不同构象铂(Ⅱ)配合物与G-肌动蛋白作用的光谱研究

The cyclohexamethylene-diamine squaric acid platinum(Ⅱ) complexs(R,R, S,S) binding to G-actin and the consquence conformation change were studied by N-(1-pyrenyl) maleimide(NPM) labeled fluorescence and intrinsic fluorescence. The binding and chemical kinetics were determined by fluorometry. The results showed that when R (Pt/actin molar ratio) was lower than 30, the Pt binded to G-actin strong binding sites(-SH), when R was larger than 30, the Pt binded to G-actin weaker binding sites. The consquence conformation changes were determined by CD. The CD results showed that R was smaller than 60, G-actin α-helix contents decreased slowly, R was larger than 60, G-actin conformation changed obviously. The reaction of R,R complex of platinum(Ⅱ) S,S complex of platinum(Ⅱ) with G-actin was similar to that of with S,S complex of platinum(Ⅱ).     

环已二胺铂(Ⅱ)类配合物跨人红细胞膜动力学研究

60年代未, Rosenberg和 Van Camp首先发现了顺式二氯二氨合铂 ?具有抗肿瘤活性 [1]。虽然顺铂用于抗癌药疗效很高,但它的毒副作用也较大。因此寻找高效、低毒的铂类抗癌药,进行了数千种铂配合物的合成,但目前用于临床的仅有几个。顺铂的抗癌机制已进行了大量研究。普遍认为它的靶分子是 DNA,它能抑制 DNA的合成 [2]。然而顺铂在临床上的毒副作用已经表明它作用的靶分子不仅仅是 DNA。细胞膜是铂类配合物进入细胞内的第一道屏障,因此研究不同铂类配合物与细胞膜的作用不仅对进一步认识这类抗癌药物的药理和毒性机制具有重要意义,…     

螯合剂与牛血清白蛋白竞争镉作用的研究

研究了十一种螯合剂使结合在牛血清白蛋白(BSA)上的镉活动化的能力。由凝胶色谱法测得的F值将螯合剂活动镉的能力排成以下顺序:DTP>EDTA>EGTA>NTA>TRIEN>;PEN>CYS>HIS>SA氨羧络合剂型配体能有效地与BSA竞争,而且它们的lgF与lgK_CdL间有一线性关系。     

氧钒（Ⅳ）离子与G－肌动蛋白的相互作用

用凝胶色谱法以及荧光光谱和ＣＤ谱研究ＶＯ￣（２＋）与Ｇ－肌动蛋白的作用。结果表明，在一个Ｇ－肌动蛋白分子上有一个ＶＯ￣（２＋）的强结合部位和几个弱结合位点。随ＶＯ￣（２＋）与肌动蛋白的摩尔比增加，ＶＯ￣（２＋）先结合在强结合位点上，使α－螺旋含量增加，蛋白质构象变得更为紧密。更多的ＶＯ￣（２＋）结合在弱结合位点上，使α－螺旋含量降低，构象变得更为开放。用光散射法测定Ｇ－肌动蛋白缔合动力学，发现在低浓度ＶＯ￣（２＋）影响下，ＶＯ￣（２＋）和Ｍｇ￣（２＋）一样，促进缔合，而在浓度高时，缔合反而受到抑制。但是都未改变线性缔合本质。结果提示ＶＯ￣（２＋）与Ｍｇ￣（２＋）相似，可能结合在钙的强结合部位上。     

铂配合物cis-[Pt(NH_3)_2(4-mepy)Cl]NO_3与甲基-谷胱甘肽作用的NMR研究

使用质子核磁共振方法测定了新的抗癌活性配合物cis－[Pt（NH3）2（4－mepy）Cl]＋与甲基-谷胱甘肽（GS－Me）的反应及其动力学．结果表明Pt与GS－Me间形成1：1加合物．为了解结合部位，对Pt－GS－Me配合物进行pH滴定，由GS－Me的质子核磁共振谱对pH的依赖关系判断Gs－Me只通过S原子与Pt配位，而氨基和羧基不参与配位反应．由配体吡啶环质子核磁共振随时间的变化，提出了两步反应机制：首先GS－Me通过S原子与Pt配位，然后由于S配位的高度反位效应使反应的NH3活动化．通过1HNMR方法测定了第一步反应的速率常数k＝0．017L·mol－1·s－1（pH3．1）和k＝0．013L·mol－1·s－1（pH7．2）．     

氯化铕对大黄愈伤组织生长及超微结构的影响

以掌叶大黄的愈伤组织为材料，研究了不同浓度氯化铕对其生长的影响，并利用透射电镜技术研究了氯化铕对大黄细胞超微结构的影响。实验结果表明，低浓度氯化铕促进愈伤组织生长，高浓度则抑制生长，浓度达到１００ｍｇ／Ｌ则可导致大黄外植体全部死亡。氯化铕对大黄的促进作用可被钙调蛋白的拮抗剂氯丙嗪抑制。１０ｍｇ／Ｌ氯化铕可使大黄愈伤组织的细胞形态发生明显变异。     

镉(Ⅱ)与牛血清白蛋白的相互作用及pH、钙(Ⅱ)、锌(Ⅱ)和表面活性剂的影响

本文用恢复电位法、荧光分光光度法及粘度法研究了镉(Ⅱ)与牛血清白蛋白(BSA)的配位平衡和pH的影响。结果表明BSA有两类镉结合部位(2个强结合和10个弱结合部位)。Cd—BSA配位反应受pH影响,在近中性pH范围Cd(Ⅱ)与BSA结合未接近饱和时,以CURFIT程序对结合曲线拟合发现,每摩尔BSA平均结合Cd(Ⅱ)摩尔数的对数值与游离镉浓度的对数间成线性关系,进一步用Marguardt法处理得到Cd(Ⅱ)与BSA结合平衡方程式:N =K[Cd²⁺]^m,K和m均为pH函数。构象研究表明H⁺和Cd(Ⅱ)的结合都能引起BSA构象改变。用凝胶色谱法测定了Zn(Ⅱ)、Ca(Ⅱ)、吐温—80和十二烷基硫酸钠(SDS)对Cd—BSA结合的影响。Z_n(Ⅱ)可以竞争Cd(Ⅱ)在BSA上结合部位使Cd(Ⅱ)活动化。SDS能够有效抑制Cd(Ⅱ)与BSA结合,这种作用可能与SDS引起BSA构象改变有关。     

铂配合物cis—[Pt（nh3）2（4—mepy）Cl]NO3与甲在—谷胱甘肽作…

使用质子核磁共振方法了新的抗癌活性配合物ｃｉｓ」Ｐｔ（ＮＨ３）２（４－ｍｅｐｙ）Ｃｌ「＾＋与甲基－谷胱甘应及其动力学。结果表明Ｐｔ与ＧＳ－Ｍｅ间形成１：１加合物。为了解结合部位，对Ｐｔ－ＧＳ－Ｍｅ配合物进行ｐＨ滴定，由ＧＳ－Ｍｅ的质子核磁共振谱对ｐＨ的依赖关系判断Ｇｓ－Ｍｅ只通过Ｓ原子与Ｐｔ配位，而氨基和羧基不参与配位反应。     

顺-二氯二氨合铂(Ⅱ)与红细胞膜蛋白的相互作用

顺铂可与红细胞膜蛋白结合,并使膜收缩蛋白交联聚合,巯基是顺铂的可能结合部位,顺铂造成膜蛋白构象或在膜内组装的改变,这些结果支持了我们提出的顺铂作用的多靶分子模型。