共振瑞利散射法对普萘洛尔特效适配体系的手性分析

本文提出了对于手性药物普萘洛尔手性识别和手性分析的新方法。 该方法引用基于氧化石墨烯的指数富集配体系统进化筛选技术(GO-SELEX),经过10轮优化筛选出对心血管药物普萘洛尔有高度亲和力的特效适配体。 然后通过共振瑞利散射光谱法(RRS)对反应体系进行特效性检测,实验表明S-普萘洛尔和R-普萘洛尔有迥然不同的光谱差异,S-普萘洛尔与特效适配体结合后的RRS显著增强,而R-普萘洛尔与适配体结合后的RRS几乎没有变化。 据此可以对心血管药物手性普萘洛尔进行有效的手性识别。 在考察反应体系和实验条件的基础上,可对S-普萘洛尔进行实验检测,同时对外消旋体中的R-普萘洛尔进行计算分析。 实验对S-普萘洛尔的线性范围为5~275 nmol/L,检测限为0.5 nmol/L。 方法应用于外消旋药片的分析检测,结果令人满意。 实验表明,RRS检测特效适配体结合的手性靶标体系会彰显不同的光谱差异,从而可对手性对映体进行手性识别,尤其是可利用其光谱差异实现同时测定的手性分析,方法可在特殊情形下不经分离而同时测定手性对映体,具有推广应用价值。     

利用靶标非固定化的氧化石墨烯GO-SELEX法筛选手性对映体L-肉碱适配体

采用非固定靶标的GO-SELEX法筛选L-肉碱特异性结合的适配体。利用核酸外切酶法制备单链文库,最终经过13轮筛选获得了高富集度的适配体文库。以共振瑞利散射技术监测适配体筛选过程,获得亲和力最高的适配体文库进行高通量测序。再通过分析比对高重复度序列的自由能值、二级结构预测模型等参数确定了10条候选序列。最后鉴定筛选得到一条特异结合L-肉碱的最佳适配体,命名为CA04。为后续建立检测肉碱手性对映体的新方法奠定基础。