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从感染TMV的普通烟叶中分离到含有TMV-RNA复制酶的无细胞提取物(20,000×g沉淀),它能在四种三磷酸核苷(其中三磷酸尿苷用氚标记)、镁离子和放线菌素D的存在下离体合成双链RNA,经酚-SDS提取、Serva纤维素柱层析获得的3H-双链RNA,用聚丙烯酰胺-琼脂糖凝胶电泳、核糖核酸酶处理、热变性、自退火等手段,证实3H-双链RNA中含有TMV-RNA的复制型(RF)和复制中间体(RI),分子量分别为4.0×106和5.0×106,分子杂交竞争试验表明3H-双链RNA中新生链的60-70%为TMV-RNA正链。 相似文献
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