低盐胁迫下三疣梭子蟹γ-氨基丁酸及其A型受体相关蛋白对渗透压调节的影响

为探究低盐胁迫下γ-氨基丁酸(GABA)及其A型受体相关蛋白(GABARAP)在三疣梭子蟹渗透压调节过程中起到的作用,实验检测了低盐度10条件下,三疣梭子蟹在0, 3, 6, 9, 12, 24, 36,48 h的血清渗透压、血清氯离子(Cl-)浓度等指标,同时对鳃组织的GABA量以及GABARAP基因表达量变化进行测定.结果显示,血清渗透压和血清Cl-浓度在12 h内显著下降(P0.05), 12 h后趋于稳定;相对0 h,血清Cl-浓度降低17.93%,血清渗透压降低24.46%,与外界海水渗透压的差值维持在(183.21±9.51)mOsm·kg~(-1). GABA量及GABARAP基因表达量波动上升, 12 h后基本维持稳定.研究结果表明,三疣梭子蟹对低盐度条件的适应性调节在12 h内进行,之后基本维持稳定,GABA量以及GABARAP基因表达量在此过程中呈现显著的正相关关系,对血清Cl-浓度的调节起到了重要作用,使得12 h后血清渗透压与外界海水渗透压维持在(183.21±9.51)mOsm·kg~(-1),保证各项生理活动的正常进行.     

黑斑口虾蛄胚胎和幼体不同发育时期脂类及脂肪酸组成分析

通过生物化学成分测定,分析黑斑口虾蛄（Oratosquilla kempi）胚胎和幼体不同发育时期的水分、总脂和脂肪酸的组成及体积分数、质量分数变化．结果显示,黑斑口虾蛄在胚胎和幼体的发育过程中,水的体积分数先降低,至原肠胚期开始升高,到第二相幼体期达到最高,之后又有所回落;脂类占组织干重的比率呈升高趋势,但分别在膜内无节幼体、第二相幼体和仔虾蛄期略有降低;脂类占组织湿重的比率呈降低趋势;花生四烯酸、EPA和DHA的体积分数都呈降低趋势．在胚胎及幼体发育过程中脂类及不饱和脂肪酸是作为能量物质被消耗并且与其组织、器官的形成有密切关系．     

2种乌贼墨黑色素对衰老小鼠心脏糖基化末端产物的清除作用

分析和比较了曼氏无针乌贼墨汁黑色素(Melanin from Sepiella Maindroni Ink, MSMI)和虎斑乌贼墨黑色素(Melanin from Sepia pharaonis Ink, MSPI)对D-半乳糖糖基化模型小鼠心脏内糖基化产物的影响.将80只ICR小鼠随机分为8组,包括空白对照组、衰老模型组以及2种乌贼墨汁黑色素低剂量组(120 (mg·kg~(-1))·d~(-1))、中剂量组(240 (mg·kg~(-1))·d~(-1))、高剂量组(480 (mg·kg~(-1))·d~(-1)).空白对照组皮下注射生理盐水,其他组皮下注射200 (mg·kg~(-1))·d~(-1)的半乳糖,连续灌胃45 d后,对小鼠心脏组织中AGEs、RAGE、es RAGE、sRAGE及血清中Hb-AGE的含量进行检测.结果表明,2种乌贼墨汁黑色素具有清除AGEs及其受体、血清中的Hb-AGE的能力,作用效果与摄入的剂量成正比;其中低剂量与中剂量的MSMI清除血清中的Hb-AGE的效果更明显,但相同高剂量的MSPI清除血清中Hb-AGE的效果更明显.总体看MSMI对心脏组织中的AGEs的清除效果更强、对机体合成RAGE、s RAGE、es RAGE的抑制更为明显.     

交配与未交配三疣梭子蟹肝胰腺蛋白质组学的初步分析

采用双向电泳和基质辅助激光解析串联飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF)研究三疣梭子蟹交配与未交配雌性个体肝胰腺蛋白质表达.使用PDQuest软件分析双向电泳凝胶图像,结果显示:交配组和未交配组凝胶图像上分别能检测到(400±25)和(530±16)个蛋白点,其中共有15个蛋白点表达量有显著性差异(P0.05).与未交配组相比,交配组三疣梭子蟹肝胰腺中6个蛋白点的表达量显著性上升.经质谱鉴定为:磷酸丙糖异构酶、磷酸丙酮酸水合酶、过氧化氢酶、δ-谷胱甘肽S-转移酶、ATP合酶α-亚基和胰凝乳蛋白酶.此外,交配组三疣梭子蟹肝胰腺中9个蛋白点的表达量显著性下降.经质谱鉴定为:延伸因子2、长链酰基CoA脱氢酶、假血蓝蛋白1、假血蓝蛋白2、异柠檬酸脱氢酶、线粒体乙醛脱氢酶X、转酮醇酶、血蓝蛋白α-亚基和腺苷高半胱氨酸酶A.该结果可为揭示三疣梭子蟹卵巢发育机理提供重要参考.     

曼氏无针乌贼墨囊蛋白质提取及双向电泳条件优化

应用TCA/丙酮沉淀法、裂解液法、裂解液-超速离心法以及层析法4种蛋白质样品制备方法,比较了曼氏无针乌贼(Sepiella maindroni)墨囊蛋白质双向电泳的样品制备效果.在此基础上,比较了不同样品处理方法、不同胶条范围以及不同上样量等对电泳结果的影响,筛选出一套较优的分离墨囊蛋白质的双向电泳条件.研究结果表明:TCA/丙酮沉淀法较适合曼氏无针乌贼墨囊蛋白质双向电泳的样品制备.该方法制备的曼氏无针乌贼墨囊蛋白质样品经双向电泳分离,用固相pH 5~8梯度胶条进行等点聚焦,上样量300μg,电泳结束后硝酸银染色,最终获得了分辨率高、重复性好的双向电泳图谱.经过初步图像分析,检测到(389±19)个蛋白点,背景清晰且蛋白质得率较高.