing away of glutamate, this effect persisted. We named this phenomena "Long-Term Facilitation".GABA (20 μmol/L) on the other hand had an inhibitory effect on both frequency and amplitude of the MEPC's. After washing away of GABA, the MEPC frequency and amplitude increased. We named this effect "Post-Potentiation". Local perfusion experiments furthermore indicated that the effect of glutamate was restricted to the neuromuscular junction, the effect of GABA was restricted to the soma.     

急性酒精中毒的鼠脑内乙醛及其单胺神经递质缩合物的测定

应用高效液相色谱法测定了急性酒精中毒后新生鼠脑中乙醛的含量,以及乙醛分别与多巴胺、5-羟色胺的缩合产物1-甲基-6,7-二羟基-1,2,3,4-四氢异喹啉(Salsolinol,Sal)和6-羟基-1-甲基-1,2,3,4-四氢-β-咔啉(6-OH-MTHβC)的含量。采用2,4-二硝基苯肼(DNPH)的乙腈溶液在60℃水浴中衍生15min提取脑匀浆中的乙醛,离心后进行色谱分离,检测波长为360nm,本方法简单准确,灵敏度高。应用本方法测定鼠脑组织中的乙醛含量时发现,急性酒精中毒后新生鼠脑内乙醛的含量在24h内显著高于盐水对照组(P<0.05)。同时,采用HSF5柱分离和库仑阵列电化学检测的方法对Sal和6-OH-MTHβC进行分析表明,乙醛浓度升高后,急性酒精中毒鼠脑内Sal和6-OH-MTHβC的含量显著升高(P<0.05)。乙醛的非正常代谢及内源性神经毒素的生成可能在酒精的神经毒性机理中发挥了重要作用。     

酒精处理后鼠脑内单胺氧化酶活性及单胺神经递质代谢变化的测定

应用高效液相色谱法测定了慢性酒精处理后胎鼠脑中单胺氧化酶(MAO)的活性,以及多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)和它们的代谢产物的含量。在怀孕的最后一周内对SD母鼠灌胃酒精,对照组用生理盐水处理,分娩后取胎鼠脑组织进行检测。胎鼠脑线粒体MAO的活性随酒精染毒剂量的增加而递减,呈现出剂量反应关系;与盐水对照组相比,酒精暴露可改变胎鼠全脑中DA和5-HT的水平,但统计结果无显著性差异。其中,HVA和5-HIAA的含量在4.0g/kg酒精处理后显著减少(P0.05)。慢性酒精暴露后MAO活性的下降及DA、5-HT的代谢变化可能在中枢神经系统的发育障碍中发挥了重要作用。     

Effects of Muscle Electrical Activity on the Transmission of Developing Neuromuscular Junction

Miniature endplate potentials (MEPPS) caused by the spontaneous release of ACh from the growth cone of cholinergic neurons, are recorded by the whole-cell patch-clamp technique on a large number of 1-day cultured myoballs which have contact neurites of co-cultured neurons. Both muscle cell and neuron are dissociated from the 1-day-old (about stage 20) Xenopus embryo. Frequency and/or amplitude of MEPPs can obviously increase after the repetitive high-level depolarization caused by the stimuli on muscle cells. No detectable changes of single ACh receptor channel property are observed by using the single-channel recording technique. These results suggest that the mechanism of the increase of MEPPs after electrical activity of postsynaptic muscle cells probably involve some alteration of presynaptic membrane.