Investigation of voltammetric enzyme-linked immunoassay based on new system of ODA-H_2O_2-HRP

A voltammetric enzyme-linked immunoassay based on a new system of ODA-H2O2-HRP has first been developed and used in the detection of HRP and labelled HRP. By this method, the enzyme-catalyzing reaction of H2O2 oxidizing odianisidine (ODA) couples the electrode-reduction reaction of the oxidizing product of odianisidine, which produces a sensitive polarographic wave at potential of -0.56V (SCE) in Britton-Robinson buffer solution. In using this polarographic wave, a detection limit to HRP is 3.7×10-12g/mL and a linear range 1.0×10-11-2.0×10-9g/mL. And the mechanisms of the coupling reaction and the process of electro-reduction in the ODA-H2O2-HRP voltammetric enzyme-linked immunoassay system have also been carefully studied.     

中性红分光光度法测定肝素钠的研究

在pH 3.0的Britton-Robinson(B-R)缓冲溶液中,中性红与肝素钠相互作用形成复合物而导致溶液吸收光谱发生变化,用分光光度法对光谱变化进行了研究。 中性红溶液在523 nm处有一个强的特征吸收峰,当在其溶液中加入肝素钠后,溶液发生褪色现象,吸收峰强度降低,且没有新的吸收峰出现,吸光度差值(ΔA)与肝素钠的浓度成正比。 对结合反应的条件进行了优化,在最佳条件下利用溶液吸光度值的降低与肝素钠浓度的关系建立了一种测定肝素钠浓度的新方法,测定的线性范围为0.10～15.0 mg·L-1,表观摩尔吸光系数ε=2.037×106 L·mol-1·cm-1,检测限(3σ)为0.073 mg·L-1。 将该方法应用于肝素钠注射液效价的测定,结果令人满意。 用摩尔比法对复合物的结合比进行了推算,两者形成1∶3的复合物。     

ssDNA/十八酸修饰碳糊电极的制备及伏安法表征

将石墨粉与十八酸在80 ℃下混合制成表面富含—COOH的基底碳糊电极(SA/CPE), 然后在活化剂N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)存在下将ssDNA固定到电极表面制备ssDNA修饰电极(ssDNA/SA/CPE). 以亚甲基蓝(MB)为指示剂, 用循环伏安法对SA/CPE和ssDNA/SA/CPE进行电化学表征, 发现其在ssDNA/SA/CPE上较在SA/CPE上的氧化峰电流(i_pa)和还原峰电流(i_pc)分别增大1.9倍和1.7倍, 式电势(E_f)负移8 mV. 把ssDNA/SA/CPE放在互补ssDNA溶液中杂交后, MB的i_pa 和i_pc较在SA/CPE上分别增大1.0倍和0.8倍, E_f负移18 mV. 用0.5 mol/L 的NaOH溶液冲洗使电极表面杂交而成的dsDNA变性洗脱, MB的伏安信号几乎与在ssDNA/SA/CPE上一样. i_pc与SA/CPE上固定的ssDNA质量在1.0×10^－7～5.0×10^－6 g范围内成线性关系, 检测限为2.0×10^－9 g (S/N＝3). 这种既廉价又灵敏的电化学生物传感器有望在转基因植物产品检测研究中得到应用.     

蛋白质的电化学分析研究进展

对蛋白质的电化学分析的进展及应用进行综述。从蛋白质的极谱行为、在固体电极上的电化学行为、催化氢波、与小分子物质的配合作用等多角度介绍了近期的研究热点,分析了蛋白质化学研究的意义与现状,并对今后的发展方向作了展望,引用相关文献28篇。     

抗坏血酸在多壁碳纳米管修饰玻碳电极上的催化氧化

多壁碳纳米管;抗坏血酸;修饰电极;电催化;伏安法     

间苯二胺的电化学及紫外-可见薄层光谱电化学研究

研究了间苯二胺(MPD)在金电极和SnO₂;F膜电极上的循环伏安行为及在SnO₂;F膜电极上的紫外-可见薄层光谱电化学性质.获得了间苯二胺在SnO₂;F膜电极上电氧化的薄层恒电势电解-吸收光谱图,采用双对数法对紫外-可见薄层光谱电化学数据进行了处理.研究了间苯二胺的光谱及电化学性质,求得了间苯二胺的动力学修饰式量电位E⁰和αn等热力学参数.     

ADSORPTIVE BEHAVIOUR OF CARBOXYNITRAZO (CNA) AND ITS NEODYMIUM COMPLEX ON HANGING MERCURY DROP ELECTRODE~*

The adsorptive behaviour of CNA and Nd~(3+)-CNA complex has been studied by linear sweeping voltammetry. Some thermodynamic properties such as the surface concentration and the saturation adsorptive value of CNA on HMDE, the coverage area of one CNA molecule, the adsorption equilibrium constant, the adsorption free energy and the adsorption isotherm of CNA are reported in this paper. The percentages of complexed ligand CNA in total CNA reduced on HMDE with various Nd~(3+) concentrations have been estimated. The experimental facts support the adsorptive reduction meehanism of Nd~(3+)-CNA complex on HMDE.     

以2-磷酸抗坏血酸酯为底物检测碱性磷酸酯酶的微分脉冲伏安法

提出以2_磷酸抗坏血酸酯为碱性磷酸酯酶(ALP)底物微分脉冲伏安法测定ALP的方法 ;2_磷酸抗坏血酸酯在ALP的催化作用下发生水解反应生成抗坏血酸 ,抗坏血酸在玻碳电极上 +0.40V(vsAg/AgCl)被氧化而产生一个灵敏的氧化峰 ,氧化峰电流随着酶浓度的增大而增大 ,借助此氧化峰电流可以测定ALP ,进而可用于以ALP为标记酶的酶免疫分析 ;用微分脉冲伏安法对酶催化反应条件和酶催化反应产物的测定条件进行了详细的研究 ,建立了以2_磷酸抗坏血酸酯为底物的伏安酶联免疫分析新体系 ,测定游离ALP的线性范围是0.4～2.0×103 U/L,检测限为0.3U/L,对游离的IgG_ALP的测定最大稀释比为1∶200000。     

ODA_H_2O_2-HRP偶合反应伏安酶联免疫分析检测植物病毒GFV、TAV和PVY

将邻联茴香胺（ＯＤＡ）＿Ｈ２Ｏ２＿辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）偶合反应伏安酶联免疫分析新体系，应用于植物病毒葡萄扇叶病毒（ｇｒａｐｅｖｉｎｅｆａｎｌｅａｆｖｉｒｕｓ，ＧＦＶ）、番茄不孕病毒（ｔｏｍａｔｏａｓｐｅｒｍｙｖｉｒｕｓ，ＴＡＶ）和马铃薯Ｙ病毒（ｐｏｔａｔｏｖｉｒｕｓＹ，ＰＶＹ）的测定。该法对以上各种植物病毒叶澄清液的测定的稀释比均高于酶联免疫吸附分析（ＥＬＩＳＡ）法，检测范围均宽于ＥＬＩＳＡ法。     

以变色酸2R为底物测定辣根过氧化物酶的研究

变色酸 2R(CT2R)是一种具有电化学活性的物质 ,在碱性条件下 ,该物质在滴汞电极上 - 6 6 0mV(vs.SCE)左右产生还原波 ,加入H2 O2 和辣根过氧化物酶 (HRP)后 ,该物质被氧化生成具有非电化学活性的物质 ,导致溶液中游离的CT2R浓度降低 ,相应还原波波高降低 ,HRP在一定含量范围内与伏安峰的降低值具有良好的线性关系。通过测定波高的降低值可测定HRP ,测定游离HRP的线性范围是 4 .0× 10 -5～ 4 .0× 10 -3 g/L。对酶促反应的动力学进行了研究 ,反应的米氏常数Km =1.38mmol/L ,最大反应速率Vmax=5 3.9nA/min。