带有EGF受体干扰序列的γ干扰素新分子抗肿瘤细胞增殖活性的提高

利用基因工程技术,将天然IFN-γ分子的N端132个氨基酸与带有上皮生长因子(EGF)样多肽C端保守序列融合,构建了干扰素重组体IFN-γ132PGIX_(16).其中X_(16)由EGF样多肽C端16个氨基酸组成,PGI为连接肽序列。将此重组体基因插入表达载体pBV220P_RP_L串连启动子下游,转化大肠杆菌DH5α,在cIts857基因的调节下,通过升温诱导表达.表达产物与其母体天然IFN-γ相比,不仅保持了较高的抗病毒活性,抗病毒滴度达530MU/L菌液,而且明显地提高了抗肿瘤细胞增殖活性.在EGF存在的条件下,干扰素重组体的抗鼻咽癌细胞CNE-2增殖活性明显高于其母体分子(p<0.01).提示重组体分子IFN-γ132PGIX_(16)同时具有EGF受体干扰活性.     

含二茂铁光电探针的合成及与葫芦脲的包络研究

合成了一种光电双功能探针(Fc-C≡C-Ph-Bipyridine),采用紫外光谱和电化学的方法对葫芦脲CB[7]和二茂铁衍生物的包络行为进行了研究,并计算了包络比和包络常数。研究结果表明,二茂铁衍生物与CB[7]形成了稳定的包络物,包络比为1∶1,包络常数达4.8(±1.8)×105L.mol-1,实验得到的光谱学结果有力地支持了电化学结果。     

行列式按行（列）展开法则及其推论的新证法

行列式按行（列）展开法则及其推论的新证法吴有炜，李玉英（无锡轻工大学，无锡２１４０３６）（镇江九中，镇江２１２００３）行列式按行（列）展开法则及其推论可表示如下：这里。阶行列式Ｄ—ｄｅｔ（ａｉｌ），Ｍｉｊ、Ａｉｌ为元素。ｔｉ相应的余子式和代数余子式．...     

人α-干扰素cDNA在转化的烟草植株中表达

本试验成功地将人的α-干扰素cDNA导入烟草细胞中,并得到了产生活性干扰素的转化烟草植株。将人的α-干扰素的cDNA通过平头末端连接的方法插入到植物表达质粒pAP2034中的T-DNA转录子1的启动子及其转录子7的加尾信号间的BamHI位点,构建了重组质粒piG3031,将此重组质粒导入Ti质粒载体pGV3850的T区,利用农杆菌感染叶盘的方法转化普通烟草1551,得到了抗卡那霉素的转化植株。DNA的Southern杂交表明:人的α-干扰素基因随同T-DNA一起整合进了烟草基因组中,新霉素磷酸转移酶Ⅱ(NPTⅡ)的检测表明:转化植株之所以能抗卡那霉素是因为NPTⅡ酶基因表达的缘故。而干扰素的生物活性检测的结果说明转化植株能产生有活性的α-干扰素。     

中国人促红细胞生成素基因组的克隆及其在COS-7细胞中的表达

本文利用PCR技术,从正常人胎肝染色体DNA库中分离克隆了长度分别为506bp,465bp的中国人促红细胞生成素(EPO)基因组片段。506bp基因片段包括外显子2(信号肽),内含子2和外显子3;465bp片段包括外显子4,内含子4和外显子5。通过在引物中设置的酶切位点将两个克隆片段进行了正确的拼接,从而得到了约1.0kb的EPO次全基因组片段,它包括除信号肽中第2,3,4位氨基酸外的所有编码区及两个内含子序列。 所克隆的次全EPO基因组插入表达载体pSV2-dhfr中的不同克隆位点,构建了3种不同的转移载体质粒,分别转染导入COS-7细胞后,3种转移载体质粒转染的细胞上清液都有明显的EPO活性。本工作证明仅含有内含子2,4序列,去除负调控区和氧敏感区序列的人次全EPO基因组可以在COS-7细胞中获得表达。     

转基因水稻植株再生及外源人α-干扰素cDNA的表达

本文使用转化脂介导转化法(Lipofectin-mediated transformation)成功地将含有人α-干扰素(Hu-α-IFN)cDNA以及与其连锁的新霉素磷酸转移酶(Npt-Ⅱ)基因的E. coli质粒pIG3031导入到水稻(indica type rice)的原生质体内,并由此获得转化愈伤组织。基于Npt-Ⅱ酶活性的测定结果表明转化频率高达10％。筛选出的转化愈伤组织在分化培养基上再生出了完整的籼稻转基因植株。Southern杂交分析证明,外源Hu-α-IFN cDNA己整合到水稻基因组内;RNA条带杂交结果显示,外源Hu-α-IFN cDNA在T-DNA转录子1启动子(P1′)的控制下,在转化水稻细胞中有效地进行了转录;体外生物活性检测表明,转化植株组织抽提物中含有干扰素特有的抗病毒活性,说明外源Hu-α-IFN cDNA可在水稻细胞内正确表达。     

弱选择下局部更新过程的固定时间

双策略2×2对称博弈有限总体的进化动态本质上是一个随机过程.在双策略系统中,如果A策略者占优B策略者,则A策略会在总体中得到扩散,在随机动态下,最终达到总体内全是A策略者或全是B策略者的同源状态.研究在弱选择下的局部更新过程中,总体达到同源状态时的固定时间.结果表明,在弱选择下,A、B两个策略的条件固定时间相等,且仅依赖于两个策略收益差的线性部分,而平均固定时间仅依赖于两个策略收益差的常数部分.最后通过图形表明了固定时间与系统总体数、博弈收益及选择强度间的关系.     

1,4-二甲基-6,8-二甲氧基-9,10-蒽醌的合成及其与牛血清白蛋白和DNA的相互作用

合成了大黄素类蒽醌衍生物1,4-二甲基-6,8-二甲氧基-9,10-蒽醌(1)并应用紫外光谱、荧光光谱、圆二色谱等方法研究了其与牛血清白蛋白(BSA)和小牛胸腺DNA(ct-DNA)的相互作用.荧光光谱结果表明,化合物1与BSA的相互作用主要以静态猝灭方式使BSA的内源性荧光发生猝灭;圆二色谱表明,化合物1通过疏水作用及形成氢键破坏了α-螺旋结构,导致BSA分子中的α-螺旋含量下降.在pH 7.4时固定DNA的浓度,加入化合物1后,紫外光谱的最大吸收峰发生红移且吸光度加大.荧光光谱表明,化合物1与DNA-4S green NC的结合为竞争性抑制,并可使溶液体系荧光猝灭;圆二色谱表明,随着化合物1的加入,DNA碱基间作用能迅速减弱,表明化合物1与DNA之间为嵌插作用.此外,MTT方法的结果表明,化合物1对结肠癌细胞株HCT116增殖有明显的抑制作用.     

A NEW HUMAN INTERFERON-γ MUTANT HARBORING EGF RECEPTOR-INTERFERING SEQUENCE POSSESSES HIGH ANTIPROLIFERATIVE ACTIVITY

An interferon gamma (IFN-γ) mutant gene harboring an additionamal epidermal growth factor (EGF) sequence at its 3' terminal was constructed and highly expressed in E. coli by using pBV220 as a vector. The new fusion protein-lFN-γ-EGF possesses not only high antiviral activity, but also high antiproliferative effect as demonstrated by ~3H-TdR incorporation method using CN Ⅱ ceils which are rich in EGF receptors.