Box-Behnken设计毛细管液相色谱法拆分α-氨基酸对映体的研究

将L-脯氨酸通过3-缩水甘油丙基三甲氧基硅烷键合到球型多孔硅胶基质上,制备了手性配体交换色谱固定相.采用高压匀浆法将制备的填料填充到毛细管柱中,在自组装的毛细管液相色谱仪上对3种α-氨基酸对映体进行了拆分.利用Box-Behnken设计对影响因素(流动相中乙腈的体积分数、中心离子Cu~(2+)的浓度、流速)进行优化,以最大保留时间和分离度为响应值,借助二次多元回归方程,建立了相应的数学模型.响应曲面图表明:DL-天冬酰胺在5%乙腈、5 mmol/L Cu~(2+)、流速0.139 μL/min,苏氨酸在10%乙腈、5 mmol/L Cu~(2+)、流速0.167 μL/min,丝氨酸在5%乙腈、7 mmol/L Cu~(2+)、流速0.167 μL/min的条件下均能得到基线分离.表明通过所制备的手性固定相,采用配体交换色谱模式可获得拆分DL-氨基酸的理想效果.     

色氨酸与2,3-二氯-5,6-二氰-1,4-苯醌荷移反应的研究

用分光光度法研究了色氨酸与2,3-二氯-5,6-二氰-1,4-苯醌(DDBQ)的荷移反应.由实验得知,在硼砂缓冲溶液中,40℃水浴加热30min,两者可生成稳定的1 : 2型荷移络合物.此络合物的λmax=341nm,表观摩尔吸光系数ε=1.4×105L·mol-1·cm-1,浓度在2-12pg/mL的范围内符合比可定律.回收率在98.73%-101.7%之内,相对标准偏差在3.2%以内.