透明质酸-量子点的制备及应用

基于量子点(QD)独特的光学成像特性, 采用化学合成法制备了透明质酸(HA)修饰的水溶性纳米量子点(HA-QD), 并将其应用于特异性受体CD44的识别研究中. 体外细胞实验结果证实, 在透明质酸受体的介导下, 该纳米复合物可使小鼠肺腺癌细胞LA795显示特异性的荧光成像. 本研究为建立针对透明质酸受体的肿瘤活体检测及研究肿瘤的发生发展提供了重要的纳米靶向荧光探针.     

芽孢杆菌L4所产角蛋白酶的纯化工艺、理化性质及其应用研究

根据芽孢杆菌L4菌株发酵产生的角蛋白酶的分子量和等电点等特征,分别采用硫酸铵盐析沉淀,Sephadex G-75凝胶过滤、DEAE-cellulose 52离子交换和Sepharose 4B凝胶过滤等色谱层析对其进行分离纯化,经SDS-PAGE检测呈现单一条带,分子量为149kD;变性电泳结果显示,该酶由4个分子量约为37.5kD的亚基组成;采用等电聚焦电泳测得其等电点为7.76,并通过纸层析法初步确认该酶为高甘露糖型糖蛋白;最后通过羊毛水解实验确认该酶具有水解羊毛角蛋白的能力,在羊毛仿羊绒等领域具有一定的应用价值.     

基于点击化学反应的免疫荧光检测方法的建立和应用

本研究介绍了一种新型免疫荧光标记方法及其在细胞荧光检测中的应用技术．首先,合成了两个关键的化合物6-叠氮-己酸琥珀酰亚胺活性酯和4-乙炔基-N-乙基-1,8-萘酰亚胺,并将合成的6-叠氮-己酸琥珀酰亚胺活性酯与抗her2抗体Anti-HP15的游离氨基偶联获得叠氮化IgG,随后通过铜离子催化4-乙炔基-N-乙基-1,8-萘酰亚胺中的炔基与标记抗体的叠氮基团进行点击化学反应,同时以NHS-FITC和NHS-Rhodamine标记的抗体为阳性对照,确认了采用该标记方法的灵敏度,其检测限可达0.1 μg,EC50与阳性对照相当．然后在细胞水平进行染色分析,结果表明,叠氮标记抗体可有效应用于免疫荧光染色分析．最后,采用激光共聚焦三通道复合荧光分析法对不同标记方法及其对应的免疫荧光显色方法进行研究,确认了采用本研究开发的方法标记的抗体可与其他免疫荧光技术同时使用,且结果互不干扰．本研究通过开发一种新型的抗体标记技术,建立了一种新的免疫荧光抗体分析方法,并在细胞水平上进行了应用验证,丰富了免疫荧光抗体检测手段,该方法在未来的免疫研究中具备发展潜力和广泛应用前景．     

轴承钢早期胶合故障静电在线监测方法及试验

采用自制静电传感器进行润滑条件下轴承钢点接触滑动摩擦胶合故障在线监测试验研究.首先分析了磨损过程静电产生机理和静电感应原理,在此基础上设计研制了磨损区域静电传感器并进行轴承钢胶合故障试验,研究了磨损区域静电信号去噪方法,分析了载荷和转速对摩擦系数和静电信号的影响.研究结果表明:奇异值差分谱理论适用于静电信号去噪,取得了较好的效果;静电信号与摩擦系数同时监测到胶合的发生,具有一致性,并且静电在线监测技术能够在胶合故障发生前监测到异常,为视情维修提供支持;静电信号反映了4个阶段(磨合磨损,稳定磨损,早期胶合以及胶合阶段);在稳定磨损阶段,摩擦系数随载荷的增大而降低,随转速的升高而降低,静电信号均方根值随载荷的变化很小,随转速的升高而增大.     

纤维素磁性微球在病原微生物检测中的应用研究

采用反向悬浮包埋技术和高速匀浆法制备了不同粒径的纤维素磁性微球,扫描电镜和铁离子分析结果表明,最佳粒径为5.82μm。后采用自行构建并表达的融合蛋白CBD-ProA和沙门氏菌多价抗体对最佳粒径的纤维素磁性微球进行活化,获得免疫磁性微球,其抗体偶联量为186.8mg/mL。最后采用致敏的免疫磁性微球分别对污染沙门氏菌的饮用水、牛奶和花生酱等样品进行免疫磁性捕获及分子鉴定,其检测限均可达10cfu/100mL。本研究开发的免疫磁性捕获技术,具有微球活化速度快、工艺简单、使用便捷等优势,同时,建立的免疫磁性捕获-PCR的方法与国标法相比,检测时间缩短48h,在食品安全、环境检测等方面具有实用价值。