人胎盘膜铁蛋白同类型双亚基功能、铁核结构和释放铁动力学研究

以人胎盘组织为实验材料,小批量制备电泳纯人胎盘膜铁蛋白(HPMF),对其结构与功能进行研究.十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术揭示,HPMF蛋白壳由分子量分别为15 kDa(MF15)和20 kDa(MF20)的亚基组成,其中MF15蛋白含量约为MF20的3倍.经肽质量指纹图谱(PMF)技术鉴定...     

MALDI-TOF质谱和电子光谱技术研究人血清铁蛋白释放铁的动力学

采用MALDI-TOF质谱技术研究血清混合蛋白质的组成,用电子光谱技术分析人血清铁蛋白(Serumferritin,SF)释放铁的动力学过程和规律.结果表明,在人血清中,以Na₂S₂O₄为电子供体时,SF释放铁的速率极快,无法采用常规分光光度法进行检测;以抗坏血酸为电子供体时,SF以一级反应动力学方式释放铁,认为人血清中其它蛋白质协助或参与调控铁蛋白进行快速释放铁反应,从而满足人体对铁的需求.     

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术研究人血清转铁蛋白稳定性及裂解产物

制备质谱纯人血清转铁蛋白(HTF),供分子结构分析。选用SDS-PAGE、胶外酶解、基质辅助激光解吸/电离质谱技术(MALDI-TOF)、数据库检索和比对技术鉴定铁饱和HTF、双铁HTF(HTF-2Fe3 )、单铁HTF(HTF-Fe3 )和脱铁HTF(apoHTF)的稳定性和裂解产物。以乙腈溶液作为洗脱相,发现铁饱和HTF在RP-HPLC分离纯化过程中产生裂解现象。铁饱和HTF和HTF-2Fe3 经乙腈处理后均能产生不同分子量的短肽裂解产物,指出HTF结构稳定性与络合铁离子数量有关。铁组分改善了HTF分子结构的稳定性。采用比对法,研究在乙腈作用下HTF裂解成为各种各样短肽的规律,初步阐明其裂解机理。在乙腈作用下,HTF可能通过蛋白质去折叠途径,形成不同多聚态HTF或多肽裂解产物。推测目前用于临床诊断先天性糖基化紊乱(CDG)和慢性酒精滥用(CAA)疾病低准确率的起因可能是受HTF裂解产物或多聚体的干扰。