荧光猝灭法和动态光散射法研究1-丙醇和2-丙醇对水溶液中 蛋白质构象的影响

应用荧光猝灭法和动态光散射技术测定牛血清白蛋白(BSA)与荧光素在正丙醇-水和异丙醇-水混合溶剂中的相互作用距离和BSA的流体动力学半径, 研究正丙醇和异丙醇对水溶液中蛋白质构象的影响. 结果显示, 正丙醇-水和异丙醇-水混合溶剂中BSA与荧光素的相互作用距离和BSA的流体动力学半径随着正丙醇和异丙醇浓度的增加而先减小后增大, 表明低浓度的正丙醇和异丙醇有利于蛋白质形成紧密的构象, 而较高浓度的正丙醇和异丙醇则破坏蛋白质的紧密构象. 试验中观察到BSA与荧光素在正丙醇-水混合溶剂中的结合距离大于同浓度的异丙醇-水混合溶剂中的结合距离, 而BSA在前者的流体动力学半径小于后者, 说明无支链的正丙醇分子易于与蛋白质的疏水基团产生较强的疏水相互作用, 而带支链的异丙醇分子的疏水性较弱, 有利于与蛋白质分子的亲水基团相互作用而积聚在蛋白质表面.     

正丙醇和异丙醇对水溶液中牛血清白蛋白的构象及其荧光光谱的影响

通过测定牛血清白蛋白(BSA)-正丙醇-水和BSA-异丙醇-水体系中BSA的发射荧光(λex=280nm、295nm)和同步荧光(△λ=15nm、60nm),结合静态光散射技术,探索正丙醇和异丙醇对水溶液中蛋白质的构象和荧光光谱的影响.结果表明,正丙醇和异丙醇使蛋白质发生部分解折叠现象,低浓度的正丙醇和异丙醇水溶液能轻微增强蛋白质的结构稳定性.但是,总体上,正丙醇和异丙醇是弱的蛋白质变性剂,在浓度较高的体系中,体系的混合状态的变化对BSA的荧光强度的变化起主导作用.     

三种氨基酸在尿素-水混合溶剂中的体积性质

用精密密度法详细测定甘氨酸、L-丙氨酸、L-丝氨酸在尿素-水混合溶剂中的表观摩尔体积.计算了三种氨基酸从水到尿素-水混合溶剂的迁移偏摩尔体积,结合前期的氨基酸从水到尿素-水混合溶剂的迁移焓,探讨尿素-水混合溶剂的结构特点及其对氨基酸与尿素相互作用的影响.结果表明,尿素分子在水中自缔合,引起溶剂结构的变化并削弱其与氨基酸分子的结构相互作用,造成氨基酸从水到尿素-水混合溶剂的迁移偏摩尔体积和迁移焓随尿素浓度的增加而出现多个变化点,这一效应随着氨基酸疏水性的增强而增大,表明氨基酸的疏水性越强,其与尿素相互作用引起的去水化作用越明显.