屎肠球菌WEFA23和海氏肠球菌WEHI01发酵荷叶上清的抑菌及抗氧化评价

对益生性屎肠球菌WEFA23和海氏肠球菌WEHI01的荷叶发酵上清液进行抑菌及抗氧化性能评价。采用牛津杯法评价2株肠球菌发酵荷叶上清的抑菌能力;测定其DPPH、羟自由基清除率,SOD、GSH-Px、CAT酶活力;建立细胞氧化应激模型,待荷叶发酵上清液与之孵育后,测定Caco-2细胞的活性氧清除率以及3种氧化酶酶活。结果表明,40mg·mL-1 WEFA23荷叶发酵上清液对6种食源性致病菌均具有抑菌性,其中对沙门氏菌、单增李斯特菌抑制效果最佳。相比发酵前,2种菌的荷叶发酵上清液均具有较强的DPPH及OH·自由基清除能力,抗氧化性的提高与抗氧化酶活的提高呈正相关。在细胞水平上,2种荷叶发酵上清相比于荷叶发酵前均能清除活性氧,且对Caco-2细胞的抗氧化酶活（SOD、GSH-Px、CAT）有增强作用。综上所述,WEFA23发酵荷叶可增强荷叶的抗氧化能力,并具有较强拮抗致病菌的能力。     

屎肠球菌WEFA23拮抗单核增生李斯特菌感染及免疫调节作用

阐明屎肠球菌WEFA23对单核增生李斯特菌感染的影响及免疫调节作用。通过对BALB/c小鼠连续灌胃单核增生李斯特菌4d(109 CFU·d-1)构建感染模型,再连续灌胃8d屎肠球菌WEFA23(109 CFU·d-1),分别于实验第8d和第13d取样,分析单核增生李斯特菌在小鼠体内的定植、小鼠血清指标、组织病理及炎症因子水平。屎肠球菌WEFA23能够提高小鼠存活率,显著抑制单核增生李斯特菌在小鼠肝脏、脾脏、回肠、盲肠和结肠的定植,降低血清丙氨酸氨基转移酶和血清总胆汁酸含量。病理切片分析表明,屎肠球菌WEFA23对单核增生李斯特菌感染引起的肝炎及胃粘膜损伤有明显的缓解作用。同时,屎肠球菌WEFA23能够显著抑制炎症因子IFN-γ,IL-1β的表达。屎肠球菌WEFA23能够有效抑制单核增生李斯特菌的定植,缓解肝炎,增强宿主免疫应答,具有潜在的应用价值。     

植物乳杆菌谷氨酸脱氢酶基因在大肠杆菌中的表达

构建植物乳杆菌谷氨酸脱氢酶基因原核表达载体,表达并纯化蛋白。本研究以植物乳杆菌ZDY 2013基因组DNA为模板,PCR扩增谷氨酸脱氢酶基因,连接到表达载体pET-32a(+)上,重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达和镍柱亲和层析后获得目的蛋白,活性测定显示该蛋白具有谷氨酸脱氢酶的活性。同时,对表达菌株的酸耐受性测定结果表明,细胞对pH 4.5的酸胁迫耐受性提高1.4倍。实验结果为深入研究植物乳杆菌ZDY 2013谷氨酸脱氢酶保护细胞抵御酸胁迫提供有益的参考。 更多还原