锌指蛋白ZNF191(243~368)突变体I323W和R327W与寡聚核苷酸作用的荧光光谱

利用PCR方法对锌指蛋白ZNF191(243~368)的Ile323和Arg327进行定点突变, 成功地获得了突变体蛋白ZNF191(243~368) I323W和R327W; 并利用荧光光谱研究了锌指蛋白和它的突变体蛋白ZNF191(243~368)I323W和ZNF191(243~368) R327W与寡聚核苷酸的相互作用. 以溴化乙锭(EB)为荧光探针, 考察了I323W和R327W的突变对锌指蛋白ZNF191(243~368)结合寡聚核苷酸的影响.并计算了锌指蛋白突变体I323W和R327W与DNA的结合常数K_Z. 讨论了可能的结合模式.     

一个新锌指蛋白的表达和纯化--ZNF191蛋白及其锌指区ZNF191(243-368)

通过PCR方法 ,将ZNF1 91基因的cDNA的第一开链阅读框 (ORF)及其锌指区ZNF1 91 ( 2 43 36 8)装入PTSA 1 8表达载体 ,以E .coliBL2 1 (DE3)为宿主菌 ,成功地表达了目标蛋白 ,并通过DEAE5 2 ,CM2 3,Heparin Sephrose 4B等层析柱对目标蛋白进行了纯化 .ZNF1 91锌指蛋白及其锌指区ZNF1 91 ( 2 43 36 8)蛋白经考马斯亮蓝染色的聚丙烯酰胺凝胶电泳检查 ,纯度达单一带水平 .其中对ZNF1 91蛋白经N端氨基酸微序列分析证明为目的蛋白 .     

一个新锌指蛋白的表达和纯化

通过PCR方法,将ZNF191基因的cDNA的第一开链阅读框(ORF)及其锌指区ZNF191(243-368)装入PTSA-18表达载体,以E. coli BL21 (DE3)为宿主菌,成功地表达了目标蛋白,并通过DEAE52,CM23,Heparin-Sephrose 4B等层析柱对目标蛋白进行了纯化． ZNF191锌指蛋白及其锌指区ZNF191(243-368)蛋白经考马斯亮蓝染色的聚丙烯酰胺凝胶电泳检查,纯度达单一带水平．其中对ZNF191蛋白经N端氨基酸微序列分析证明为目的蛋白．     

锌指类蛋白研究的新进展

综述了锌指蛋白的最新研究状况,重点评述了锌指蛋白结构与功能的研究方法及最新进展.