利用体积排阻快速原位表征整体固定相的孔结构

利用体积排阻色谱原理,在自制的径向色谱柱上,测定了具有窄分子量分布且已知平均分子量418～190 000的聚苯乙烯标准品的保留数据,这些数据可用于计算柱子的外部(55．1％)、内部(4．9％)和总孔隙率以及整体材料孔尺寸分布的信息。此种技术用于整体填料孔结构的表征,具有无破坏性、原位、快速的特点。整体固定相的外部和总孔隙率高于颗粒填充柱,表明整体柱的高通透性;流速与压力关系的分析,证明了整体固定相在高流速下具有低背压的特征。     

聚合物整体固定相的制备及条件优化

采用无搅动原位聚合模式,在聚醚醚酮柱管中直接制备了聚合物整体固定相。通过扫描电镜观察到该整体固定相的孔径分布呈双峰模式,且孔结构均匀。用压汞法测定了该固定相的孔径分布、孔隙率及比表面积等参数,考察了致孔剂组成、聚合温度及交联剂含量等参数对固定相孔结构的影响,并对制备条件进行了优化。测定了流速与柱前压的关系,实验表明此整体固定相具有良好的通透性。通过对山羊血清和低聚核苷酸的分离分析,证明了所制备的整体固定相适合用于生物大分子的分离纯化。     

梯度加压毛细管电色谱分离蛋白质

 以1.5 μm无孔硅胶颗粒(non-porous silica,NPS)为固定相,采用电压和压力联合驱动流动相,用反相梯度加压毛细管电色谱(p-CEC)在7.5 min内实现了核糖核酸酶A、细胞色素C、溶菌酶和肌红蛋白等4种蛋白质的快速、高效的分离。比较了梯度加压毛细管电色谱和微柱液相色谱(μ-HPLC)分离蛋白质的结果,同时考察了固定相、离子对试剂三氟醋酸(TFA)浓度和电压等条件对梯度加压毛细管电色谱分离蛋白质的影响。结果表明,梯度p-CEC可以通过调节电压精细调节带电溶质的保留,提高分离选择性,缩短分离时间,得到较高的柱效。该方法在蛋白质分离分析及蛋白质组学的研究中具有很大的应用潜力，为高效快速地分离蛋白质开辟了新的途径。     

O8肽的HPLC分析与制备研究

系统建立了化学合成小分子肽(08肽)的反相HPLC分离分析方法．考察了色谱填料种类、流动相组成及梯度条件对样品分离的影响．通过从分析型到半制备型分离线性放大过程中分离条件与分离效果的关系的探讨．建立了等度洗脱条件下较大规模地分离制备该小肽的方法试验结果表明：硅胶基质的色谱柱比聚合物基质的色谱柱更适合于分离该小肽,而粒径(5μm．10μm)对分离的影响不大;较缓的梯度条件可以明显改善分离,但所需分离时间延长一在制备分离中应综合考虑分离效果与运行时间的关系。